Методы фармакогностического анализа лекарственного растительного сырья
Автор работы: Пользователь скрыл имя, 23 Октября 2013 в 17:29, методичка
Описание работы
Для практической деятельности провизора необходимы знания
и умения по приемке лекарственного растительного сырья, отбору
проб для анализа, определению подлинности, измельченности, зара-
женности сырья амбарными вредителями, содержания примесей и
радиоактивных изотопов, а также определению влажности, содержа-
ния золы, действующих веществ и микробиологической чистоты.
Умение правильно провести приемку сырья и его анализ имеют
большое значение, так как позволяют обеспечить потребителей доб-
рокачественным лекарственным сырьем, соответствующим требова-
ниям нормативной документации.
Содержание работы
ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………4
ПРАВИЛА ПРИЕМКИ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ И
МЕТОДЫ ОТБОРА ПРОБ .....................................................................................4
Термины и определения .........................................................................................5
Общие положения...................................................................................................6
Отбор проб ЛРС «ангро» (партия).........................................................................7
Отбор проб ЛРС фасованного (серии).................................................................15
Требования к оборудованию................................................................................17
Требования к персоналу, проводящему отбор проб...........................................17
Маркировка образцов...........................................................................................18
Документальное оформление отбора проб .........................................................18
ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО
РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ.................................................................................22
Определение подлинности лекарственного растительного
сырья………………………………………………………………...22
Макроскопический анализ ...................................................................................24
Микроскопический анализ...................................................................................34
Определение доброкачественности лекарственного растительного
сырья……………………………………………….
Определение содержания примесей ....................................................................48
Определение влажности.......................................................................................49
Определение золы.................................................................................................50
Определение золы общей.....................................................................................50
Определение золы, нерастворимой в 10% растворе хлористоводородной
кислоты..................................................................................................................51
Определение содержания экстрактивных веществ ............................................52
Рекомендуемая литература...................................................................................54
Файлы: 1 файл
1
Государственное образовательное учреждение
высшего профессионального образования
«Сибирский государственный медицинский университет
Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
В.Ю. Андреева, Г.И. Калинкина, Е.Н. Сальникова
Методы фармакогностического анализа
лекарственного растительного сырья
Часть I
Правила приемки и общие методы испытаний
Учебное пособие
Рекомендуется Учебно-методическим объединением
по медицинскому и фармацевтическому образованию вузов
России в качестве учебного пособия для студентов,
обучающихся по специальности 060108 (040500) – Фармация
Томск
Сибирский государственный медицинский университет
2008
2
УДК: 615.322 : 615.07 (075.8)
ББК Р 282.11я7
А 655
Рецензенты:
Самылина И.А. – заведующая кафедрой фармакогнозии 1 ММА им.
И.М.Сеченова, д-р фарм. наук, профессор;
Куркин В.А. – заведующий кафедрой фармакогнозии с ботаникой и ос-
новами фитотерапии Самарского государственного медицинского университе-
та, д-р фарм-. наук, профессор.
А 655 Андреева В.Ю., Калинкина Г.И., Сальникова Е.Н.
Методы фармакогностического анализа лекарственного растительного
сырья. В 2-х ч. ч 1.
Правила приемки и общие методы испыта-
ний
: учебное пособие. / В.Ю. Андреева, Г.И. Калинкина, Е.Н. Сальни-
кова / – Томск: СибГМУ, 2008.-56 с.
Пособие включает современные методы испытаний лекарст-
венного растительного сырья на подлинность и доброкачествен-
ность. Правила приемки, методы макроскопического, микроскопиче-
ского и товароведческого анализа лекарственного растительного сы-
рья приведены на основании действующих нормативных докумен-
тов, которые не отражены в учебниках и учебных пособиях по фар-
макогнозии.
Учебное пособие составлено в соответствии с программой по
фармакогнозии для студентов фармацевтических ВУЗов (факульте-
тов), рекомендованной ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ.
Пособие предназначено для студентов, интернов и аспирантов
фармацевтических факультетов высших учебных заведений.
© Сибирский государственный медицинский университет, 2008
© Андреева В.Ю., Калинкина Г.И., Сальникова Е.Н., 2008
3
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………4
ПРАВИЛА ПРИЕМКИ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ И
МЕТОДЫ ОТБОРА ПРОБ .....................................................................................4
Термины и определения .........................................................................................5
Общие положения...................................................................................................6
Отбор проб ЛРС «ангро» (партия).........................................................................7
Отбор проб ЛРС фасованного (серии).................................................................15
Требования к оборудованию................................................................................17
Требования к персоналу, проводящему отбор проб...........................................17
Маркировка образцов...........................................................................................18
Документальное оформление отбора проб .........................................................18
ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО
РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ.................................................................................22
Определение подлинности лекарственного растительного
сырья………………………………………………………………...22
Макроскопический анализ ...................................................................................24
Микроскопический анализ...................................................................................34
Определение доброкачественности лекарственного растительного
сырья……………………………………………….
Определение содержания примесей ....................................................................48
Определение влажности.......................................................................................49
Определение золы.................................................................................................50
Определение золы общей.....................................................................................50
Определение золы, нерастворимой в 10% растворе хлористоводородной
кислоты..................................................................................................................51
Определение содержания экстрактивных веществ ............................................52
Рекомендуемая литература...................................................................................54
4
ВВЕДЕНИЕ
Для практической деятельности провизора необходимы знания
и умения по приемке лекарственного растительного сырья, отбору
проб для анализа, определению подлинности, измельченности, зара-
женности сырья амбарными вредителями, содержания примесей и
радиоактивных изотопов, а также определению влажности, содержа-
ния золы, действующих веществ и микробиологической чистоты.
Умение правильно провести приемку сырья и его анализ имеют
большое значение, так как позволяют обеспечить потребителей доб-
рокачественным лекарственным сырьем, соответствующим требова-
ниям нормативной документации.
В данном учебном пособии представлены все современные ме-
тодики последовательного фармакогностического анализа подлин-
ности и качества лекарственного растительного сырья. Правила при-
емки, методы макроскопического, микроскопического и товаровед-
ческого анализа лекарственного растительного сырья приведены на
основании действующих нормативных документов, которые не от-
ражены в учебниках и учебных пособиях по фармакогнозии.
Пособие составлено с учетом программы по фармакогнозии на
додипломном и последипломном уровнях подготовки провизоров.
Приведенные в пособии материалы могут быть использованы в
учебном процессе в фармацевтических ВУЗах и факультетах для
студентов, интернов, аспирантов и разработчиков проектов Фарма-
копейных статей.
5
ПРАВИЛА ПРИЕМКИ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО
СЫРЬЯ И МЕТОДЫ ОТБОРА ПРОБ
С 16 июня 2003 года в Российской Федерации вступила в силу
Общая фармакопейная статья – ОФС 42-0013-03 «Правила приемки
лекарственного растительного сырья и методы отбора проб» (взамен
Государственной фармакопеи СССР XI издания, вып. 1, стр.267 и
ГОСТа 24027.0-80 «Правила приемки и методы отбора проб»).
Настоящая Общая фармакопейная статья устанавливает единые
требования к правилам приемки и методам отбора проб лекарствен-
ного растительного сырья, предназначенного для анализа с целью
определения соответствия его качества требованиям стандартов.
Термины и определения
Лекарственное растительное сырье (ЛРС) представляет собой
части лекарственных растений, иногда целые растения, используемые в
высушенном, реже в свежем виде в качестве лекарственного средства или
для получения лекарственных средств.
Сборы представляют собой смеси нескольких видов измельченно-
го, реже цельного ЛРС, используемые в качестве лекарственных
средств.
Партия ЛРС («ангро») — определенное количество цельного,
обмолоченного, прессованного ЛРС, однородное по способу подготов-
ки и показателям качества, одного наименования и оформленное одним
документом, удостоверяющим его качество, предназначенное для произ-
водства промышленных серий фасованной продукции в упаковке «ан-
гро» и в потребительской упаковке.
Серия ЛРС — определенное количество однородного по всем по-
казателям фасованного ЛРС (цельное, измельченное, порошок), про-
изведенное в течение одного технологического цикла, оформленное
одним документом качества. Серия формируется из одной или не-
скольких (но не более трех) партий ЛРС.
Фасованная продукция - определенное количество (масса) ЛРС
цельного, измельченного или порошка, помещенное в потребитель-
скую упаковку, предназначенное для приготовления настоев и отва-
ров, или в упаковку "ангро", предназначенную для изготовления ле-
карственных средств (настоек, экстрактов и др.).
Транспортная упаковка ЛРС (единицы продукции)— упаков-
ка, представляющая собой один из видов транспортной тары, ука-
занная в частных фармакопейных статьях.
6
Потребительская упаковка с ЛРС — упаковка лекарственно-
го средства, поступающая к потребителю, обеспечивающая его со-
хранность и неизменность свойств в течение установленного срока
годности.
Выборка — совокупность единиц продукции (транспортных
упаковок или упаковок "ангро"), отобранных для проведения ана-
лиза из партии ЛРС или серии фасованной продукции.
Точечная проба — минимальное количество пробы, отобранное
из каждой единицы продукции в установленном порядке за один
прием для составления объединенной пробы.
Объединенная проба — совокупность точечных проб, предна-
значенная для выделения средней пробы.
Общие положения
1. Приемка лекарственного растительного сырья производится
партиями или сериями.
2. Прежде всего, при поступлении партии сырья проверяется
наличие и качество оправдательных документов (накладная, серти-
фикат качества или протокол анализа завода изготовителя др.).
3. Каждая единица продукции (грузовое место) подвергается
внешнему осмотру, определяется ее качество, целостность, правиль-
ность маркировки и оформления сопроводительной документации, а
также соответствие тары и упаковки требованиям стандарта качест-
ва.
4. Далее для проверки соответствия качества сырья требованиям
стандарта качества производится выборка (отбор проб).
Отбор проб представляет собой совокупность ряда операций для
взятия определенного количества образцов лекарственного средства.
Процедура отбора проб должна соответствовать цели отбора проб,
виду анализа, специфике отбираемого образца.
Виды продукции, подлежащие отбору проб:
Лекарственное растительное сырье «ангро» (партия);
Фасованное лекарственное растительное сырье (серия).
Пробы отбираются только из неповрежденных единиц продук-
ции, упакованных согласно стандартам качества.
Проверка качества сырья в поврежденных единицах продукции
производится отдельно от неповрежденных (вскрывается каждая
единица продукции).
7
5. Отбор образцов для испытаний осуществляет представитель
анализирующей организации или подразделения. Отбор проб (выбо-
рок) для проведения контроля должен проводиться с соблюдением
действующих санитарно-гигиенических правил и условий, исклю-
чающих загрязнение продукции и обеспечивающих безопасность
персонала. При отборе проб (выборок) ядовитых и сильнодействую-
щих лекарственных средств, следует руководствоваться правилами
работы, предусмотренными соответствующими инструкциями и
приложениями.
