Вирус чумы крупного рогатого скота

 

 

Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное

Учреждение Высшего Профессионального Образования

«Московская Государственная Академия Ветеринарной Медицины

И Биотехнологии им К.И. Скрябина»

 

Кафедра: Радиобиологии и вирусологии                                                           имени академиков А.Д. Белова и В.Н. Сюрина

 

Реферат

По дисциплине «Вирусология и биотехнология»

 

«Вирус чумы крупного рогатого скота»

 

 

 

Реферат                                                                           дата___________

принят                                                            кол-во баллов___________

к защите

Преподаватель  Третьякова Ирина Владимировна

 

 

 

 Москва, 2015

Содержание. 
   1. Введение……………………………………………………3 
   2. Характеристика вируса……………………………………4 
2.1. Таксономическая характеристика вируса болезни Ньюкасла………………………………………………………..4 
2.2.  Морфология вириона……………………………………..5 
2.3. Этапы репродукции вируса……………………………….7 
2.4. Антигенная структура и антигенная вариабельность вируса вируса болезни Ньюкасла……………………………………...22 
2.5. Гемагглютинирующие свойства………………………….23 
2.6. Особенности культивирования в различных живых системах…………………………………………………………24 
2.7. Органный патогенез (этапы)………………………………24 
   3. Диагностика болезни, вызываемой этим вирусом……….25 
3.1. Постановка предварительного диагноза………………25 
3.2. Анализ эпизоотологических данных………………………25 
3.3. Краткая характеристика клинических признаков………..26 
3.4. Краткая характеристика основных патологических изменений………………………………………………………..27 
   4. Виды патологического материала, направленные от больных и павших животных………………………………………………29 
   5. Этапы лабораторной диагностики………………………..30

5.1. Выделение вируса………………………………………….31

5.2Метод выделения вируса……………………………………31

5.3. Метод постановки реакции гемагглютинации…………..33

5.4. Метод идентификации  вируса…………………………….33

5.5. Метод титрования вируса………………………………….34

5.6.  Метод определения  вирулентности вируса……………...34

5.7. Метод определения  специфических антител…………….35 
   6. Специфическая профилактика…………………………….36 
   7. Заключение………………………………………………….43 
   8. Список использованной литературы……………………....44 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
1.Введение. 
 
Болезнь Ньюкасла (псевдочума птиц (Pseudopestis avium), азиатская чума птиц) -  это  высоко контагиозная вирусная инфекция, главным образом куриных, характеризующаяся пневмонией, энцефалитом, множественны¬ми точечными кровоизлияниями и поражением внутренних органов.

Впервые вспышки болезни Ньюкасла (БН) среди домашней птицы были зарегистрированы на Индонезийском острове Ява и собственно в Ньюкасле в 1926 году. На сегодняшний день вирус БН широко распространен в различных регионах мира , поражает многие виды диких и домашних птиц и внесён в список наиболее важных патогенов (лист А). Несмотря на проведение повсеместной вакцинопрофилактики, болезнь Ньюкасла до последнего времени остается самой массовой инфекцией птиц, трудно поддающейся контролю. С развитием промышленного птицеводства это заболевание приобрело пандемический характер, нанося огромный экономический ущерб отрасли. Немаловажную роль в этом процессе сыграл широкий международный обмен высокопродуктивными породами домашних птиц, часто проводимый без учета эпизоотической ситуации в конкретных странах.

 

 

 

 

2. Характеристика вируса.

 

2.1. Таксономическая характеристика вируса болезни Ньюкасла

 Семейство: Paramyxoviridae;

 Подсемейство: Paramyxovirinae;

 Род:  Paramyxovirus;

 Вид: вирус болезни Ньюкасла.

 

Семейство парамиксовирусы (от греч. para - около и myxa - слизь) - группа вирусов, поражающая позвоночных животных. Вирионы парамиксовирусов - частицы плеоморфной, чаще округлой формы, диаметром 150-300 нм, состоят из нуклеокапсида спиральной симметрии и  липопротеидной оболочки, на поверхности которой имеются выступы длиной 8-12 нм. Выступы расположены на расстоянии 7-10 нм друг от друга. Диаметр спирали нуклеокапсида равен 13-18 нм, шаг спирали 5,5-7,0 нм, длина около 1 мкм. Мол.м. вирионов 500-700 мД, -плавучая плотность в сахарозе 1,18-1,20 г/см3, коэффициент седиментации около 1000S. Парамиксовирусы чувствительны к жирорастворителям, формальдегиду, неионным детергентам и окисляющим агентам.

