Методы микробиологических иследований

Министерство образования  и науки Российской Федерации

Федеральное государственное  бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального  образования

«Чувашский государственный  педагогический университет им. И.Я. Яковлева»

 

Факультет Естествознания и дизайна среды

 

КАФЕДРА Биоэкологии  и географии

 

КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА

 

по дисциплине «микробиология» 

 

на тему

методы микробиологических иследований

 

 

 

 

 

Работа выполнена

студенткой 5 курса, ПО (ООС  и П),

заочной формы обучения,

 

Научный руководитель – 

к.биол.н.,

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Чебоксары

2013

 

План

1. Микробиологические исследования

2. Биологических исследований

3. Микроскопический метод

 

 

 

Цель микробиологических исследований — установить факт наличия или  отсутствия возбудителя в организме  больного и на объектах окружающей среды. Задачи микробиологических исследований — идентифицировать микроорганизмы в исследуемом материале, определить их видовую принадлежность, морфологические, биохимические, токсигенные и антигенные свойства, а также установить чувствительность выделенных микроорганизмов к антимикробным препаратам. Несмотря на то что проведение микробиологических исследований относится к компетенции микробиологов, каждый врач, имеющий дело с инфекционными заболеваниями, должен знать, как и когда необходимо отбирать материал для исследований, на какие исследования его направлять и как интерпретировать полученные результаты.

Методы биологических  исследований

Когда мы говорим о  биологии, мы говорим о науке, которая  занимается исследованием всего  живого. Все живые существа, включая ареал их обитания, изучаются биологией. Начиная от строения клеток и заканчивая сложными биологическими процессами, все это является предметом биологии. В ходе биологических исследований применяются биологические методы. Методы биологических исследований это:

• Эмпирические/экспериментальные методы
• Описательные методы
• Сравнительные методы
• Статистические методы
• Моделирование
• Исторические  методы

Эмпирические методы заключаются в том, что объект опыта подвергается изменению условий его существования, а потом, учитываются полученные результаты. Эксперименты бывают двух видов в зависимости от их места проведения: лабораторные эксперименты и полевые эксперименты. Для проведения полевых экспериментов используются естественные условия, а для проведения лабораторных экспериментов, используется специальное лабораторное оборудование.

Описательные методы основываются на наблюдение, с последующим анализом и описанием феномена. Этот метод позволяет выделить особенности биологических явлений и систем. Это один из самых древних методов.

Сравнительные методы подразумевают сравнение полученных фактов и явлений с другими фактами и явлениями. Сведения получаются путем наблюдения. В последнее время стало популярно применять мониторинг. Мониторинг это постоянное наблюдение, которое позволяет собрать данные, на основе которых будет проводиться анализ, а потом прогнозирование.

Статистические методы также известны под названием математические методы, и используются для того, чтобы обработать данные числового характера, которые были получены в ходе эксперимента. Кроме этого, данный метод применяется для того, чтобы убедиться в достоверности определенных данных.

Моделирование это метод, который в последнее время принимает большие обороты и подразумевает работать с объектами путем представления их в моделях. То, что нельзя анализировать и изучать впоследствии эксперимента, то можно узнать путем моделирования. Частично используется не только обычное моделирование, а также математическое моделирование.

Исторические методы основываются на изучение предыдущих фактов, и позволяют определить существующие закономерности. Но так как не всегда один метод оказывается достаточно эффективным, принято эти методы совмещать для получения лучших результатов.

Биология заботится  обо всех живых существах и, особенно о человеке, а Урсосан заботится о его печени. Урсосан поможет в лечении

В настоящее время для  обнаружения бактерий, вирусов и  грибов существуют общие методы лабораторной диагностики. 
Микробиологические исследования – это целый комплекс лабораторных анализов. Количество и кратность проведения определяется программой производственного контроля. Смывы в помещениях точно определяют наличие патогенных и не патогенных микроорганизмов

Микробиологический анализ воздуха проводится с целью определения обсемененности воздушной среды того или иного помещения микроорганизмами различного вида. Непосредственный отбор проб осуществляется метод Коха (оседание микроорганизмов на питательные среды под силой тяжести) или же аспирационным методом (прокачивание объема воздуха). В зависимости от пожеланий заказчика и преследуемых целей, результатом микробиологического анализа воздуха является информация о содержании воздушного пространства микробами, как основных групп, так и идентифицированных до вида. Как правило, процесс видовой идентификации дает более широкое представление о загрязнении воздуха бактериями, что позволяет грамотно и рационально подойти к вопросу решения сложившейся проблемы.

Стандартное исследование воздуха в рамках микробиологического анализа и смыва с поверхности проводится по следующим показателям:

• ОМЧ (общее микробное число)
• Условно-патогенные микроорганизмы
• Споры плесневых грибов

Микробиологический смыв с поверхности проводится с целью  определения наличия микроорганизмов на контактных поверхностях помещений различного целевого назначения, образовавшихся в процессе жизнедеятельности или же при иных обстоятельствах.

• Смывы с оборудования и инвентаря производят перед началом работы либо после санитарной обработки в санитарные дни.
• Взятие смывов с рук персонала, спецодежды, инвентаря и оборудования производят с помощью стерильных ватных тампонов на стеклянных палочках, вмонтированных в пробирки. Непосредственно перед взятием смыва тампон увлажняют средой, после забора смыва тампон опускают в среду с физиологическим раствором, предварительно разлитым по 2 мл в стерильные пробирки.

