Псевдомонады

Автор работы: Пользователь скрыл имя, 12 Мая 2015 в 08:09, реферат

Описание работы

Прямая или искривлённая с закруглёнными концами палочка, 1—5 х 0,5—1,0 мкм, монотрих. Хемоорганогетеротроф, облигатный аэроб (денитрификатор), протеолитическая активность сильно выражена, сахаролитическая низкая.. Растёт на МПА (среда окрашивается в сине- зелёный цвет), МПБ (в среде помутнение и пленка, также сине-зелёный цвет). Растёт при 42 °C (оптимум — 37 °C), селективная среда — ЦПX-агар (питательный агар с цетилперидиниум-хлоридом). Образует протеазы. Продуцирует характерные пигменты: пиоцианин (феназиновый пигмент, окрашивает питательную среду в сине-зелёный цвет, экстрагируется хлороформом), пиовердин (желто-зелёный флюоресцирующий в ультрафиолетовых лучах пигмент) и пиорубин(бурого цвета).

Содержание работы

Таксономия 3
Биологические и тинкториальные свойства 3
Антигенные свойства 5
Эпидемиология 5
Патогенез поражений и эпидемиология. 6
Диагностика 9
Лечение и профилактика 13
Список литературы 15

Файлы: 1 файл

Psevdomonady.docx

— 47.64 Кб (Скачать файл)

Волгоградский государственный университет

Кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии с курсом клинической микробиологии

Зав. кафедрой Замараев Валерий Семёнович

 

 

 

Реферат на тему «Псевдомонады»

 

 

Подготовила

 студентка 14 группы 

3 курса лечебного факультета  Кабдушева М.А.

Проверил преподаватель: Тимофеева Анна Самовна

 

 

 

 

Волгоград

2014

 

Оглавление

 

 

 

 

 

Таксономия

 

Царство:Бактерии

Тип:Протеобактерии

Класс: Gamma Proteobacteria

Порядок:Pseudomonadales

Семейство:Pseudomonadaceae

Род:Pseudomonas

Вид:Pseudomonas aeruginosa

 

Биологические и тинкториальные свойства

Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка) — грамотрицательная подвижная (монотрихи или амфитрихи) палочковидная бактерия.

Прямая или искривлённая с закруглёнными концами палочка, 1—5 х 0,5—1,0 мкм, монотрих. Хемоорганогетеротроф, облигатный аэроб (денитрификатор), протеолитическая активность сильно выражена, сахаролитическая низкая.. Растёт на МПА (среда окрашивается в сине- зелёный цвет), МПБ (в среде помутнение и пленка, также сине-зелёный цвет). Растёт при 42 °C (оптимум — 37 °C), селективная среда — ЦПX-агар (питательный агар с цетилперидиниум-хлоридом). Образует протеазы. Продуцирует характерные пигменты: пиоцианин (феназиновый пигмент, окрашивает питательную среду в сине-зелёный цвет, экстрагируется хлороформом), пиовердин (желто-зелёный флюоресцирующий в ультрафиолетовых лучах пигмент) и пиорубин(бурого цвета). Некоторые штаммы осуществляют биодеструкцию углеводородов и формальдегида.В мазке располагаются одиночно, попарно, короткими цепочками, синтезируют крахмалоподобное вещество типа внеклеточной слизи, более вирулентные штаммы синтезируют повышенное его количество. Хорошо растет на простых питательных средах, имеет ограниченную потребность в питательных веществах. Растет в широком диапазоне температур (4–42 °С). Синегнойная палочка хорошо растет на простых питательных средах в аэробных условиях при температуре 30–37 °С, а также и при 42 °С (что можно использовать как дифференциально-диагностический признак). Образование слизи – характерная особенность; слизь придает характерную вязкость бульонным культурам и колониям мукоидных штаммов. На жидких питательных средах образует характерную серовато-серебристую пленку; по мере старения культур возникает помутнение среды сверху вниз. На плотных питательных средах образует весьма разнообразные колонии. При росте на плотных средах у многих штаммов наблюдают феномен радужного лизиса, развивающийся спонтанно. Феномен характерен только для P. aeruginosa, его можно рассматривать как таксономический признак. Более того, он индивидуально выражен у отдельных штаммов и его можно использовать для внутривидовой дифференциальной диагностики. При образовании пигмента происходит окрашивание некоторых сред (например, агара Мюллера–Хинтона) в зеленый цвет. Протеолитическая активность сильно выражена: разжижает желатин, свертывает сыворотку крови, гидролизирует казеин; утилизирует гемоглобин. Сахаролитическая активность, наоборот, низкая: окисляет только глюкозу с образованием глюконовой кислоты. Эта бактерия продуцирует бактериоцины – пиоцины, способность к синтезу и чувствительность к которым широко варьирует у различных штаммов псевдомонад. На этом основано пиоцинотипирование псевдомонад, применяемое для внутривидовой дифференциальной диагностики чистых культур этого микроорганизма. Кроме продукции пиоцинов синегнойная палочка может образовывать пигменты – характерный и имеющий важное диагностическое значение признак.