Каждую серию необходимо рассматривать как отдельную в от-
ношении отбора проб и проведения испытаний в том случае, если
поставка лекарственного средства состоит из нескольких серий (пар-
тий). Не допускается отбор проб одновременно от двух наименова-
ний, двух серий (двух партий) продукции во избежание ошибок при
отборе проб. К отбору от следующей серии (партии) поступившей
продукции можно переходить только после выполнения всей проце-
дуры отбора от предыдущей серии (партии).
6. Пробы отбираются в количестве, необходимом для проведе-
ния трех анализов (включая арбитражный). При получении сомни-
тельных результатов анализа контролирующая организация имеет
право изъять дополнительные образцы для повторных анализов.
7. Серия (партия) лекарственного средства, от которой отобраны
образцы на анализ, должны храниться изолировано для получения
результатов контроля.
8. Процедура отбора проб оформляется записью в журнале реги-
страции отбора проб и актом отбора проб. Арбитражные образцы ле-
карственного средства должны храниться в течение срока его годно-
сти, в специально отведенных помещениях, обеспечивающих их со-
хранность в условиях, предусмотренных стандартом качества. По
истечении срока хранения, образцы подлежат уничтожению в уста-
новленном порядке.
Отбор проб ЛРС «ангро» (партия)
Приемку ЛРС «ангро» осуществляют партиями. Для провер-
ки соответствия качества ЛРС требованиям стандартов и другой
нормативно-технической документации на конкретное лекарствен-
ное сырье от партии отбирают методом случайного или системати-
ческого отбора выборку из неповрежденных транспортных упаковок
(единиц продукции), взятых в количестве, указанном в таблице 1.
8
Таблица 1
Объем выборки лекарственного растительного сырья «ангро»
Количество транспортных упа-
ковок (единиц продукции)
Объем выборки
1-5
Все единицы
6-50
5 единиц
Свыше 50
10% единиц продукция, состав-
ляющих партию
Неполные 10 единиц продукции приравнивают к 10 единицам
(например, при наличии в партии 51 единицы продукции объем
выборки составляет 6 единиц).
Попавшие в выборку единицы продукции вскрывают и путем
внешнего осмотра определяют:
однородность сырья по способу подготовки (цельное,
обмолоченное, прессованное), по цвету, запаху, засоренности;
наличие плесени, гнили, устойчивого постороннего запаха, не
исчезающего при проветривании;
засоренности ядовитыми растениями и посторонними
примесями (камни, стекло, помет грызунов и птиц и т.д.).
Одновременно невооруженным глазом и с помощью лупы (5-
10х) определяют наличие амбарных вредителей.
При установлении при внешнем осмотре неоднородности
ЛРС, наличия плесени и гнили, засоренности посторонними рас-
тениями в количествах, явно превышающих допустимые примеси,
партия может быть принята только после того как будет рассортиро-
вана и вторично предъявлена к сдаче.
При обнаружении в сырье затхлого, устойчивого посторон-
него запаха, не исчезающего при проветривании, ядовитых расте-
ний и посторонних примесей (помет грызунов и птиц, стекло и
др.), зараженности амбарными вредителями II и III степеней партия
сырья не подлежит приемке !
Из каждой единицы продукции, отобранной для вскрытия,
берут, избегая измельчения, 3 точечные пробы: сверху, снизу и из
середины (схема 1). Из мешков, тюков и кип точечные пробы от-
бирают на глубине не менее 10 см сверху, затем, после распарывания
по шву, из середины и снизу; точечные пробы семян и сухих плодов
9
отбирают зерновым щупом. Из ЛРС, упакованного в ящик, пер-
вую точечную пробу отбирают из верхнего слоя, вторую из сере-
дины и третью - со дна ящика. Точечные пробы должны быть при-
мерно одинаковыми по массе. Из всех точечных проб, осторожно
перемешивая, составляют объединенную пробу (схема 1).
Если масса объединенной пробы недостаточна для проведения
испытаний, отбор точечных проб повторяют.
Из объединенной пробы методом квартования выделяют сле-
дующие пробы в приведенной ниже последовательности:
пробу для определения степени зараженности амбарными вре-
дителями массой 500 г для мелких видов сырья и массой 1000 г для
крупных видов сырья;
средняя проба (для выделения аналитических проб) в соответ-
ствии с указаниями таблицах 2 и 3;
пробу для определения микробиологической чистоты массой
50—200 г;
пробу для определения радионуклидов в соответствии с указа-
ниями таблице 4.
Для этого ЛРС разравнивают на глад-
кой, чистой, ровной поверхности в виде квад-
рата по возможности тонким равномерным по
толщине слоем и по диагонали делят на четыре
треугольника как на рисунке.
Два противоположных треугольника
удаляют, а два оставшихся соединяют вместе и
перемешивают. Эту операцию повторяют до тех
пор, пока в двух противоположных треугольниках не останется ко-
личество сырья, соответствующее массе одной из заданных проб.
Допустимые отклонения в массе каждой из проб не должны пре-
вышать ± 10%.
Из средней пробы методом квартования выделяют аналитиче-
ские пробы для определения:
подлинности, измельченности и содержания примесей;
влажности (аналитическую пробу для определения влажности
отделяют сразу же после отбора средней пробы и упаковывают
герметически);
содержания золы и действующих веществ.
10
Схема 1.
Приемка, выборка сырья и отбор проб для анализа
3 точечные
пробы
3 точечные
пробы
3 точечные
пробы
3 точечные
пробы
3 точечные
пробы
Выборка сырья (табл. 1)
Единицы продукции
Проба для определения
степени зараженности
амбарными вредителя-
ми массой 500 г для
мелких видов сырья и
массой 1000 г для
крупных видов сырья
СРЕДНЯЯ
ПРОБА
(для выделения
аналитических
проб) табл. 2 и
3
Проба для оп-
ределения мик-
робиологиче-
ской чистоты
массой 50-200 г
Проба для оп-
ределения ра-
дионуклидов в
соответствии с
указаниями
табл. 4
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ПРОБЫ для определения:
Подлинности, измель-
ченности и содержания
примесей
Влажности
Содержания золы и дей-
ствующих веществ
Метод квартования
Партия продукции
ОБЪЕДИНЕННАЯ ПРОБА
Метод случайно-
го или система-
тического отбора
М е т о д к в а р т о в а н и я
11
Для таких видов сырья, как цельная трава, корни, корневища,
клубни, после выделения аналитической пробы для определения
подлинности, измельченности и содержания примесей часть сред-
ней пробы, предназначенную для определения влажности, содер-
жания золы и действующих веществ, измельчают ножницами или
секатором на крупные куски, тщательно перемешивают и затем
выделяют соответствующие аналитические пробы.
Если при выделении аналитических проб в двух противопо-
ложных треугольниках масса сырья окажется меньше или больше
указанной в таблице 3, следует из оставшихся двух треугольников
отделить сырье по всей толщине слоя или таким же образом удалить
его из отобранных треугольников. Аналитические пробы должны
быть взвешены с погрешностью ±:
0,01 — при массе пробы до 50 г;
0,1 — при массе пробы от 100 до 500 г;
1,0 — при массе пробы от 500 до 1000 г;
5,0 — при массе пробы более 1000 г.
Пробу для установления степени зараженности амбарными
вредителями помещают в плотно закрывающуюся емкость. Сред-
нюю пробу и пробы для определения радионуклидов и микробио-
логической чистоты упаковывают каждую в полиэтиленовый или
многослойный бумажный пакет. К пакету или емкости прикреп-
ляют этикетку, такую же этикетку вкладывают внутрь мешка
или емкости.
При установлении в результате испытания несоответствия каче-
ства сырья требованиям нормативной документации проводят его
повторную проверку. Для повторного анализа от невскрытых еди-
ниц продукции отбирают выборку в соответствии с таблицей 1. Ре-
зультаты повторного анализа являются окончательными и рас-
пространяются на всю партию.
Примечание: отбор проб корня женьшеня осуществляется в
соответствии с частной фармакопейной статьей.
12
Таблица 2
Масса средних проб ЛРС
Наименование сырья
Масса средней пробы, г
Березы почки
150
Сосны почки
350
Листья цельные,
кроме нижеперечисленных:
сенны листья,
толокнянки и брусники листья
400
200
150
Листья резаные, обмолоченные, измельченные,
порошок
200
Цветки цельные, измельченные, порошок,
кроме нижеперечисленных:
полыни цитварной цветки
ноготков цветки, кукурузы столбики с рыльцами
бузины черной цветки
ромашки аптечной цветки
ромашки далматской цветки
300
150
200
75
200
400
Трава цельная, побеги,
кроме нижеперечисленных:
душицы трава
анабазиса побеги
600
150
200
Трава резаная, обмолоченная, измельченная в
порошок
200
Сочные плоды цельные, измельченные, поро-
шок,
кроме нижеперечисленных:
шиповника плоды
стручкового перца плоды
200
300
550
Сухие плоды и семена цельные, измельченные,
порошок,
кроме нижеперечисленных:
дурмана индейского, термопсиса, семена льна
амми плоды и джута семена
300
200
150
Корни, клубни и корневища цельные,
кроме нижеперечисленных:
марены корневища и корни, лапчатки корневища
салепа клубни
девясила корневища и корни
папоротника мужского корневища и ревеня кор-
ни
Туркестанский мыльный корень
солодки корни очищенные
солодки корни неочищенные, барбариса корни
600
400
200
1000
1500
10300
2500
6000
13
Корни и корневища резаные, дробленные, из-
мельченные
250
Корни и корневища порошок
150
Кора цельная
600
Кора резаная, измельченная, порошок
200
Прочее растительное сырье:
ликоподий
спорыньи рожки
чага
ламинария слоевища цельные
ламинария слоевища шинкованые
ламинария слоевища порошок
100
200
3000
5000
1000
400
Сырье животного происхождения:
бадяга
150
Таблица 3
Масса аналитических проб ЛРС
Масса аналитической
пробы (г) для определения
Наименование
сырья
под-
линно-
сти,
измель-
ченно-
сти
влаж-
ности
содер-
жание
золы и
дейст-
вую-
щих ве-
ществ
Березы почки
50
25
25
Сосны почки
200
25
100
Листья цельные,
кроме нижеперечисленных:
толокнянки и брусники листья
листья резаные, обмолоченные, измельченные,
порошок
100
50
50
15
25
25
50
50
100
Цветки цельные, измельченные, порошок,
кроме нижеперечисленных:
полыни цитварной цветки
ноготков цветки, кукурузы столбики с рыльца-
ми
бузины черной цветки
ромашки аптечной цветки
ромашки далматской цветки
25
25
100
20
50
300
25
15
25
15
25
25
50
50
50
50
100
50
14
Трава цельная,
кроме нижеперечисленных:
душицы трава
анабазиса побеги
50
25
50
50
15
25
100
50
100
Трава резаная, обмолоченная, измельченная,
порошок
50
25
100
Сочные плоды цельные, измельченные, поро-
шок, кроме нижеперечисленных:
шиповника плоды
стручкового перца плод
25
200
300
50
25
25
25
50
150
Сухие плоды и семена цельные, измельченные,
порошок, кроме нижеперечисленных:
дурмана индейского, термопсиса, семена льна
амми плоды и джута семена
-
50
10
25
25
25
25
100
100
Корни, клубни и корневища цельные, кроме
нижеперечисленных:
марены корневища и корни, лапчатки корневи-
ща
салепа клубни
девясила корневища и корни
папоротника мужского корневища и ревеня
корни
туркестанский мыльный корень
солодки корни очищенные
солодки корни неочищенные, барбариса корни
50
200
100
600
1000
10000
2000
5000
50
50
25
50
100
200
100
100
100
100
50
100
300
-
200
500
Корни и корневища резаные, дробленые, из-
мельченные
100
25
100
Корни и корневища порошок
50
15
25
Кора цельная
400
50
100
Кора резаная, измельченная, порошок
100
25
50
Прочее растительное сырье:
ликоподий
спорыньи рожки
чага
ламинария слоевища цельные
ламинария слоевища шинкованые
ламинария слоевища порошок
50
50
2000
3000
500
100
25
25
500
500
100
50
25
100
100
1000
300
200
Сырье животного происхождения:
бадяга
50
25
25
15
Таблица 4.
