Фитоэкдистероиды растений Silene brahuica, S.claviformis и Rhaponticum carthamoides

Из полученных результатов  можно заключить, что соединение 13 является новым экдистероидом - полиподин В-22-О-бензоатом.

Схема 6. Химические превращения полиподин В-22-О-бензоата (13)

Результаты исследования биологических свойств фитоэкдистероидов

 

Исследование биологической  активности фитоэкдистероидов, проведенные  в лаборатории фармакологии (зав.лаб. д.м.н. Сыров В.Н.) ИХРВ АН РУз показали, что выделенные из растения S.claviformis экдистероиды: экдиcтерон, 2-дезоксиэкдистерон, 2-дезокси-a-экдизон, интегристерон А оказались малотоксичным, не вызывали аллергизирующего, раздражающего и других нежелательных эффектов. Вместе с этим исследуемые фитоэкдистероиды оказывали определенное анаболическое действие, повышали адаптационные возможности организма к стрессирующим воздействиям внешней среды.

Так, в частности экдистерон и интегристерон А, введенные  крысам (5 мг/кг внутрибрюшинно) перед  стрессорным воздействием (стресс вызывали у крыс самцов массой 160-180 г фиксацией их в положении на спине в течение 16 часов), существенно препятствовали развивающейся в этом случае типичной картине реакции напряжения. Так, в контроле относительная масса надпочечников увеличивалась по отношению к интактным животным на      28,6 %, одновременно в них наблюдалось падение содержания аскорбиновой кислоты и холестерина на 47,4 и 42,6 %. Масса тимуса уменьшалась на 36,6 %, а селезенки на 45,3 %, в желудке наблюдались отчетливые изъязвления. Масса печени также заметно уменьшалась, в ней наблюдалось падение содержания гликогена (на 45,6 %) и заметная активация перекисного окисления липидов, о

 

Таблица 5 

Влияние экдистерона, интегристерона А и экстракта элеутерококка на некоторые проявления реакции

напряжения у крыс, вызванной их 16-часовой  иммобилизацией в положении на спине (M±m, n=8)

Исследуемые показатели	Условия опыта
	Интактные животные	Стресс
		Контроль	Экдистерон	Интегристерон А	Экстракт элеутерококка
Надпочечники, мг/100 г	22,4±1,1	28,8±1,3*	23,3±1,4**	25,4±1,4	25,6±1,4
Аскорбиновая кислота, мг %	380±19	200±14*	306±11*,**	288±8*,**	248±11*,**
Холестерин надпочечников, мг %	2773±168	1592±162*	2273±77*,**	1988±112*,**	1858±86*
Тимус, мг/100 г	273±19	173±12*	218±4*,**	200±4*,**	213±6*,**
Селезенка, мг/100 г	662±31	361±10*	464±18*,**	402±12*,**	418±12*,**
Печень, мг/100 г	5365±186	3877±194*	4818±199*,**	4360±150*	4335±172*
Гликоген печени, мг%	2109±61	1147±45*	1859±48*,**	1792±57*,**	1483±65*,**
МДА печени, нмоль/мг белка	0,451±0,015	0,754±0,008*	0,515±0,028*,**	0,562±0,028*,**	0,657±0,038*,**
Количество изъязв-лений в желудке	0	2,00±0,46*	0,50±0,19*,**	0,75±0,16*,**	0,88±0,23*,**

 

Примечание:

* - достоверность различий  с показателями интактных животных (Р<0,05);  ** – с контролем

 

чем свидетельствовало  повышение на 67,2 % МДА в органе.

Исследованные же в этом тесте фитоэкдистероиды препятствовали гипертрофии надпочечников, а также  уменьшению в них запасов аскорбиновой кислоты и холестерина.

Экдистерон и интегристерон  А также достоверно защищали тимус  и селезенку от инволюции, препятствовали резкому уменьшению массы печени и оказывали выраженную тенденцию к нормализации в ней содержания гликогена и МДА. Значительно ослабляли фитоэкдистероиды и трофические нарушения в слизистой желудка, достоверно уменьшая в ней количество кровоточащих изъязвлений.