Среди пигментов наиболее часто встречают

  • Пиоцианин. Окрашивает питательную среду, отделяемое ран и перевязочный материал в сине-зеленый цвет.
  • Флюоресцин (пиовездин), флюоресцирующий при УФ-облучении (длина волны – 254 нм).
  • Пиорубин (красный).
  • Пиомеланин (черный).
  • L-оксифеназин (желтый)

Антигенные свойства

Основные антигены синегнойной палочки — соматический антиген, О-Аг, и жгутиковый антиген, Н-Аг. Серологическую идентификацию культур и выявление их принадлежности к определённому серовару проводят по наличию у выделенной культуры сочетания группоспецифического О-Аг и типоспецифического Н-Аг. О-Аг и Н-Аг синегнойной палочки обозначают арабскими цифрами (например, 0-1, 0-2, Н-1, Н-2 и т.д.), указывающими на принадлежность к определённой серологической группе (или Н-серовару). Сочетание индексов определяет принадлежность к конкретному серовару.

 О-антигенный комплекс  синегнойной палочки — сложный  макромолекул ярный агрегат Л ПС и белков. Типо-или группоспецифические Аг P. aeruginosa представлены липополисахаридами; они являются основными структурными компонентами О-Аг, обусловливающими его специфичность. На основе структуры О-Аг проводят серологическое типирование. Белковый компонент О-Аг — антигенный комплекс, общий для псевдомонад, то есть родовой О-Аг. По структуре О-Аг выделяют более 20 серогрупп.

 Н-антигенный комплекс  синегнойной палочки представлен  термолабильными белками низкой  специфичности, обусловленной различиями  в строении флагеллинов. Выявлено 15 различных типов Н-Аг. Н-Аг обнаруживают лишь у жизнеспособных, подвижных бактерий, не подвергшихся какому-либо воздействию дезинфицирующих или антимикробных средств.

 

Эпидемиология

По значимости пути распространения синегнойной инфекции делят на основные и редко встречающиеся. К источникам, имеющим важное значение, относят первую очередь больных с синегнойной инфекции, а также руки обслуживающего персонала. Существенным фактором распространения синегнойной инфекция могут служить заражённые предметы обихода, растворы, кремы для рук, полотенца для лица, гениталий, помазок для бритья и т.п. К редко встречающимся факторам следует отнести распространение инфекции через инструменты, приборы и аппаратуру, которые подвергались дезинфекции, оказавшейся неэффективной.

Синегнойная палочка поражает в основном лиц с ослабленным иммунитетом: госпитализированных больных с сопутствующими заболеваниями, лиц пожилого возраст и детей. Попадая в организм через катетеры, инструменты или растворы для орошении мочеиспускательного канала либо влагалища, синегнойные палочки вызывают инфекции мочеполовой системы

Предрасполагающими факторами для развития инфекции являются мочекаменная болезнь, врожденные пороки развития половых органов, постоянные или часто повторяющиеся катетеризации, удаление предстательной железы. Характерно заражение в больничной обстановке, например, в урологических отделениях. Синегнойные палочки занимают одно из первых мест среди возбудителей инфекций, развивающихся в пересаженной почке.

Патогенез поражений и эпидемиология.

Патогенное действие P. aeruginosa обусловлено образованием веществ, проявляющих свойства экзотоксинов, и высвобождением эндотоксинов при гибели и распаде бактериальной клетки.

Экзотоксины бактерий представлены продуктами жизнедеятельности с широким спектром биологической активности. Среди них основное значение имеют:

1. Экзотоксин А – белок с молекулярной массой 66 000–72 000 Д. Молекула токсина состоит из одной полипептидной цепи с 4 дисульфидными мостиками, свободных сульфгидридных групп не содержит. Токсин термолабилен, расщепляется трипсином, панкреатической эластазой, проназой, а также распадается под действием собственных протеолитических ферментов. Механизм действия связан с модификацией белков через АТФ-рибозилирование. Его мишень – фактор элонгации 2 (ФЭ-2); следствие – нарушение организации матрицы белкового синтеза (аналогичным свойством обладает дифтерийный токсин). Действие проявляется (в экспериментах на подопытных животных) в токсическом действии общего характера: отеках, некрозах, гипертензии с последующим коллапсом, метаболическом ацидозе, дыхательной недостаточности, параличе внутриклеточного синтеза белков и т.д.

2. Экзоэнзим S – белок с АДФ-трансферазной активностью; термостабилен. Инактивируется под действием денатурирующих и восстанавливающих агентов, ионов Cu2+ и Fe2+. Образуется в двух формах: первая – ферментативно активный белок с молекулярной массой 49 000 Д; вторая – неактивный белок-предшественник с молекулярной массой 53 000 Д. Этот экзоэнзим в очищенном виде нетоксичен для животных. In vivo вызывает глубокие патологические процессы в легких.