Масса пробы ЛРС «ангро» для определения радионуклидов
№ п/п
Наименование
Масса средней пробы
(не менее), г
1
Листья
600
2
Трава
600
3
Цветки
600
4
Плоды
1000
5
Семена
1000
6
Кора
1000
7
Корни и корневища
1000
8
Сборы
600
9
Прочее
1000
Отбор проб ЛРС фасованного (серии)
ЛРС и сборы поступают в обращение расфасованные "ангро"
(цельное, измельченное и в виде порошка) и в потребительских
упаковках — пачках, пакетах, фильтр-пакетах, в виде брикетов.
Приемку фасованной продукции ЛРС проводят сериями.
Единицы продукции в выборку необходимо отбирать случайным
образом или методом систематическою отбора. Объем выборки за-
висит от количества транспортных упаковок в серии фасованной
продукции.
Попавшие в выборку транспортные упаковки продукции
вскрывают из разных мест каждой транспортной упаковки случай-
ным образом или методом систематического отбора отбирают
потребительские упаковки в % в соответствии с табл. 5.
При отборе серии более 500 транспортных единиц для расчета
количества транспортных единиц при
вскрытии
используют
формулу.
0,4√n, где n - количество упаковочных единиц в одной серии.
Полученное в результате подсчета по формуле дробное число ок-
ругляют в сторону увеличения до целою числа, оно должно быть
не менее 3 и не более 30. В случае недостаточного количества упако-
вочных единиц для проведения испытания повторно отбирают упа-
ковочные единицы, как указано выше.
Отобранные потребительские упаковки составляют объединенную
пробу. Из объединенной пробы выделяется:
проба для определения допустимых отклонений на промышлен-
ное фасование - 10 невскрытых пачек или пакетов, 10 невскры-
16
тых контурных ячейковых упаковок, брикетов, 10 невскрытых
пачек с фильтр-пакетами;
проба для определения микробиологической чистоты — 5 невс-
крытых потребительских упаковок обшей массой не менее 50 г;
проба для определения радионуклидов в соответствии с таблицей 6;
средняя проба для выделения аналитических проб в соответствии с
таблицами 2 и 3.
Отобранные упаковки объединенной пробы после выделения
проб для определения микробиологической чистоты и отклонения в
массе вскрывают, содержимое высыпают на гладкую, чистую, ров-
ную поверхность, тщательно перемешивают и методом квартования
выделяют пробы, соответствующие по массе одной из заданных
проб (см. таблицы 2, 3 и 6).
Анализ лекарственного растительного сырья и сборов "ангро",
а также в пачках и пакетах проводят по ОСТ 64-492-85.
Анализ лекарственного растительного сырья и сборов в
фильтр-пакетах проводят по следующей методике:
10 пачек с фильтр-пакетами пробы для определения допусти-
мых отклонений массы содержимого упаковки при промышленном
фасовании вскрывают, отбирают произвольно 20 фильтр-пакетов,
содержимое фильтр-пакетов высыпают и взвешивают с погрешно-
стью ± 0,01 г. Вычисляют отклонение массы порошка в фильтр-
пакете от номинальной.
Анализ лекарственного растительного сырья и сборов в брике-
тах проводят но следующей методике: 10 контурных ячейковых
упаковок брикетов пробы для определения допустимых отклонений
при промышленном фасовании вскрывают с погрешностью ± 0,01 г.
Вычисляют отклонения массы брикета от номинальной.
Выборку и отбор проб из серий фасованного "ангро" ЛРС цель-
ного, измельченного и порошка проводят, как указано для ЛРС "ан-
гро" (партия), исключая выделение пробы для установления степени
зараженности амбарными вредителями; определение допустимых
отклонений на промышленное фасование проводят в соответствии с
ОСТ 64-492-85.
В случае обнаружения живых и мертвых амбарных вредителей
в фасованной продукции лекарственного растительного сырья и
сборах проводят отбор дополнительной пробы массой 500 г для их
определения (методика определения по ГФ XI, вып.1, с 276).
17
Требования к оборудованию
Для отбора проб продуктов на складах сотрудник должен
иметь в своем распоряжении все инструменты, необходимые для
вскрытия упаковок, контейнеров и т.д., включая ножи, клещи,
пилы, молотки, гаечные ключи, средства для удаления пыли
(например, щетки) и материалы для повторного запечатывания
упаковок (например, клейкая лента), а также самоклеящиеся
этикетки, на которых следует указывать, что часть содержимого
из упаковки или контейнера была извлечена.
Все инструменты и приспособления должны содержаться в
чистоте. Перед повторным использованием их следует вымыть,
прополоскать водой.
В качестве инструмента для отбора проб могут использовать-
ся щупы (ТУ 64-1-2229-76), совки и др.
Требования к персоналу, проводящему отбор проб
Требования к квалификации персонала
Персонал, проводящий отбор проб, должен руководство-
ваться в своей работе настоящими правилами. Персонал должен вла-
деть знаниями о:
технических приемах и оборудовании для отбора проб;
риске перекрестной контаминации (смешивание и/или пере-
путывание проб ЛРС, приводящее к появлению ложных резуль-
татов);
подлежащих соблюдению мерах предосторожности в отно-
шении ядовитых и сильнодействующих ЛС;
важности визуального осмотра исходного сырья, материа-
лов, тары и этикеток;
важности протоколирования любых непредвиденных или
необычных обстоятельств.
Требования к личной гигиене персонала
При отборе проб запрещается принимать пищу, пить, курить, а
также хранить еду, средства для курения в специальной одежде или
месте отбора проб. Персонал, занятый отбором проб лекарственных
средств, должен строго соблюдать инструкции, регламентирующие
состояние здоровья и требования личной гигиены, носить техноло-
гическую одежду.
18
Маркировка образцов
На транспортные упаковки, из которых были отобраны пробы,
и на тару с пробой ответственный за отбор проб должен наклеить
этикетку. На отобранной пробе указывают:
наименование лекарственного сырья;
производитель (поставщик);
номер серии (партии);
номер сопроводительных документов (сертификата);
дата и место отбора пробы;
количество отобранной пробы;
условия хранения образца;
срок хранения пробы, номера емкости (упаковочной единицы),
из которой отобрана проба;
ФИО ответственного за отбор проб;
номер записи в журнале регистрации отбора проб;
указание, для какого вида анализа предназначена проба.
Документальное оформление отбора проб
Отбор проб для проведения контроля качества лекарственных
средств должен проводиться комиссионно. Процедура отбора долж-
на быть задокументирована.
На этикетке емкости, из которой отобрана проба, указывают:
наименование лекарственного сырья, номер серии (пар-
тии);
производитель (поставщик);
количество отобранной пробы;
ФИО ответственного за отбор проб;
дата и место отбора пробы;
номер записи в журнале регистрации отбора проб;
После проведения отбора проб составляется акт отбора, в кото-
ром указываются лица, произведшие отбор (ФИО, должность), дата
и место отбора пробы, наименование продукции, производитель, но-
мер серии, объем поставки, количество отобранных проб (с учетом
архивного образца), срок годности. Один экземпляр акта остается в
организации, в которой отбирались образцы, второй – сопровождает
образец.
В журнал регистрации проб заносится:
название ЛС;
производитель ЛС;
19
дата поступления ЛС;
количество транспортных единиц, из которых отобрана
проба;
дата отбора проб;
масса отобранной пробы;
общие замечания (включая все выявленные при внешнем
осмотре недостатки);
ФИО лица, производившего отбор проб.
К образцу прикладывается копия акта отбора средней пробы,
сопроводительные документы и вспомогательная документация
(сертификаты или аналитический паспорт).
Таблица 5
Объем выборки фасованной продукции
Количество транспорт-
ных упаковок
Объем выборки (транс-
портных упаковок)
Объем выборки (потре-
бительских упаковок)
1-5
Все транспортные упа-
ковки
6-150
5 транспортных упако-
вок
По 2 потребительские
упаковки при массе фа-
совки 40 г и более
151-500
10 транспортных упако-
вок
501 и более
Рассчитывается по фор-
муле 0,4 √n
По 4 потребительские
упаковки при массе фа-
совки 35 г и более
Таблица 6
Объем выборки фасованного ЛРС для проведения
радиационного контроля
Количество потребительских
упаковок, шт
Объем выборки, шт
от 100
2 (но не менее 70 г)
от 101 до 200
3 (но не менее 70 г)
от 201 до 500
4 (но не менее 70 г)
от 500 и более
5 (но не менее 70 г)
20
Таблица 7
Допустимые отклонения массы содержимого упаковки при про-
мышленном фасовании ЛРС и сборов («ангро», пачки, пакеты,
фильтр-пакеты, брикеты)
Допустимые отклонения, ±%
Диапазон измеряемых
масс, г
для одной упаковки
для 10 упаковок
До 100
5
1.6
Свыше 100 до 200
3
0.9
Свыше 200 до 1000
2
0.6
Свыше 1000 до 10000
1
0.3
Свыше 10000
0.2
0.06
Отобранные пробы в упакованном виде, склеенные этикеткой с
указанием наименования ЛРС, номера партии (серии), ее массы, да-
ты отбора пробы, фамилии отборщика пробы, направляются на ана-
лиз в контрольно-аналитическую лабораторию предприятия, регио-
нальные центры сертификации и контроля качества лекарственных
средств, в Окружные центры сертификации (для получения серти-
фиката соответствия, имеющего юридическую силу на территории
всей РФ).