Кроме того, следует отметить, что у крыс, получавших экдистерон, потеря в общей массе тела составляла всего 8,9 %, а у получавших интегристерон  А  9,2 %. Оба препарата заметно  превосходили по своей эффективности  в этих условиях известное адаптогенное средство -  экстракт элеутерококка.

Таким образом, экдистерон и интегристерон  А уменьшают последствия стрессирующего воздействия на организм животных за счет их способности нормализовать  обмен веществ, носящий в условиях стресса катаболический характер.

По своей возможности адаптировать организм к не благоприятным воздействиям экдистерон и интегристерон А  более активны, чем экстракт элеутерококка.

ВЫВОДЫ

 

1. Исследованы на содержание  фитоэкдистероидов растения рода Silene brahuica, S.claviformis и Rhaponticum carthamoides.

2. Из корней S.brahuica выделено пять экдистероидов, два из них идентифицированы с известными веществами - экдистероном и силенеозидом С, а три экдистероида: интегристерон А-25-ацетат, силенеозид Н и силенеозид G оказались новыми. На основе химических превращений, интерпретации спектральных характеристик основных веществ и их производных установлено строение этих соединений.

3. Показано, что силенеозид  Н является 25-ацетат-22-О-a-D-галактозидом интегристерона А, силенеозид G - 3-О-a-D-галактопиранозид, 22-О-a-D-глюкопиранозидом экдистерона.

4. Впервые изучено  на содержание экдистероидов  растение S.claviformis. Разработана схема выделения экдистероидов из надземных органов       S.claviformis. Из растения выделено 6 экдистероидов, четыре из них : 2-дезокси-a-экдизон, 2-дезоксиэкдистерон, экдистерон и интегристерон А,  оказались известными, экдистероиды - экдистерон-20,22-ацеталь   изовалерианового альдегида и экдистерон-20,22-ацеталь эпиизовалерианового альдегида - новые. С помощью метода ¹H ЯМР предположительно определено, что эти два вещества  являются эпимерами.

5. Показано, что S.brahuica и S.claviformis являются новыми перспективными источниками экдистерона для получения препарата “экдистен”.

6. Из семян растения Rh.carthamoides выделено два экдистероида, один из которых - полиподин В-22-О-бензоат является новым соединением. Второе соединение идентифицировано с известным экдистероидом - a-экдизоном.

7. Впервые в результате  фармакологических исследований  была обнаружена адаптогенная активность экдистерона и интегристерона А.

 

Основное содержание диссертации изложено в следующих  работах:

-статьи:

1.Садыков З.Т., Рамазанов Н.Ш., Саатов  З. // Фитоэкдистероиды растений рода  Rhaponticum. Полиподин В-22-О-бензоат из Rhaponticum carthamoides. // Химия природ. соедин., 1997. № 6. с.851-853.

2. Садыков З.Т., Саатов  З. Фитоэкдистероиды растений  рода Silene. XIX. Строение силенеозида G // Химия природ. соедин., 1998. № 5. С. 663.

3. Садыков З.Т., Саатов  З. Фитоэкдистероиды растений рода Silene. XX. Интегристерон А - 25-ацетат из Silene brahuica // Химия природ. соедин., 1999. № 4. с. 492-493.

4. Sileneoside H, a new phytoecdysteroid from Silene brahuica.// Z.T. Sadikov, Z.Saatov, Jean-Pierre Girault, and Rene Lafont // J.Nat. Prod., 2000. 63. P. 987-988.

5. Ecdysteroids from Silene claviformis. Z.Sadikov, Z.Saatov, M.Garcia, J.-P. Girault and R. Lafont // Химия природ. соедин., 2001. №3. с. 223-225. 

-тезисы:

6. N.Sh.Ramazanov, Sadikov Z., Saatov Z. // Phytoecdysteroids of Rhaponticum carthamoides plants // XIII th Ecdysone Workshop. Jena. July 27-31. 1998. P.20.