Геном представлен единой 1-спиральной линейной молекулой минус-РНК, состоящей из 15-16 тыс. нуклеотидов. РНК не обладает инфекционностью и составляет всего 0,5% массы вириона. В некоторой части вирионов содержится плюс-РНК. В вирионах обнаружено 6 полипептидов, три из которых связаны с нуклеокапсидом, а 3 входят в состав липопротеидной оболочки, причем 2 из последних являются гликопротеинами. Гликопротеины образуют выступы наружной оболочки и отвечают за адсорбцию вирионов на клеточной поверхности и влияние клеток. В вирионах содержится 70% белка, 20-25% липидов и 6% углеводов. Углеводы и липиды имеют клеточное происхождение.

Парамиксовирусы размножаются в цитоплазме, проникают в клетки путем сплавления оболочки вириона с клеточной мембраной. Транскрипция геномной минус-РНК осуществляйся в составе нуклеокапсида вирион-ассоциированной транскриптазой; образованные 60 информационных РНК обеспечивают синтез всех вирусспецифических белков. Репликация вириоиной РНК происходит в 2 этапа. На первом из них синтезируется плюс-нить РНК, на втором - минус-нити. Из минус-нитей РНК и белка формируются нуклеокапсиды, и в это же время наблюдаются включения в определенные участки клеточной мембраны вирусных иткопротеидов. Созревание вирионов происходит почкованием нуклеокапсидов через модифицированные участки клеточной мембраны.

 В семействе выделено  два подсемейства: Paramyxovirinae и Pneumovirinae.

             Подсемейство Paramyxovirinae состоит из трех родов: Paramyxovirus, Morbillivirus, Rubulavirus.

 Род Paramyxovirus включает  парамиксовирусы птиц (9 типов), и  вирусы парагриппа (4 типа). Все представители  обладают нейраминидазной активностью. Типичный представитель рода - вирус  парагриппа человека 1. Вирус парагриппа-1 патогенен для человека и мышей; вирус парагриппа-2 - для человека, обезьян и собак; вирус парагриппа-3 - для человека, обезьян, КРС и овец; вирус парагриппа-4 - для человека.

 Род Morbillivirus (от лат. morbillus - корь) включает вирус кор (прототипный вирус), вирус чумы КРС, мелких жвачных, собак и тюленей. Вирусы не обладают нейраминидазной активностью, имеют АГ-родство и имеют цитоплазматические и внутриядерные включения, содержащие вирусный рибонуклеопротеин.

 Род Rubulavirus включает вирус паротита, который обладает гемагглютинирующей, нейраминидазной и гемолитической активностью.

 

 

 

2.2. Морфология вириона. 

 Вирионы вируса болезни Ньюкасла состоят из частиц различной формы и размера (полиморфные). Большинство из них имеют округлую или овальную форму. Встречаются также филаментозные нитчатые формы и мелкие частицы. Большинство частиц покрыты хорошо выделяющейся оболочкой и имеют на поверхности выступы (реснички).

 По строению вирус болезни Ньюкасла сложный, так как кроме нуклеиновый кислоты и капсида в его состов входит и липопротеиновая оболочка (оболочечный вирус).

 В состав сердцевины  вирусов обычно входят белки  одного или нескольких типов, связанные с нуклеиновой кислотой. Вирусная нуклеиновая кислота  практически всегда окружена белковой оболочкой - капсидом. Поскольку объем информации, закодированной в вирусном геноме, ограничен, капсид, как правило, строится из идентичных субъединиц - капсомеров, которые, в свою очередь, образованы белками одного или нескольких типов. Капсомеры укладываются в капсидды с определенным типом симметрии.  По типу симметрии выделяют вирусы со спиральным, икосаэдральным или кубическим и вирусы со смешанным типом симметрии.

 Кубические капсиды  представляют собой косайдеры  обладающий примерно 20-ю треугольными поверхностями и 12 вершинами. Они формируют напоминающую сферическое образование структуру, но на самом деле это многогранник. В ряде случаев к вершинам таких косаэдрических многогранников прикрепляются особые липопротеиновые образования именуемые шипами. Роль этих шипов предположительно сводится к взаимодействию вирионов или вирусных частиц с соответствующими участками чувствительных к ним клеток хозяев. При кубической симметрии вирусная нуклеиновая кислота уложена плотно (свернута в клубок), а белковые молекулы окружают ее, образуя многогранник (икосаэдр). Икосаэдр – многогранник с двадцатью треугольными гранями, имеющий кубическую симметрию и приблизительно сферическую форму. К икосаэдрическим вирусам относятся вирус простого герпеса, реовирусы и др.

 Спиральный тип симметрии. Спиральные капсиды устроены  несколько проще. То есть капсомеры  составляющие капсид покрывают  спиральную НК и формируют  тоже достаточно стабильную белковую  оболочку этих вирусов. И при  использовании высокоразрешающих  электронных микроскопов и соответствующих методов приготовления препарата можно видеть спирализованные структуры на вирусах. При спиральной симметрии капсида вирусная нуклеиновая кислота образует спиральную (или винтообразную) фигуру, полую внутри, и субъединицы белка (капсомеры) укладываются вокруг нее тоже по спирали (трубчатый капсид). Примером вируса со спиральной симметрией капсида является вирус табачной мозаики, который имеет палочковидную форму, а его длина составляет 300 нм с диаметром 15 нм. В состав вирусной частицы входит одна молекула РНК размером около 6000 нуклеотидов. Капсид состоит из 2000 идентичных субъединиц белка, уложенных по спирали.