Контрольные вопросы по теме
1.
Что такое партия лекарственного растительного сырья?
2.
Что такое серия лекарственного растительного сырья?
3.
Из каких операций состоит приемка сырья?
4.
В чем заключается внешний осмотр партии сырья?
5.
Что называется выборкой и как ее проводят?
6.
Как поступают с поврежденными единицами продукции в
процессе приемки ЛРС?
7.
Как следует поступить, если в партии окажется неодно-
родное сырье?
8.
В каких случаях сырье бракуют без анализа?
9.
Что такое точечная проба, как производится отбор точеч-
ных проб?
21
10. Что такое объединенная и средняя пробы? Что такое метод
квартования? Как должны быть маркированы отобранные пробы?
11. Что такое аналитическая проба, ее масса и назначение?
12. Какой нормативной документацией руководствуются при
приемке лекарственного растительного сырья и отборе проб для ана-
лиза?
22
ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕН-
НОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
Фармакогностический анализ представляет комплекс методов
анализа лекарственного сырья растительного и животного происхо-
ждения, позволяющих определить его подлинность и доброкачест-
венность.
Подлинность - это соответствие исследуемого объекта наиме-
нованию, под которым он поступил на анализ.
Доброкачественность - это соответствие лекарственного сырья
требованиям нормативной документации (НД).
Фармакогностический анализ нормативно регламентируется до-
кументами двух типов:
1.Общая фармакопейная статья (ОФС) 42-0013-03 «Правила
приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора
проб» и соответствующие общие статьи Государственной Фармако-
пеи XI издания, нормирующие правила приемки, методы отбора
проб, методы определения подлинности и доброкачественности ле-
карственного сырья;
2.ФС, ФСП, ОСТ и ТУ, определяющие требования к конкретно-
му виду сырья.
Фармакогностический анализ складывается из ряда последова-
тельно проводимых анализов: макроскопического, микроскопиче-
ского, товароведческого и фитохимического. В некоторых случаях
он дополняется определением биологической активности сырья
(схема 2).
Определение подлинности лекарственного растительного сырья
Подлинность сырья, как правило, устанавливается путем макро-
скопического и микроскопического анализа, реже используются
элементы фитохимического анализа путем проведения качественных
реакций на наличие в сырье тех или иных групп соединений (ду-
бильных веществ, антрагликозидов, алкалоидов и других).
23
Схема 2. Фармакогностический анализ лекарственного расти-
тельного сырья (ЛРС)
Подлинность
Соответствие ЛРС наименова-
нию, под которым оно посту-
пило на анализ
Доброкачественность
Соответствие ЛРС требованиям НД
Этапы:
1. Приемка и первичный осмотр ЛРС
2. Отбор проб для анализов
3. Анализ ЛРС
Сырье
Макро-
скопиче-
ский ана-
лиз (внеш-
Микро-
скопиче-
ский
анализ
Качест-
венные и
микрохи-
мические
реакции
Определе-
ние приме-
сей
Степень
измель-
ченности
Заражен-
ность вре-
дителями
Определе-
ние биоло-
гической
активности
Содержание
золы, влаги,
экстрактив-
ных веществ
Фитохимический
анализ
Качественное и ко-
личественное опре-
деление действую-
щих веществ
24
Макроскопический анализ
Общие правила осуществления макроскопического анализа для
установления подлинности приведены в статьях ГФ ХI, вып.1: «Ли-
стья», «Травы», «Цветки», «Плоды», «Семена», «Кора», «Корни,
корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».
Макроскопический анализ состоит в определении морфологиче-
ских (внешних) признаков испытуемого сырья визуально - невоору-
женным глазом, с помощью лупы (х10) или стереомикроскопа. Про-
водят также промеры линейкой, отмечается окраска, запах сырья и
вкус (для неядовитых объектов!). Полученные в результате такого
анализа данные сравнивают с описанием, приведенном в разделе
«Внешний вид» нормативной документации (НД) на анализируемый
вид сырья. Макроскопический анализ наиболее надежен при опреде-
лении подлинности цельного сырья.
Размеры элементов сырья, определяют измерительной линейкой
(10-15 измерений), а мелкие плоды и семена на миллиметровой бу-
маге (20-30 измерений) и рассчитывают среднее значение. Размер
шаровидных семян определяют просеиванием через сита с круглыми
отверстиями.
Запах сырья определяют сначала не изменяя его состояние, за-
тем растирая его между пальцами или в ступке. Для усиления запаха
сырье смачивают водой.
Цвет сырья определяют визуально при дневном освещении. От-
мечают цвет сырья на поверхности органа (для листьев – с обеих
сторон), а также на изломе или разрезе сырья (корни, корневища, ко-
ра).
Вкус сырья определяют органолептически в сухом сырье (не
проглатывая) или пробуя на вкус его водное извлечение. Вкус сырья
ядовитых растений не определяют!!.
Дополнительно к внешнему осмотру нередко проводят качест-
венные реакции с водными извлечениями, микрохимические и гис-
тохимические реакции (на наличие крахмала, лигнина, слизи, ан-
трагликозидов, дубильных веществ и др.) на сухом сырье, с порош-
ком или соскобом, но чаще с извлечением из сырья, которые способ-
ствуют идентификации и выявлению доброкачественности ЛРС.
25
Folia – листья (ГФ XI, вып.1, с.252);
Листья, как лекарственное растительное сырье, представляют
собой высушенные или свежие вполне развитые листья или отдель-
ные листочки сложного листа с черешком, черешочками или без них.
При макроскопическом анализе листьев обращают внимание на
форму и размеры листовой пластинки, форму и длину черешка, ха-
рактер жилкования и края листа. При исследовании мелких и кожи-
стых листьев эти особенности хорошо видны на сухом материале.
Для изучения крупных и тонких листьев, которые обычно в сырье
бывают смяты, их необходимо предварительно размягчить во влаж-
ной камере или размочить путем погружения на несколько минут в
горячую воду. Размоченные листья раскладывают на стеклянной
пластинке, тщательно расправляя их. С помощью лупы (10 х) или
стереомикроскопа на сухом материале изучают характер и располо-
жение волосков (опушение), наличие эфирномасличных железок,
вместилищ и других образований на поверхности листа. Размеры
пластинки листа и черешка определяют с помощью линейки. Цвет
определяют с обеих сторон листа при дневном освещении. Вкус оп-
ределяют у сухого сырья или его отвара (только у неядовитых объ-
ектов). Запах устанавливают при растирании листа между пальцами
(схема 3).
Herba – трава (ГФ XI, вып.1, с.256)
Под названием «трава» в фармацевтической практике понима-
ют высушенные надземные части травянистых растений. Травы
обычно собирают во время цветения, поэтому в состав сырья входят
стебли с листьями, цветками и незрелыми плодами. В отдельных
случаях травы собирают до цветения (трава череды) или во время
плодоношения (трава горицвета). Способ сбора трав у разных расте-
ний различен: у одних растений собирают наиболее олиственные
верхушки стеблей, у других сбору подлежит вся надземная часть
растений; некоторые растения собирают вместе с корнями. Обмоло-
ченные травы получают в результате обмолачивания высушенной
травы. При этом крупные стебли выбрасывают; сырье состоит из
смеси листьев, цветков и частей наиболее тонких стеблей (трава
тимьяна, чабреца, донника и др.).
При макроскопическом анализе трав на сухом материале опре-
деляют характер опушения всех частей (под лупой или стереомикро-
скопом), цвет (листьев, стеблей, цветков), запах, вкус. Морфологиче-
ские особенности частей растения лучше изучать, предварительно их
26
размочив. Для этого траву погружают в горячую воду (5—10 мин),
затем тщательно раскладывают на стеклянной пластинке или клеен-
ке и изучают. Обращают внимание на форму и размеры листьев, ха-
рактер их расположения на стебле, тип соцветия и строение цветка,
тип плода, строение стебля (с поверхности и на поперечном разрезе).
В обмолоченных травах размачивают все части растения, входящие в
состав сырья, и изучают их характерные признаки (схема 4).
Flores – цветки (ГФ XI, вып.1, с.257)
Под названием «цветки» (соцветия) (F1оrеs), или «цветок» (Flos),
в фармацевтической практике понимают высушенные соцветия (кор-
зинки сложноцветных), цветки или их части. Цветки и соцветия со-
бирают, как правило, в начале цветения; в некоторых случаях их со-
бирают в фазу бутонизации (соцветия цитварной полыни, цветки со-
форы японской).
На сухом материале определяют тип соцветия, размеры цветка
или соцветия, наличие волосков (опушенность), цвет, запах, вкус.
Для изучения строения цветка или соцветия их предварительно раз-
мачивают, погружая в горячую воду на 5—10 мин. Размоченный
цветок помещают на стеклянную пластинку или предметное стекло и
изучают под лупой или с помощью стереомикроскопа, производя
при этом препарирование его отдельных частей — отделяют чашеч-
ку, лепестки венчика, тычинки, пестик (схема 5).
Radices, Rhizomata, Bulbus, Tubera, Bulbotubera - корни, корне-
вища, луковицы, клубни, клубнелуковицы (ГФ XI, вып.1, с.263)
Корни, корневища, клубни, луковицы, клубнелуковицы как
лекарственное сырье представляют собой высушенные, реже све-
жие, подземные органыподземные органы многолетних травянистых
растений, очищенные или отмытые от земли, освобожденные от от-
мерших частей, остатков стеблей и листьев.
Корни, корневища, клубнелуковицы, клубни и луковицы ос-
матривают без предварительной обработки. Макроскопический ана-
лиз подземных органов предусматривает изучение формы, определе-
ние размеров, определение цвета с поверхности и на изломе, опре-
деление запаха (при разламывании) и вкуса. Для неочищенных объ-
ектов важное диагностическое значение имеет характер поверхно-
сти, которая может быть ровной или морщинистой (с продольным
или поперечным рисунком складок), с рубцами от прикорневых ли-
стьев или буграми и точками — следы отмерших стеблей и корней.