7. Садыков З.Т., Саатов  З. Фитоэкдистероиды растений Silene brahuica // Материалы III конференции молодых ученых, посвященной памяти академика С. Ю. Юнусова // Химия природ. соедин., 1999. с. 13-14. (специальный выпуск).

  Кимё фанлари номзоди илмий даражасига талабгор Соди=ов Зафар Тур\унович 02.00.10-Биоорганик кимё, табиий ва физиологик фаол моддалар кимёси ихтисослиги быйича “Silene brahuica, S.claviformis ва Rhaponticum carthamoides ысимликлари фитоэкдистероидлари” мавзусидаги диссертациясининг

 

РЕЗЮМЕСИ

Калитли сызлар: Фитоэкдистероиды, S.brahuica, S.claviformis, Rh. carthamoides, ИК-, масс-, ¹Н и ¹³С ЯМР, ВЭЖХ, хроматография.

Тад=и=от объектлари: S.brahuica, S.claviformis ва Rh.carthamoides ысимликлари.  

Ишнинг ма=сади: S.brahuica, S.claviformis ва Rh.carthamoides ысимликларидан экдистероидларни ажратиш, уларнинг тузилишини ани=лаш ва биологик фаоллигини текшириш.

Тад=и=от методи: Экстракция, колонкали ва =о\озли хроматография, ю=ори самарали сую=лик хроматографияси (ЮССХ), ферментатив гидролиз, кислотали ва иш=орий гидролиз, физикавий тад=и=от усуллари (И+-, масс-, УБ-, ¹Н ва ¹³С ЯМР спектроскопия).

Олинган натижалар ва уларнинг янгилиги: S.brahuica, S.claviformis ва Rh.carthamoides ысимликлари экдистероидлари ырганилди. S.claviformis ысимлигидан экдистероидларни ажратиб олиш схемаси ишлаб чи=илди. S.brahuica ысимлигидан 5 та экдистероид ажратилди, шулардан 3 таси янги щисобланади.

S.claviformis ысимлиги биринчи марта ырганилиб, ызида экдистероид са=лаши ани=ланди. Ушбу ысимлик ер устки =исмидан 6 та экдистероид ажратилди, шулардан 2 таси янги щисобланади.

Rh.сarthamoides ысимлиги уру\идан 2 та экдистероид ажратилди. Улардан бири янги экдистероид эканлиги маълум былди.

Ажратиб олинган бирикмаларнинг тузилиши кимёвий ызгаришлар ва замонавий спектроскопия усуллари (масс-, И+-, ¹Н ва ¹³С ЯМР) ёрдамида ани=ланди.

Фармакологик текширишлар натижасида олинган баъзи экдистероидлар адаптоген таъсирга эга эканлиги ани=ланди.

Амалий ащамияти: Silene brahuica ва S.claviformis ысимликлари экдистерон учун янги =улай манба щисобланади. Изланишлар натижасида экдистерон ва интегристерон А ларнинг адаптоген фаоллиги топилди ва улар асосида адаптоген таъсирга эга былган янги самарали дори воситалари яратиш мумкин.

+ылланиш сощаси. Экдистерон тиббиёт амалиётида адаптоген дори воситаси сифатида =ылланилиши мумкин.

 

РЕЗЮМЕ

 

диссертации Садикова Зафар Тургуновича на тему “Фитоэкдистероиды растений Silene brahuica, S.claviformis и Rhaponticum carthamoides ” на соискание ученой степени кандидата химических наук по специальности 02.00.10 - Биоорганическая химия, химия природных и физиологически активных веществ

Ключевые слова: Фитоэкдистероиды, S.brahuica, S.claviformis, Rh. carthamoides, ИК-, масс-, ¹Н и ¹³С ЯМР, ВЭЖХ, хроматография.

Объекты исследования: Растения Silene brahuica, S.claviformis и   Rhaponticum carthamoides.

Цель работы: Выделение и изучение структуры экдистероидов из растений    S.brahuica, S.claviformis и Rh.carthamoides и выявление их биологической активности.