 Смешанный или сложный  тип симметрии. Как правило, такой  тип симметрии выявляется главным  образом среди бактериальных вирусов. И классическими примерами служат те фаги, кишечной палочки или умеренные фаги. Это сложные образования, имеющие головку с внутренним нуклеиновым содержимым, различного рода придатки, хвостовой отросток, разной степени сложности устройства. И каждый компонент таких частиц наделён определённой фунцкией, реализующейся в процессе взаимодействия вируса с клеткой. Иными словами сложный тип симметрии представляет собой сочетание кубической симметрии, головка – это многогранник косайдер и палочковидные образования – это хвостовые отростки. Хотя среди вирусов бактерий существуют тоже довольно просто организованные вирионы которые являются примитивными нуклеокапсидами, сферической или кубической формы. Наиболее сложно устроенными являются вирусы бактерий, по сравнению с вирусами растений и вирусами животных.

 Тип симметрии вириона  вируса болезни Ньюкасла- спиральный.

 Размер вирионов от 60 до 300 нм.

 Нуклеиновые кислоты  вирусов. Независимо от сложности  строения вирусов нуклеиновая  кислота в нуклеокапсидах представлена одной из ее разновидностей - ДНК или РНК и никогда вместе взятыми. Каждая из них является геномом. В разных по величине вирионах в геноме насчитывают от нескольких до многих десятков генов.

Геномные нуклеиновые кислоты вирусов отличаются от клеточных необычайным разнообразием структуры и формы. Так, вирусные ДНК могут иметь не только двухцепочечную, но и одноцепочечную цельную структуру или же «разрыв-дефект» в одной цепи, а по форме, кроме обычной линейной, - циркулярно-замкнутую (кольцевую). В еще большей степени различаются вирусные РНК: одно- и двухцепочечные; цельные (сплошные) и фрагментированные на 2-3...8-12 сегментов; линейные и кольцевые, как у вирусных ДНК.

 У вирусов, геном которых  представлен двухцепочечной ДНК, механизм ее репликации обеспечивается ДНК-зависимой ДНК-полимеразой. Считается, что у кольцевых форм вирусных ДНК способ репликации более эффективен, чем у линейных. Они устойчивее к клеточным эндонуклеазам и, вероятно, потому вирусные ДНК через кольцевые стадии интегрируют с клеточным геномом.

Среди РНК-содержащих вирусов с одноцепочечным линейным типом нуклеиновой кислоты различают вирусы с позитивным и негативным геномом.

У вирусов с позитивным геномом РНК обладает функцией информационной, т. е. одновременно служит матрицей для синтеза вновь образующихся вирионных РНК и белков. Линейные вирусные РНК со свойствами иРНК принято обозначать знаком «плюс», а вирусы, их содержащие, называть «плюс-нитевыми».

У вирусов с негативным геномом РНК не обладает информационной функцией, вследствие чего ее обозначают знаком «минус», а вирусы называют «минус-нитевыми». Синтез иРНК у такого рода вирусов осуществляется в зараженной клетке на матрице минус-РНК с помощью вирусоспецифического фермента транскриптазы.

Некоторые РНК-содержащие вирусы могут являться амбисенсвирусами и содержать как «плюс», так и «минус» нити РНК. Особым свойством обладает геномная РНК так называемых ретровирусов, имеющих в своем составе реверсальную (обратную) транскриптазу, или РНК-зависимую ДНК-полимеразу. С помощью этого уникального вирусспецифического фермента на ее матричной основе последовательно синтезируются вначале одна нить ДНК, затем и другая, которые, замкнувшись в кольцо, интегрируют с клеточным геномом, после чего с участием РНК-полимеразы клеток происходит переписывание информации на РНК.

Поскольку синтезированная таким окольным путем иРНК не просто комплементарна геномной, как у минус-нитевых вирусов, а полностью гомологична ей, то ретровирусы с полным правом относят к «плюс-нитевым».

 Геном вируса болезни Ньюкасла представлен единой линейной молекулой минус-РНК.

 

2. 3. Этапы репродукции вируса (клеточный патогенез). 

 Вирусы производят  себе подобные частицы в таком  огромном количестве  и столь  своеобразным способом, что это  явление стали именовать репродукцией, так как здесь копируются молекулы нуклеиновых кислот и, согласно заключенной в них генетической информации, синтезируются вирусные белки.

 При большом разнообразии  механизмов репродукции вирусов  общим для всех видов является:

1) источником мономеров для синтеза нуклеиновых кислот служат нуклеотиды клетки;