27
Схема 3. Анализ сырья «Folia – листья» по внешним признакам
Листья
Простые
Сложные
Листовая пластинка
Листочки
Форма
Черешковые или сидячие
Край
Характер жилкования
Размер
Опушение листа
Цвет
Запах при растирании объекта
Вкус
Специфические особенности
28
Схема 4. Анализ сырья «Herba - трава» по внешним признакам
Трава
Плоды, семена
Стебель
Цветки
Листья
Схема
Схема 5
-
степень одревеснения,
- ветвление,
- форма поперечного сечения,
- размеры – длина и диаметр;
- расположение листьев и почек,
- наличие и характер опушения,
- колючек, усиков и др.
Схема 3
29
Характер излома корней и корневищ (ровный, зернистый, волокни-
стый, занозистый, короткощетинистый и т. п.) определяется структу-
рой тканей, в первую очередь наличием и характером механических
элементов (каменистых клеток, лубяных или древесных волокон).
Подземные органы при макроскопическом анализе часто исследуют
на поперечном разрезе, где обращают внимание на расположение
проводящих элементов (невооруженным глазом или с помощью лу-
пы, стереомикроскопа).
Качественные реакции проводят с 10% водным отваром, нередко
используют свежий соскоб корней, корневищ или даже отдельные
кусочки сырья (схема 6).
Cortex – кора (ГФ XI, вып.1, с.261)
Кора как лекарственное сырье представляет собой наружную
часть стволов, ветвей и корней деревьев и кустарников, расположен-
ную к периферии от камбия. Макроскопический анализ коры прово-
дят на сухом материале. Определяют форму и размеры кусков коры,
обращая особое внимание на ее толщину, так как качество сырья в
значительной степени зависит от возраста коры. В сырье кора имеет
вид трубчатых желобоватых или почти плоских кусков различных
размеров. Наружная поверхность коры покрыта пробкой. Обращают
внимание на цвет пробки, характер поверхности (гладкая, мор-
щинистая, шероховатая), форму и цвет чечевичек, наличие лишай-
ников и т. п. Внутренняя поверхность коры может быть гладкой или
ребристой (что характерно для каждого вида), по цвету она более
светлая, чем наружная поверхность. Для идентификации коры наря-
ду с характерными признаками поверхности большое значение имеет
характер поперечного излома, который зависит от наличия и особен-
ностей строения механических элементов коры. Запах коры опреде-
ляют при разламывании или соскабливании скальпелем. Для иден-
тификации коры важное значение имеют качественные химические
реакции, которые проводят как с водным отваром, так и с соскобом
или нанося реактив на внутреннюю поверхность коры (схема 7).
30
Схема 5. Анализ сырья «Flores - цветки» по внешним признакам.
Тип соцветия
Запах при расти-
рании объекта
Цветки
Строение цветка
Размеры цветка
или соцветия
Опушение
Цвет
31
Схема 6. Анализ сырья «Radices, Rhizomata – корни, корневища» по
внешним признакам
Форма
Размер
Характер поверхности
Цвет снаружи
Цвет на свежем изломе
Характер излома
Запах при соскабливании
Вкус
32
Fructus – плоды (ГФ XI, вып.1, с.258)
Плодами называют истинные и ложные плоды, соплодия, сбор-
ные плоды, а также их части. У плодов устанавливают форму, тип и
размеры. Плоды, принадлежащие к сочным, рассматривают сначала
в сухом виде, а затем после размачивания в горячей воде или кипя-
чения в течение 5-10 минут. Из размоченных плодов вынимают кос-
точки или семена, отмывают их от мякоти, изучают их внешний вид.
У плодов зонтичных определяют, кроме того, количество и характер
ребрышек, опушение и специфические признаки. У семян определя-
ют форму и внешний вид оболочки (схема 8). Для качественных хи-
мических реакций готовят 10% водный отвар плодов.
Схема 7. Анализ сырья «Cortex - кора» по внешним признакам.
Коры
Размеры:
длина и тол-
щина
Запах
Вкус
Специфиче-
ские особен-
ности
Форма кусков
коры: плоские;
желобоватые;
трубчатые;
желобовидно-
перекрученные
и т. п.
Поперечный
излом коры:
волокнистый;
щетинистый
или занози-
стый;
зернистый
Характер по-
верхности,
цвет
С внутренней
стороны
С наружной
стороны
33
Схема 8. Анализ сырья «Fructus-плоды» по внешним признакам
Строение
Форма
Размер (длина, толщина)
Характер поверхности кожуры
Форма и особенности строения
околоплодника
Цвет
Количество косточек или семян,
их форма и строение, структура поверхно-
сти
Вкус
Запах при растирании и соскабливании
объекта
34
Микроскопический анализ
Микроскопический анализ предполагает выборку анатомических
признаков лекарственного растительного сырья различной степени
измельченности (резаного, дробленого, порошкованного, прессован-
ного), отличающих данное ЛРС от других видов при диагностике его
подлинности и проведение качественных микрохимических реакций.
Анатомические признаки подразделяют на:
Анатомо-диагностические - это совокупность признаков анато-
мического строения сырья, отличающих данное ЛРС от других видов
при диагностике его подлинности.
Диагностически значимые признаки - анатомо-диагностические
признаки, четко отличающие данное лекарственное растительное
сырье от других видов, представленные в достаточном количестве в
анализируемом объекте и сохраняющиеся при измельчении лекарст-
венного растительного сырья до порошка с размером частиц 0.5мм.
Техника микроскопического анализа описана и регламентирует-
ся общей фармакопейной статьей «Техника микроскопического и
микрохимического исследования лекарственного растительного сы-
рья» ГФXI, вып.1, стр.277. При анализе различных морфологических
групп ЛРС применяют различные методологические подходы при
изготовлении микропрепаратов, их просветления и окрашивания,
учитывая степень измельченности сырья.
Микроскопический анализ не может быть окончательным крите-
рием идентификации растительного сырья. Только в совокупности с
другими методами анализа (макроскопическим, химическим, хрома-
тографическим, люминисцентным) можно достоверно установить
подлинность объекта исследования.
Сухое растительное сырье перед работой следует размягчить. С
учетом особенностей объекта применяют холодное размачивание,
кипячение, размягчение в водных парах во влажной камере и другие.
После соответствующей подготовки сырья из него готовят микропре-
параты. Техника их приготовления разнообразна и зависит от состояния
сырья и его принадлежности к определенной морфологической группе
(листья, коры, подземные органы, плоды).
Приготовление и исследование микропрепаратов из листьев,
трав и цветков
Цельное и измельченное сырье. При исследовании цельного сы-
рья для приготовления микропрепаратов листа с поверхности мелкие
35
листья используют целиком, от крупных листьев берут отдельные
участки с учетом распределения важнейших диагностических при-
знаков: край листа, зубчик по краю листа, участок главной жилки,
верхушка листа и основание, кусочки черешка. При исследовании
измельченного сырья берут по нескольку различных кусочков – с
крупной жилкой и краем листа. У трав берут лист, иногда также ку-
сочек стебля и цветок, у цветков – чашечку, венчик и цветоножку.
Для просветления объектов несколько кусочков сырья помеща-
ют в колбу или пробирку, прибавляют 2,5% раствор натрия гидро-
ксида и кипятят в течение 1-5 минут в зависимости от толщины и
плотности объекта, не допуская сильного размягчения. Более жест-
кие листья (толокнянка, брусника, эвкалипт) кипятят до 5 минут, бо-
лее хрупкие листья (крапива, чистотел) – до 2 минут. Затем содер-
жимое переливают в стеклянный стакан объемом 5 мл, сырье тща-
тельно промывают водой и переносят в чашку Петри в небольшом
количестве воды. Исследуемый материал с помощью препароваль-
ной иглы переносят на предметное стекло и добавляют включающую
жидкость. На препарат под углом помещают покровное стекло слег-
ка придавливая.
Допускается другой способ просветления: кусочки сырья кипя-
тят в пробирке в растворе хлоралгидрата несколько минут (до полно-
го просветления).
Венчик обычно размачивают в горячей воде и помещают на
предметное стекло.
Кусочки сырья, просветленные тем или иным способом и поме-
щенные на предметное стекло, разделяют с помощью препароваль-
ных игл на две части, одну из них осторожно переворачивают. Ко-
жистые и толстые листья, тонкие черешки для высвобождения эпи-
дермиса раздавливают скальпелем или обратным концом препаро-
вальной иглы. С толстых черешков снимают эпидермис с помощью
препаровальных игл или бритвы, убирая грубые внутренние части
черешка. Слегка подогревают для удаления пузырьков воздуха и по-
сле охлаждения рассматривают лист с обеих сторон и эпидермис че-
решка сначала при малом, затем при большом увеличении микро-
скопа. Пользуясь макро- и микровинтом исследуют верхний и ниж-
ний эпидермис, а также глубинные структуры листа, расположенные
под эпидермисом (паренхима, включения, сосуды и т.д.).
Для приготовления поперечных срезов из листьев (толстые и
кожистые листья) и стеблей последние кипятят в растворе хлорал-
36
гидрата и зажимают в бутылочной пробке. Пробку предварительно
кипятят около 15 минут в воде, затем надрезают вдоль на 3/4. В раз-
рез помещают кусочек сырья, крепко зажимают и делают срезы
бритвой через сырье вместе с пробкой. Готовые срезы снимают кис-
точкой, переносят на предметное стекло и рассматривают в растворе
хлоралгидрата.
При необходимости делают поперечный срез цветоножки по
аналогии с черешком.
Порошки листьев, трав просветляют кипячением в 2,5% раство-
ре натрия гидроксида. Порошок берут кончиком препаровальной иг-
лы, смоченной жидкостью, помещают в колбу, тщательно размеши-
вают и кипятят 3-5 минуты. Затем промывают от щелочи и переносят
в чашку Петри в небольшом количестве воды.
Порошки цветков размачивают в горячей воде.
Для изготовления препарата помещают несколько кусочков ис-
следуемого порошка на предметное стекло в 1-2 капли включающей
жидкости и рассматривают под микроскопом.
При необходимости дальнейшего просветления на предметное
стекло наносят 1-2 капли хлоралгидрата и небольшое количество ис-
следуемого порошка, закрывают покровным стеклом, слегка придав-
ливая ручкой иглы. Выступающую по краям жидкость отсасывают
полоской фильтровальной бумаги. Затем препарат нагревают в тече-
ние 1-2 мин (до просветления) и рассматривают под микроскопом.
Исследование микропрепаратов ведут по схеме 9.
37
Схема 9. Микроскопический анализ сырья « Folia - Листья»
Препарат листа
Структура листа
Характер эпидермиса
Строение:
Дорсивентральный лист
Изолатеральный
Мезофилл:
характер палисадной и губча-
той ткани, количество слоев
Минеральные
включе-
ния:
1. Кристаллы кальция окса-
лата
Одиночные
Друзы
Рафиды
Стилоиды
Кристаллический песок
Кристаллоносная обкладка
Секреторные структуры:
Клетки идиобласты
Схизогенные вместилища
Лизигенные вместилища
Секреторные каналы
Форма клеток:
Паренхимные и про-
зенхимные
Извилистостенные и
прямостенные и др.