Смывы с крупного оборудования и инвентаря берут с поверхности  в 100 см2 в разных местах исследуемого предмета. Для ограничения поверхности  используют шаблон (трафарет) площадью 25 см2.  
При взятии смывов с рук протирают тампоном ладони обеих рук, проводя не менее 5 раз по одной ладони и пальцам, затем протирают участки между пальцами, ногти и под ногтями.

При взятии смывов с санитарной одежды протирают 4 площадки по 25 см2: нижнюю часть каждого рукава и две  площадки с верхней и передней части спецовки.

• Так же важно проводить Забор материала (смывы) с поверхности компонентов систем вентиляции и кондиционирования.

Организация и проведение производственного контроля за соблюдением  требований настоящих санитарных правил и выполнением санитарно-профилактических мероприятий в парикмахерских входит в обязанности юридических лиц и индивидуальных предпринимателей в целях обеспечения безопасности и безвредности для посетителей и персонала работ и услуг в соответствии с СП 1.1.1058-01 "Организация и проведение производственного контроля за соблюдением санитарных правил и выполнением санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий" (зарегистрированы в Министерстве юстиции Российской Федерации 30 октября 2001 г., регистрационный N 3000

Для проведения микробиологического анализа существует определенная нормативная база для разных функциональных учреждений.

Методы борьбы с микробиологическим загрязнением

• проветривание помещения
• установка систем очистки и обеззараживания воздуха
• правильное питание и достаточное поступление в организм витаминных и минеральных веществ
• соблюдение личной гигиены

По показателям общей  обсемененности: санитарное состояние  поверхности считается отличным, если ОМЧ на 1см2 не превышает 100, хорошим - при микробном числе от 100 до 1000, удовлетворительным - более 1000, плохим - более 10000.

МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ - способы изучения очень мелких, неразличимых невооруженным глазом объектов с помощью микроскопов. Широко применяются в бактериологических, гистологических, цитологических, гематологических и других исследованиях (см. Бактериологическое исследование, Гистологические методы исследования, Кровь, Микроскоп, Цитологическая диагностика).  
Обычная световая микроскопия предназначена для изучения окрашенных препаратов на предметных стеклах. С помощью световой микроскопии можно исследовать подвижность микроорганизмов. Для этого применяют метод висячей капли. Небольшую каплю микробной взвеси наносят на середину покровного стекла. Предметное стекло с углублением ("лункой"), края к-рого смазаны вазелином, осторожно накладывают на покровное стекло так, чтобы капля исследуемой жидкости оказалась в центре углубления, плотно прижимают к стеклу и быстро переворачивают кверху. Для исследования препарата используют иммерсионный объектив, к-рый погружают в иммерсионное масло на покровном стекле.  
Помимо световой существуют фазово-контрастная, темнопольная (ультрамикроскопия), люминесцентная, поляризационная, ультрафиолетовая и электронная микроскопия.  
Фазово-контрастная микроскопия основана на интерференции света: прозрачные объекты, отличающиеся по показателю преломления от окружающей среды, выглядят либо как темные на светлом фоне (позитивный контраст), либо как светлые на темном фоне (негативный контраст). Фазово-контрастная микроскопия применяется для изучения живых микроорганизмов и клеток в культуре ткани.  
Темнопольная микроскопия (ультрамикроскопия) основана на рассеянии света микроскопическими объектами (в т. ч. теми, размеры к-рых меньше предела разрешения светового микроскопа). При темнопольной микроскопии в объектив попадают только лучи света, рассеянного объектами при боковом освещении (аналогично эффекту Тиндаля, примером к-рого является обнаружение пылинок в воздухе при освещении узким лучом солнечного света). Прямые лучи от осветителя в объектив не попадают. Объекты при темнопольной микроскопии выглядят ярко светящимися на темном фоне. Применяется темнопольная микроскопия преимущественно для изучения спирохет и обнаружения (но не изучения морфологии) крупных вирусов.  
В основе люминесцентной микроскопии лежит явление люминесценции, т. е. способности нек-рых веществ светиться при облучении их коротковолновой (сине-фиолетовой) частью видимого света либо ультрафиолетовыми лучами с длиной волны, близкой к видимому свету. Люминесцентная микроскопия используется в диагностических целях для наблюдения живых или фиксированных микроорганизмов, окрашенных люминесцирующими красителями (флюорохромами) в очень больших разведениях, а также при выявлении различных антигенов и антител с помощью иммунофлюоресцентного метода (см. Серологические исследования).  
Поляризационная микроскопия основана на явлении поляризации света и предназначена для выявления объектов, вращающих плоскость поляризации. Применяется в основном для изучения митоза.  
В основе ультрафиолетовой микроскопии лежит способность нек-рых веществ (ДНК, РНК) поглощать ультрафиолетовые лучи. Она дает возможность наблюдать и количественно устанавливать распределение этих веществ в клетке без специальных методов окраски. В ультрафиолетовых микроскопах используется кварцевая оптика, пропускающая ультрафиолетовые лучи.  
Электронная микроскопия принципиально отличается от световой как устройством электронного микроскопа, так и его возможностями. В электронном микроскопе вместо световых лучей для построения изображения используется поток электронов в глубоком вакууме. В качестве линз, фокусирующих электроны, служит магнитное поле, создаваемое электромагнитными катушками. Изображение в электронном микроскопе наблюдают на флюоресцирующем экране и фотографируют. В качестве объектов используют ультратонкие срезы микроорганизмов или тканей толщиной 20- 50 нм, что значительно меньше толщины вирусных частиц. Высокая разрешающая способность современных электронных микроскопов позволяет получить полезное увеличение в миллионы раз. С помощью электронного микроскопа изучают ультратонкое строение микроорганизмов и тканей, а также проводят иммунную электронную микроскопию.