Выявление вируса болезни Ньюкасла среди диких и домашних птиц в Казахстане

Выявление вируса болезни  Ньюкасла среди диких и домашних птиц в Казахстане

 Ж. Кыдырбаев¹, А. Сансызбай¹, М. Орынбаев¹, К. Султанкулова¹, D. Suarez², J.Crawford³,

В.Строчков¹, А.Керимбаев¹, Е.Бурашев¹, З.Омарова¹, К.Табынов¹

¹Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности (НИИПББ)

²USDA-SEPRL;

³Naval Medical ResearchUnit -3 (NAMRU-3)

INTRODUCTION

На территории Казахстана вирусы болезни Ньюкасла разной степени  патогенности циркулируют среди  домашних и диких птиц, однако болезнь  не всегда диагностируется. Исследования, проводимые в рамках проекта TAP-3 направлены на изучение циркуляции вируса болезни Ньюкасла среди диких и домашних птиц.

METHODS

При проведении исследовании использованы клоачные и трахеальные смывы от диких и домашних птиц. Выделение РНК проводили с помощью набора фирмы "Qiagen" RNeasyMinikit» по методике, рекомендуемой изготовителем. ПЦР-РВ проводили с помощью коммерческого набора «OneStep RT-PCR kit» фирмы "Qiagen". Секвенирование ДНК проводили методом дидеоксисеквенирования с использованием терминирующих дидеоксинуклеотидов (метод Сенгера) на автоматическом 16-капиллярном секвенаторе Genetic Analyser 3130 xl, Applied Biosystems.

RESULTS

В октябре 2011 года в орнитологической станции Шакпак Жамбылской области собраны 250 проб от 25 видов диких птиц семейств: Meropidae, Hirundinidae, Accipitridae, Falconidae, Columbidae, Motacillidae, Muscicapidae, Caprimulgidae, Sylviidae, Strigidae, Corvidae. 13 проб (5,2%) из 250 положительно реагировали на вирус болезни Ньюкасла в ПЦР-РВ, в частности 10 проб от щурки золотистой (Merops apiaster), 1 проба от лесного конька (Anthus trivialis), 1 проба от коршуна чёрного (Milvus migrans) и 1 проба от галки (Corvus monedula).

При проведении лабораторного  анализа в ПЦР-РВ трахеальных смывов 343 домашних птиц (куры, утки) Алматинской области (г. Капчагай, хозяйства Балхашского района) в июне 2012 года вирус болезни Ньюкасла не выявлен.

       В июне 2012 года в урочище Карачингиль, озере Тузколь Алматинской области собраны трахеальные и клоачные смывы от 102 диких птиц из семейств: Corvidae, Ardeidae, Charadriidae, Turdidae, Motacillidae, Upupidae, Emberizidae, Anatidae, Fringillidae. Лабораторный анализ трахеальных смывов от диких птиц ПЦР-РВ не дали положительные результаты на вирус болезни Ньюкасла.

В ноябре 2012г. в Северо-Казахстанской области в личном подворье был зарегистрирован случай заболевания и гибели птиц. Исследование проб биологического материала от птиц методом ПЦР-РВ показало наличие вируса болезни Ньюкасла.  Расшифрована нуклеотидная последовательность F гена, кодирующий белок слияния вируса болезни Ньюкасла. Данные секвенирования области протеолитического расщепления белка слияния показали, что последовательность данного участка у казахстанского изолята вируса  болезни Ньюкасла имеет сайт нарезания, который является одним из маркеров инфекционности и патогенности вируса болезни Ньюкасла.

CONCLUSIONS

Вирусы болезни Ньюкасла циркулируют среди диких птиц семейств Meropidae, Accipitridae, Motacillidae и Corvidae, исследованных в орнитологической станции Шакпак Жамбылской области в октябре 2011 года. Из 250 исследованных проб 13 (5,2%) - положительно реагировали на вирус болезни Ньюкасла в ПЦР-РВ. Пробы, собранные от диких и домашних птиц в Алматинской области в июне 2012 года не дали положительные результаты на вирус болезни Ньюкасла в ПЦР-РВ. По результатам секвенирования F гена казахстанского изолята вируса болезни Ньюкасла установлен сайт нарезания, являющегося маркером инфекционности и патогенности.