Кутикула:
Тонкая, толстая
Ровная, складчатая,
бородавчатая и др.
Устьичный аппарат:
Аномоцитный
Анизоцитный
Парацитный
Диацитный
Тетрацитный
Трихомы:
Простые одноклеточ-
ные
Простые многоклеточ-
ные
Головчатые, желези-
стые
Железки
38
Приготовление и исследование микропрепаратов из плодов и
семян
Цельное, измельченное, дробленое сырье. При микроскопиче-
ском анализе плодов и семян рассматривают микропрепараты кожу-
ры с поверхности или поперечные срезы.
Диагностическое значение имеет строение околоплодника. В
околоплоднике различают три слоя: наружный – экзокарпий (эпи-
дермис), средний - мезокарпий, внутренний – эндокарпий. Обраща-
ют внимание на форму, строение клеток эпидермиса, на наличие и
особенности строения волосков; в мезокарпии важное значение
имеют наличие механических элементов, их форма и локализация,
число и расположение эфиромасличных канальцев, проводящих
пучков, наличие кристаллических включений, форма клеток парен-
химы и др.
У семян обращают внимание на общее строение, характер и
строение семенной кожуры, величину и форму запасной питательной
ткани – эндосперма, форму и строение зародыша.
Для приготовления препаратов кожуры 2-3 семени, плод или его
кусочек кипятят в пробирке в растворе 5% натрия гидроксида в те-
чение 1-2 мин (при очень темной пигментированной кожуре кипятят
дольше - до просветления), затем помещают на предметное стекло,
препаровальными иглами снимают отдельные слои кожуры и рас-
сматривают их в растворе глицерина или хлоралгидрата. Ткани ме-
зокарпия и эндокарпия рассматривают в давленных препаратах и на
срезах. Давленные препараты получают при использовании обратно-
го конца препаровальной иглы или скальпеля путем надавливания на
объект в заключающей среде на предметном стекле.
Для приготовления срезов слишком сухие плоды и семена пред-
варительно размягчают, поместив их на сутки во влажную камеру
(влажной камерой служит эксикатор с водой, в которую добавлено
несколько капель хлороформа), или в водяных парах, для чего в ко-
нической колбе кипятят небольшое количество воды, семена или
плоды помещают в марлю и подвешивают на стеклянной палочке
так, чтобы они находились в парах, но не погружались в воду. Раз-
мягчение продолжают 15-30 мин или более, в зависимости от твер-
дости плодов или семян. После этого приступают к приготовлению
срезов.
Мелкие, плоские семена, которые трудно удержать пальцами,
режут в пробке, как при подготовке срезов из листьев и трав.
39
Мелкие, круглые или гладкие семена, не удерживающиеся в
пробке, помещают в парафиновый блок размером 0,5 х 0,5 х 1,5см.
Парафин расплавляют с узкой стороны блока кончиком нагретой
препаровальной иглы и в образовавшуюся ямку быстро погружают
семя. Семя должно быть сухим. Допускается предварительно раз-
мягчить семя во влажной камере. Срезы делают бритвой через семя
вместе с парафином, помещают на предметное стекло, удаляют па-
рафин препаровальной иглой или отмывают бензином и рассматри-
вают в растворе хлоралгидрата.
Микропрепараты порошков плодов и семян готовят аналогично
микропрепаратам порошка листьев, трав и цветков.
При исследовании строения клеток кожуры и околоплодника в
порошке из плодов и семян, содержащих крахмал или незначитель-
ное количество жирного масла, препарат готовят в растворе хлорал-
гидрата при легком подогревании.
При необходимости порошок обезжиривают и просветляют сле-
дующим способом: для обезжиривания порошок сырья помещают в
пробирку с притертой пробкой и заливают 2-3 раза смесью спирта с
эфиром (1:3) и после настаивания каждый раз в течение 20 мин рас-
творитель сливают. Вместо смеси спирта с эфиром для обезжирива-
ния можно использовать ксилол или эфир.
Для просветления 0,5-1,0 г порошка насыпают в фарфоровую
чашку, прибавляют 5-10 мл разведенной азотной кислоты и кипятят
в течение 1 мин, затем жидкость процеживают через ткань и промы-
вают горячей водой. Остаток на ткани собирают лопаточкой обратно
в фарфоровую чашку, обливают 5-10 мл 5% раствора натрия гидро-
ксида, кипятят в течение 1 мин, снова процеживают через ту же
ткань и промывают горячей водой. Остаток рассматривают в раство-
ре глицерина под микроскопом.
При анализе порошка из плодов и семян проводят качественные
реакции для выявления содержимого клеток.
Для определения крахмала в порошке готовят два препарата:
один окрашивают раствором Люголя (раствор иода в водном рас-
творе иодистого калия) и по синей окраске определяют наличие
крахмала (окраска исчезает при нагревании и со временем, поэтому
анализируют препарат сразу после изготовления). Второй препарат
помещают в воду и определяют форму, строение и величину крах-
мальных зерен.
40
Для определения наличия жирного масла и эфирного масла в
порошке готовят препарат в растворе Судана III при подогревании.
Капли масла окрашиваются в оранжево-желтый или оранжево-
розовый цвет.
Для отличия эфирных масел от жирных масел объекты погру-
жают в 2-3 капли водного раствора метиленового синего. Через не-
сколько минут их рассматривают в воде или глицерине. Эфирное
масло окрашивается в синий цвет.
Эфирные масла можно наблюдать без применения красителей в
виде капель светло-желтого, темно-желтого, зеленовато-желтого, ко-
ричневато-красного цвета.
Для определения наличия слизи в порошке препарат готовят в
растворе черной туши и тотчас ставят под микроскоп при малом
увеличении. Слизь заметна в виде бесцветных масс на черном фоне,
которые при легком надавливании препаровальной иглой растекают-
ся.
Приготовление и исследование микропрепаратов из коры
При анализе цельной коры готовят поперечные или продольные
срезы. Для размягчения кору ломают на кусочки длиной около 1 - 2
см и шириной 0,5 - 1 см. и кипятят в пробирке с водой в течение 1-5
мин.; размягченные кусочки выравнивают скальпелем так, чтобы
они имели строго поперечное или продольное сечение. Срезы дела-
ют бритвой, смачивают поверхность коры раствором глицерина,
снимают их кисточкой и переносят на предметное стекло. Тонкие
коры режут в пробке, как при подготовке срезов из листьев и трав.
При определении обращают внимания на наружную кору, рас-
полагающуюся к периферии от окончания сердцевинных лучей и со-
стоящую из первичной коры (если сохранилась) и перидермы и на
внутреннюю (флоэму) расположенную от камбия до окончания
сердцевинных лучей (схема 10).
41
Схема 10. Микроскопический анализ сырья «Cortex - Кора»
Качественные химические реакции проводят на сухом сырье, с
соскобом, порошком или с извлечением из сырья.
Для обнаружения одревесневших элементов к срезу на пред-
метном стекле прибавляют несколько капель раствора анилина
сульфата, затем жидкость отсасывают, препарат помещают в раствор
хлоралгидрата и закрывают покровным стеклом - одревесневшие
элементы окрашиваются в ярко-желтый цвет. Можно также исполь-
зовать раствор сафранина с отмывкой избытка красителя подкислен-
ным спиртом - одревесневшие элементы окрашиваются в розовый
цвет или флороглюцин с серной кислотой – одревесневшие клеточ-
ные оболочки окрасятся в малиновый цвет.
Крахмал в препаратах, приготовленных из коры, обнаруживают
по появлению синего окрашивания при нанесении на срез коры рас-
твора йода (раствор Люголя).
Дубильные вещества обнаруживают раствором железоаммо-
нийных квасцов или хлорида окисного железа (черно-синее или чер-
но-зеленое окрашивание), раствором калия бихромата (бурое окра-
шивание). Для этого 1-2 капли реактива наносят на внутреннюю по-
верхность кусочков коры.
Характер строения
(см. по тексту)
Пробка
Толщина
Количество слоев
Цвет
Основная парен-
хима (форма кле-
ток, наличие вклю-
чений)
Сердцевинные лу-
чи
(однорядные,
многорядные, во-
ронковидные)
Кристаллические
включения,
млечники, клет-
ки-идиобласты
Механические
элементы (их ко-
личество, распо-
ложение):
Лубяные волок-
на
Каменистые
клетки (склереи-
42
Производные антрацена обнаруживают раствором щелочи, на-
нося на внутреннюю поверхность коры 1-2 капли реактива (кроваво -
красное окрашивание) или проводят микросублимацию.
При анализе измельченной коры готовят соскоб коры или берут
мелкие кусочки и, после кипячения в течение 3-5 мин в 5% растворе
натрия гидроксида, приготавливают давленые препараты, которые
помещают в раствор глицерина. В таких препаратах почти все эле-
менты видны в продольном сечении. Далее проводят качественные
микрохимические реакции, как на препаратах из цельной коры.
При анализе порошка из коры на предметное стекло помещают
немного порошка в раствор хлоралгидрата и проводят качественные
микрохимические реакции, как на препаратах из цельной коры.
Приготовление и исследование микропрепаратов из корней, кор-
невищ, луковиц, клубней, клубнелуковиц
При анализе цельных корней и корневищ приготавливают попе-
речные и продольные срезы. Для размягчения небольшие кусочки
корней размачивают в растворе глицерина в течение 1-3 суток в за-
висимости от твердости. Размоченные корни выравнивают скальпе-
лем, срезы делают бритвой, смачивая поверхность срезов глицери-
ном. Сначала срезают бритвой более толстые, но цельные ломтики,
затем делают срезы тонкие и более мелкие. Цельные ломтики окра-
шивают раствором анилина сульфата, флороглюцином с 25%-ной
серной кислотой или раствором сафранина и рассматривают в лупу.
На мелких срезах проводят качественные химические реакции и
рассматривают их под микроскопом (схема 11). Важнейшими диаг-
ностическими признаками для подземных органов являются распо-
ложение и характер проводящих и механических элементов, наличие
разнообразных вместилищ, каналов, млечников, кристаллов оксалата
кальция, запасного питательного вещества (крахмал, слизь, инулин,
жирное масло). Реакцию на крахмал проводят, как указано выше.
При наличии крахмала приготавливают препарат с водой и проводят
микрометрическое измерение зерен.
Наличие жирных масел устанавливают, как указано выше для
порошка из плодов и семян.