Метод исследования: экстракция, колоночная и бумажная хроматография, ВЭЖХ, ферментативный, кислотный и щелочной гидролиз, физические методы исследования (ИК-, масс-, УФ-, ¹Н и ¹³С ЯМР спектроскопия).

Полученные результаты и их новизна: Изучены экдистероиды растений S.brahuica, S.claviformis и Rh.carthamoides. Разработано схема извлечения экдистероидов из растения S.claviformis.

Из растения S.brahuica выделено 5 экдистероидов, из которых три оказались новыми.

Впервые изучено на содержание экдистероидов растение S.claviformis. Из надземных органов этого растения выделено 6 экдистероидов, из которых два оказались новыми.

Из семян Rh.carthamoides идентифицировано 2 экдистероида. Один из них является новым соединением.

Строение выделенных соединений установлены на основании химических превращений, спектральных данных с использованием современных методов исследования (масс-, ИК-,¹Н и ¹³С ЯМР) при совместных гомоядерных ¹Н/¹Н COSY, TOCSY и ROESY и гетероядерных ¹Н-, ¹³С HSQC  HMBC- спектров.

В результате фармакологических исследований выявлена адаптогенная активность некоторых  из выделенных экдистероидов.

Практическая значимость:  Растения S.brahuica и S.claviformis являются новым перспективным источником экдистерона. В результате изучения выявлена адаптогенная активность экдистерона и интегристерона А, на основе которых могут быть созданы эффективные лекарственные средства адаптогенного действия.

Область применения. Экдистерон может применяться в медицинской практике как адаптогенное лекарственное средство.

 

RESUME

 

Thesis of Sadykov Zafar Turgunovich on the academic degree competition of the candidate of chemistry science, speciality 02.00.10 - Bioorganical chemistry, chemistry of natural and physiological active compounds subject: “Phytoecdysteroids of plants Silene brahuica, S.claviformis and Rhaponticum  carthamoides”

Key words: Phytoecdysteroids, S.brahuica, S.claviformis, Rh.carthamoides, IR-, mass-, ¹H-, ¹³C- NMR, HPLC, chromatography.

Subjects of the inquiry: Silene brahuica, S.claviformis and Rhaponticum  carthamoides plants

Aim of the inquiry: Isolation and study of structures of ecdysteroids from                S.brahuica, S.claviformis, Rh.carthamoides and reveal their biological activity.

Method of investigation: extraction, column and paper chromatography, HPLC, fermentative hydrolysis, acid and alkaline hydrolysis, physical methods of research (IR-, mass-, UV-, ¹H and ¹³C NMR spectroscopy).

The results achieved and their novelty: It has been studied ecdysteroids of S. brahuica, S.claviformis and Rh.carthamoides.

The scheme of extraction of ecdysteroids from the plant of S.claviformis was worked out.

From S.brahuica 5 ecdysteroids were isolated, 3 of which are found to be new.

Content of ecdysteroids of  S.claviformis was studied for the first time. From over ground parts of this plant 6 ecdysteroids were isolated, 2 of them are found to be new.

From seeds of  Rh.carthamoides 2 ecdysteroids were identified. On of them is a new compound.

Structures of isolated compounds were elucidated on the base of chemical transformation, spectral dates with using of modern research methods ( mass-, IR-, ¹H and ¹³C NMR) in co-analising two measured homonuclear ¹H/¹H COSY, TOCSY, ROESY and heterohuclear ¹H-, ¹³C HSQC, HMBC specters.

In the results of pharmacological investigations was found adaptogenic activity of some identified ecdysteroids.

Practical value: The plants of S.brahuica and S.claviformis is a new perspective source for ecdysterone. In the result of studying was fond a adaptogenic activity of ecdysterone and integristerone A. On the base of ecdysterone and integristerone A would be developed new effective drugs with adaptogenic action.

Sphere of usage: Ecdysterone it can be applied in medicinal practice as adaptogenic a medical product.