Наличие инулина определяют реакцией Молиша. На предметное
стекло берут немного сухого порошка, полученного соскобом изло-
ма корня или корневища, 1 -2 капли раствора α-нафтола (резорцина
43
или тимола) и 1 каплю концентрированной серной кислоты. В при-
сутствии инулина порошок окрашивается в красновато-фиолетовый
цвет, от резорцина и тимола - в красный. Так как крахмал тоже дает
эту реакцию, ее проводят только при отсутствии крахмала.
Наличие у корней и корневищ одревесневших элементов, ду-
бильных веществ и производных антрацена устанавливают, как ука-
зано выше для цельной коры.
Анализ измельченных корней и корневищ проводят, как указано
для измельченной коры. Отмечают характер утолщения сосудов и
трахеид, наличие и форму механических элементов (волокна, каме-
нистые клетки), кристаллов оксалата кальция и др.
Анализ порошка из корней и корневищ проводят, как указано для
порошка из коры. Диагностическими элементами являются сосуды и
трахеиды с характерными утолщениями стенок, механические эле-
менты, встречающиеся группами или одиночно, запасные питатель-
ные вещества и др.
44
Схема 11. Микроскопический анализ сырья «Radices, Rhizomata
– корни, корневища»
Корень
Анатомическое
строение
Корневище
Пучковый тип строения
Непучковый тип строе-
ния
Первичное строение
Вторичное строение
Гистологический со-
став флоэмы
Гистологический со-
став ксилемы
Характер проводящих
пучков:
коллатеральные, би-
коллатеральные, кон-
центрические;
открытые и закрытые
Форма и структура
сердцевинных лучей:
Особенность парен-
химы и характер за-
пасного питательного
вещества
Кристаллические
включения: одиноч-
ные кристаллы, дру-
зы, рафиды, кристал-
лический песок
Секреторные структу-
ры: вместилища, кана-
лы, ходы, секреторные
клетки, млечники
Механические элемен-
ты: лубяные волокна,
либриформ,
камени-
стые клетки
45
Контрольные вопросы по теме
1. Что такое подлинность лекарственного сырья?
2. Какие методы используются для определения подлинности?
З. В чем заключается цель макроскопического и микроскопиче-
ского анализов?
4. Что определяют микрохимическими реакциями?
5. Назовите внешние признаки лекарственного сырья: листьев,
цветков, травы, плодов, коры, подземных органов.
6. Как определяют органолептические признаки сырья?
7. Назовите индифферентные и просветляющие жидкости.
8. Назовите реактивы на слизь, крахмал, клетчатку, одревеснев-
шие элементы, жирные и эфирные масла, инулин.
9. Назовите различные типы волосков, железок, форму клеток
эпидермы, типы включений.
10.Назовите причины, по которым лекарственное сырье может
не соответствовать требованиям НД.
Аппаратура, материалы и реактивы
1. Микроскопы, лупы
2. Спиртовка
3. Пробирки, чашки Петри
4. Стекла предметные, стекла покровные
5. Иглы препаровальные, бритвы безопасные (лезвия)
6. Пробка или сердцевина бузины, бумага фильтровальная
7. Глицерин, хлоралгидрат
8. Натрия гидроксид, 2,5%-ный раствор
9. Квасцы железоаммонийные, 1%-ный раствор
10. Раствор Люголя, судан III
11. Метиленовая синь, спиртовый раствор (1:5000)
12. α-нафтол, 20%-ный спиртовый раствор
13. Кислота серная концентрированная
14. Тушь черная, разбавленная 1:10
15. Раствор анилина сульфата
16. Флороглюцин, 1%-ный спиртовый раствор
17. Раствор железа окисного
Примечание: приготовление растворов и реактивов по ГОСТ
24027.0-80 или ГФ XI, ч.1.
46
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОСТИ ЛЕКАРСТВЕН-
НОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
Определение доброкачественности лекарственного растительно-
го сырья проводится в соответствии с требованиями ГОСТа 24027.2-
80 и ГФ XI, вып. 1.
Метод определения степени зараженности сырья амбарными
вредителями изложен в ГФ СССР XI издания (вып.1, стр. 276) и
ГОСТ 24027.1-80. Лекарственное сырье, содержащее сахар, крахмал
и другие питательные вещества, при хранении и перевозке поража-
ется различными клещами, жучками, молью, личинками бабочек и
грызунами.
Для проведения испытания применяют ручную лупу, пинцет и
сито с отверстиями размером 0,5 мм. Если обнаружено заражение
сырья амбарными вредителями, в первую очередь определяется сте-
пень зараженности, а затем измельченности и содержание примесей.
Определение степени зараженности сырья амбарными вредите-
лями
Проведение испытания.
Пробу (массой 500 г для мелких видов сырья и массой 1000 г для
крупных видов сырья) просеивают сквозь сито с отверстием 0,5 мм.
В сырье, прошедшем сквозь сито, проверяют наличие клещей. В
сырье, оставшемся на сите - наличие моли, ее личинок, куколок и
других вредителей. Наличие живых и мертвых вредителей и их ко-
личество устанавливают невооруженным глазом или при помощи
ручной лупы с увеличением 5-10 х.
Обработка результатов.
Количество найденных в аналитической пробе сырья вредителей
и их личинок пересчитывают на 1 кг сырья. В зависимости от коли-
чества вредителей в 1 кг сырья устанавливают степень его зараже-
ния.
Различают три степени зараженности сырья вредителями:
I степень – в 1 кг сырья не более 20 клещей (клещ мучной –
Tyroglyphus farina, клещ волосатый – Glycifphagus destructor, клещ
хищный – Cheyletus eruditus, сухофруктовый клещ – Carpoglyphus
lactis и др.);
47
II степень – более 20 клещей, свободно передвигающихся по
поверхности сырья и не образующих сплошных масс, или 6-10
экземпляров моли, точильщика и их личинок;
III степень – клещи образуют сплошные войлочные массы,
движение их затруднено, или более 10 экземпляров насекомых в
сырье (моль, точильщик, их личинки и др.)
Сырье, зараженное вредителями, после дезинсекции просеивают
сквозь сито с отверстиями 0.5 мм (при зараженности клещами) или 3
мм (при зараженности другими вредителями).
После обработки сырье I степени зараженности вредителями
может быть допущено к медицинскому применению. В случае II и III
степени зараженности сырья партия бракуется.
При наличии в 1 кг сырья амбарной моли (Tinea granella L.) и ее
личинок, хлебного точильщика (Sitodrepa panicea L.) и других вре-
дителей в количестве не более 5, заражение сырья этими вредителя-
ми относят к I степени; при наличии 6 - 10 вредителей - заражение
сырья относят к II степени, более 10 вредителей - к III степени.
Сырье, зараженное вредителями, после дезинсекции просеивают
сквозь сито с отверстием 0,5 мм (при зараженности клещами) или 3
мм (при зараженности другими вредителями).
После обработки сырья при I степени зараженности вредителями
оно может быть допущено к медицинскому применению. При II сте-
пени и в исключительных случаях при III степени зараженности сы-
рье может быть использовано для переработки с целью получения
индивидуальных веществ, в остальных случаях сырье уничтожается.
Определение измельченности
Аналитическую пробу (таблица 3) осторожно перемешивают и
просеивают сквозь сита, размер которых указан в нормативной до-
кументации на конкретное сырье. Дополнительно используют сито с
размером отверстия 0,25мм для отделения пыли, которую прибавля-
ют к минеральной примеси.
Отсев измельченных частей производят плавными вращатель-
ными движениями, не допуская дополнительного измельчения. Раз-
решается перемешивать сырье, если оно не подвергается измельче-
нию.
Для цельного сырья частицы, прошедшие сквозь сито, взвеши-
вают и вычисляют их процентное содержание к массе аналитической
пробы.
48
Для просеивания резанного, дробленого, порошкованного сырья
берут два сита. Затем отдельно взвешивают сырье, оставшееся на
верхнем сите и прошедшее сквозь нижнее сито и вычисляют про-
центное содержание частиц, не прошедших сквозь верхнее сито, и
содержание частиц, прошедших сквозь нижнее сито, к массе анали-
тической пробы.
Взвешивание производят с погрешностью ±0,1 г при массе ана-
литической пробы свыше 100 г и ±0,05 г при массе аналитической
пробы 100 г и менее.
Допустимая норма содержания измельченных частиц для каждо-
го вида сырья указана в соответствующей НД.
Определение содержания примесей
Примеси – посторонние части растений и предметы, попадаю-
щие в сырье в процессе заготовки, сушки и применения.
Примеси в лекарственном сырье делятся на две группы - органи-
ческие и минеральные.
Органические примеси:
примеси других не ядовитых растений (прутья, сено, солома);
другие части этого растения, не соответствующие установлен-
ному описанию сырья (если они не выделяются отдельным
пунктом в НД на соответствующее сырье).
Минеральные примеси
песок, земля, пыль, камешки, попадающие в сырье в результате
сбора, обработки, сушки и упаковки.
Примеси могут быть допустимые и недопустимые.
Недопустимые примеси
1. Ядовитые растения (в любом количестве);
2. Металлические предметы, стекла (в любом количестве);
3. Помет птиц и грызунов (в любом количестве);
4. Другие похожие растения (в пределах норм органической
примеси).
Некоторые растения, хотя они и неядовитые, могут быть недо-
пустимы как примеси, так как обладают другими свойствами. На-
пример, к плодам жостера слабительного в качества примеси не до-
пускаются плоды черемухи, оказывающие вяжущее действие. В тра-
ве термопсиса недопустимой примесью являются плоды этого расте-
ния, так как их химический состав и применение различны.
49
Допустимые примеси
Допустимыми являются органические и минеральные примеси,
если их содержание не превышает норм, указанных в НД.
Методика определения примесей
Оставшуюся часть аналитической пробы после отсева измель-
ченных частиц (для цельного сырья) или сход с верхнего и нижнего
сит (для резанного, дробленого и другого измельченного сырья) по-
мещают на чистую, гладкую поверхность и лопаточкой или пинце-
том выделяют примеси. Просев через сито с отверстием 0,25 мм сра-
зу относят к минеральным примесям.
Каждый вид примеси взвешивают отдельно с погрешностью
±0,1г при массе аналитической пробы более 100 г и с погрешностью
±0,05г при массе аналитической пробы 100 г и менее.
Содержание каждого вида примеси (X) вычисляют в процентах
по отношению к аналитической пробе и сравнивают с НД.
2
1
100
m
m
X
;
m
1
- масса примеси, г;
m
2
- масса аналитической пробы сырья, г.
Определение влажности
Под влажностью сырья понимают потерю в массе за счет гигро-
скопической влаги и летучих веществ, которую определяют в сырье
при высушивании до постоянной массы. Аналитическую пробу сы-
рья измельчают до размера частиц около 10 мм, перемешивают и бе-
рут две навески массой 3 - 5 г, взвешенные с погрешностью ± 0,01 г.
Каждую навеску помещают в предварительно высушенный вместе с
крышкой бюкс и ставят в нагретый до 100-105°С сушильный шкаф,
не закрывая крышкой. Время высушивания отсчитывают с того мо-
мента, когда температура в сушильном шкафу вновь достигает 100 -
105°С. Первое взвешивание листьев, трав и цветков проводят через 2
ч; корней, корневищ, коры, плодов, семян и других видов сырья - че-
рез 3 ч.
Высушивание проводят до постоянной массы. Постоянная масса
считается достигнутой, если разница между двумя последними
взвешиваниями после 30 мин высушивания и 30 мин охлаждения в
эксикаторе не превышает 0,01 г.
50
Определение потери в массе при высушивании для пересчета
количества действующих веществ и золы на абсолютно сухое сырье
проводят в навеске 1 -2 г (точная навеска), взятые из аналитической
пробы, предназначенной для определения содержания золы и дейст-
вующих веществ вышеописанным методом, но при разнице между
взвешиваниями, не превышающей 0,0005 г.
Влажность сырья (X) в процентах вычисляют по формуле:
m
m
m
X
100
)
(
1
;
где, m - масса сырья до высушивания в граммах;
m
1
- масса сырья после высушивания в граммах.
За окончательный результат определения принимают среднее
арифметическое двух параллельных определений, вычисленных до
десятых долей процента. Допускаемое расхождение между результа-
тами двух параллельных определений не должно превышать 0,5%.
Определение золы
Золой называют несгораемый остаток неорганических веществ,
получаемый после сгорания и прокаливания сырья. В состав зольно-
го остатка входят все составные части растения и посторонние мине-
ральные примеси (земля, песок, камешки), попавшие в сырье при
сборе и сушке.
Различают:
Золу общую, представляющую собой сумму минеральных ве-
ществ, свойственных растению и посторонних минеральных приме-
сей;
Золу, нерастворимую в растворе кислоты хлороводородной,
представляющую собой остаток после обработки общей золы 10 %
раствором кислоты хлороводородной и состоящую из кремнезема
или силикатов. Повышенный процент золы указывает на загрязнен-
ность сырья минеральными примесями.
Определение золы общей
1 г измельченного лекарственного растительного сырья (точная
навеска) помещают в предварительно прокаленный и точно взве-
шенный фарфоровый, кварцевый или платиновый тигель, равномер-
но распределяя по дну тигля. Затем тигель осторожно нагревают, да-
51
вая сначала сгореть при возможно более низкой температуре; после
того как сырье сгорит почти полностью, увеличивают нагрев.
При неполном сгорании частиц сырья остаток охлаждают, сма-
чивают водой или насыщенным раствором аммония нитрата, выпа-
ривают на водяной бане и остаток прокаливают. В случае необходи-
мости такую операцию повторяют несколько раз. Прокаливание ве-
дут при слабом красном калении (около 500°С) до постоянной мас-
сы, избегая сплавления золы и спекания ее со стенками тигля. По
окончании прокаливания тигель охлаждают в эксикаторе и взвеши-
вают.
Масса считается постоянной, если разница между двумя взвеши-
ваниями не превышает 0,0005 г.
Содержание общей золы (X) в процентах в абсолютно-сухом сы-
рье вычисляют по формуле:
)
100
(
100
100
)
(
2
1
W
m
m
m
X
,
где m
1
– масса золы в граммах;
m – масса сырья в граммах;
W – потеря в массе при высушивании сырья,%.
Определение золы, нерастворимой в 10% растворе хлороводо-
родной кислоты
К остатку в тигле, полученному после сжигания ЛРС, прибавля-
ют 15 мл 10% раствора хлороводородной кислоты; тигель накрыва-
ют часовым стеклом и нагревают 10 мин на кипящей водяной бане.
К содержимому тигля прибавляют 5 мл горячей воды, обмывая ею
часовое стекло. Жидкость фильтруют через беззольный фильтр, пе-
ренося на него остаток с помощью горячей воды. Фильтр с остатком
промывают горячей водой до отрицательной реакции на хлориды в
промывной воде, переносят его в тот же тигель, высушивают, сжи-
гают, прокаливают до постоянной массы, как описано выше, и взве-
шивают.
Содержание золы, нерастворимой в 10% растворе хлоровород-
ной кислоты (X), в процентах в абсолютно сухом сырье вычисляют
по формуле:
)
100
(
100
100
)
(
2
1
W
m
m
m
X
;
где m
1
– масса золы в граммах;
52
m – масса золы фильтрата в граммах (если золы его более
0.002 г);
m
2
– масса сырья в граммах;
W – потеря в массе при высушивании сырья, %.
Определение содержания экстрактивных веществ в лекарствен-
ном растительном сырье
Экстрактивными веществами называют комплекс органиче-
ских и неорганических веществ, которые извлекаются из ЛРС соот-
ветствующим растворителем, указанным в НД на данный вид сырья
(вода, спирт этиловый).
Определение экстрактивных веществ в сырье проводят в тех
случаях, когда фармакологический эффект обусловлен комплексом
биологически активных веществ или для данного сырья не разрабо-
тан метод количественного определения действующих веществ.
Содержание экстрактивных веществ, как и действующих ве-
ществ, зависит от соблюдения сроков, района заготовки сырья и
должно быть не менее той, которая указанна в НД.
Методика определения
Около 1 г измельченного сырья (точная навеска), просеянного
сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм, помещают в коническую
колбу вместимостью 200-250 мл, прибавляют 50 мл растворителя,
указанного в соответствующей нормативной документации на ле-
карственное растительное сырье, колбу закрывают пробкой, взвеши-
вают (с погрешностью ±0,01 г) и оставляют на 1ч. Затем колбу со-
единяют с обратным холодильником, нагревают, поддерживают сла-
бое кипение в течение 2 ч. После охлаждения колбу с содержимым
вновь закрывают той же пробкой, взвешивают и потерю в массе вос-
полняют растворителем. Содержимое колбы тщательно взбалтывают
и фильтруют через сухой бумажный фильтр -в сухую колбу вмести-
мостью 150-200 мл. 25 мл фильтрата мерной пипеткой переносят в
предварительно высушенную при температуре 100-105°С до посто-
янной массы и точно взвешенную фарфоровую чашку диаметром 7-9
см и выпаривают на водяной бане досуха. Чашку с остатком сушат
при температуре 100-105°С до постоянной массы, затем охлаждают в
течение 30 мин в эксикаторе, на дне которого находится безводный
хлорид кальция, и немедленно взвешивают.
Содержание экстрактивных веществ (X) в процентах в пересчете
на абсолютное сухое сырье вычисляют по формуле:
53
;
)
100
(
100
200
25
)
100
(
100
100
50
1
1
W
m
m
W
m
m
X
где m - масса сухого остатка, в граммах;
m
1
- масса сырья в граммах;
W - потеря в массе при высушивании сырья, в процентах.
Контрольные вопросы по теме
1. Что понимается под доброкачественностью лекарственного
растительного сырья?
2. Назовите степени зараженности сырья амбарными вредителя-
ми и порядок использования зараженного сырья?
3. Какое значение для качества сырья имеет показатель его из-
мельченности. Почему исследование сырья начинают с опре-
деления измельченности?
4. Назовите и дайте определение видам примесей к ЛРС, спосо-
бы попадания примесей в ЛРС?
5. Что называется золой, ее разновидности, значение данного по-
казателя для оценки качества сырья?
6. Что такое экстрактивные вещества. Какое значение имеет дан-
ный показатель для оценки качества сырья?
Аппаратура, материалы и реактивы
1. Лупа ручная с увеличением 5-10х
2. Пинцет
3. Набор сит
4. Шкаф сушильный лабораторный, печь муфельная
5. Весы аптечные, весы аналитические
6. Эксикатор
7. Бюксы стеклянные или металлические, тигли фарфоровые
8. Щипцы тигельные
9. Баня водяная, электроплитка
10. Фильтры беззольные
11. Часовые стекла
12. Колбы конические на 200 - 250 мл, цилиндр на 50 мл
13. Холодильник обратный, пипетки Мора на 25 мл
14. Чашки фарфоровые, диаметр 7-9 см
15.10%-ный раствор кислоты хлороводородной
16. Вода дистиллированная
17. 2% раствор нитрата серебра
54
Рекомендуемая литература
1.
Государственная Фармакопея СССР, XI издание. - М.: Ме-
дицина, 1987. Вып. 1.-334с.
2.
Государственная Фармакопея СССР, XI издание. - М.: Ме-
дицина, 1990, Вып.2. -398с.
3.
Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим
занятиям по фармакогнозии. - М.: Медицина, 1997. -255 с.
4.
Лекарственное растительное сырье растительного и жи-
вотного происхождения. Фармакогнозия. Учебное пособие. Под ре-
дакцией Г.П. Яковлева. – Санкт-Петербург: СпецЛит, 2006. -845с.
5.
Лекарственные растения Государственной Фармакопеи
(под ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева). – М., «АНМИ», 1999. –
488 с.
6.
Лекарственные растения Государственной Фармакопеи.
Фармакогнозия (под ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева). – М.,
2003. – 534 с.
7.
Общая фармакопейная статья 42-0013-03 «Правила прием-
ки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб»
16.06.2003 г.
8.
Общая фармакопейная статья 42-0011-03 «Определение
содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье.
Стронций-90 цезий-137. Отбор проб, анализ и оценка результатов».
19.03.2003 г.
9.
ОСТ 62-4-338-85 «Средства лекарственные растительные.
Фасовка, упаковка, маркировка, транспортирование и хранение».
10. Отраслевой стандарт. Сырье лекарственное растительное.
Порядок установления сроков годности. ОСТ 42-3-84.
55
Учебное издание
МЕТОДЫ ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА
ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
ЧАСТЬ I
ПРАВИЛА ПРИЕМКИ И ОБЩИЕ МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ
Учебное пособие
Авторы:
Андреева Валерия Юрьевна, канд. биол.наук,
ст.преподаватель
Калинкина Галина Ильинична,
д-р.фарм.наук, профессор
Сальникова Екатерина Никифоровна,
канд.фарм.наук, доцент
Напечатано в авторской редакции
Подписано в печать 03.12.2008 г.
Формат 60х84
16
1
. Бумага офсетная.
Печать ризограф. Гарнитура «Times». Печ.лист.3,43.
Тираж 100 экз. Заказ №
Отпечатано в лаборатории оперативной полиграфии СибГМУ
634050, г.Томск, ул.Московский тракт, 2
Информация о работе Методы фармакогностического анализа лекарственного растительного сырья