3. Цитотоксин оказывает выраженное цитотоксическое действие на полиморфно-ядерные нейтрофилы; способствует развитию нейтропении. Вызывает ультраструктурные изменения в клетках, нарушение физиологических градиентов K+, Na+, Ca2+ и глюкозы через повышение проницаемости клеточных мембран; последнее обусловливает набухание клеток и потерю ими крупных (например, белковые) молекул.

4. Гемолизины. Бактерия  образует две гемолитические  субстанции – термолабильный гемолизин с лецитиназной активностью (фосфолипаза С) и термостабильный гемолизин (фосфолипаза). И первый, и второй гемолизины вызывают солюбилизацию и гидролиз фосфолипидов с образованием фосфорилхолинов. In vivo гемолизины приводят к развитию некротических поражений, особенно в печени и легких.

Среди эндотоксинов, образуемых синегнойной палочкой, выделяют:

1. Энтеротоксический фактор. Несмотря на то, что он не выделен в чистом виде, в настоящее время подтверждены его белковая природа, термолабильность и чувствительность к действию трипсина.

2. Фактор проницаемости, также лабильный к нагреванию  и действию трипсина. Подтверждена  его роль в развитии патологических  процессов в тканях.

3. Нейраминидаза. Она нарушает  процессы метаболизма веществ, содержащих  нейраминовые кислоты, например в соединительнотканных элементах. Этот фермент способен в 2–3 раза усиливать действие других токсинов синегнойной палочки1.

Несмотря на наличие большого набора факторов вирулентности, синегнойную палочку все же следует рассматривать как оппортунистический патоген, так как синегнойная инфекция редко наблюдается у иммунокомпетентных лиц с неповрежденными анатомическими барьерами. Большинство штаммов P. aeruginosa обладает поверхностными микроворсинками, обеспечивающими адгезию к эпителию. Взаимодействие с клетками реализируется через рецепторы, включающие N-ацетилнейраминовые кислоты; определенную роль играет и вырабатываемая бактериями слизь. Прикрепление к субстратам стимулирует дефицит фибронектина, наблюдаемый при многих заболеваниях, особенно при муковисцидозе и других хронических заболеваниях легких.

Псевдомонады – типичные внеклеточные микроорганизмы, и их размножение напрямую обусловлено способностью противостоять действию факторов колонизационной резистентности макроорганизма. В частности, слизь и секретируемые цитотоксины затрудняют элиминацию бактерий фагоцитами и иммунокомпетентными клетками, что особенно выражено у пациентов с иммунодефицитами.

Патологические состояния, предрасполагающие к развитию синегнойной инфекции2

  Состояния

Проявления синегнойной инфекции

Частые внутривенные вливания

Эндокардит, остеомиелит

Лейкозы

Сепсис, периректальный абсцесс

Болезни злокачественного роста

Пневмония, сепсис, менингит, диарея

Муковисцидоз

Пневмония

Ожоги

Целлюлит, сепсис

Операции на органах ЦНС

Менингит

Трахеостомия

Пневмония

Язвы роговицы

Панофтальмит

Катетеризация сосудов

Гнойный тромбофлебит

Катетеризация мочевых путей

Инфекции мочеполовой системы

Период новорожденности

Диарея, менингит


 

В марте-мае 1998 г. в Канаде была зафиксирована вспышка «синдрома горячей стопы», возможно вызванного P.aeruginosa, у 40 детей в возрасте от 2 до 15 лет, пользовавшихся одним бассейном. Данный синдром характеризовался эритематозной сыпью с узловатыми элементами на подошвенной поверхности стопы, отеком, чувством жжения и интенсивным болевым синдромом. Данная симптоматика развивалась в среднем через 40 часов после купания в бассейне.

При физикальном обследовании были обнаружены красно-пурпурные узлы диаметром 1–2 см, не сопровождавшиеся регионарной лимфоаденопатией. Через несколько дней на стопах появилось шелушение.

У одного ребенка из пустулы на стопе была выделена Pseudomonas aeruginosa. Такой же штамм Pseudomonas aeruginosa в высокой концентрации был выделен из воды бассейна. Биопсия кожи у этого пациента выявила нейтрофильную инфильтрацию вокруг сосудов и потовых желез. При биопсии, взятой у другого пациента, были обнаружены микроабсцессы в дерме.

Результаты двух исследований, опубликованные в медицинском журнале – The New England Journal of Medicine, показывают, что проведение бронхоскопических обследований и манипуляций может быть причиной возникновения вспышек нозокомиального инфицирования пациентов Pseudomonas aeruginosa.

 

Диагностика

 

Первичный посев материала проводят на селективную среду для выделения синегнойной палочки и универсальную среду (5% кровяной агар). В качестве селективных сред можно использовать коммерческие зарубежные среды с цетримидом или иргазаном. Однако их превосходит по чувствительности и селективности отечественная среда "Псевдомонас АПС", которую можно приготовить в любой лаборатории. Материал засевают петлей на поверхность среды "Псевдомонас АПС" (можно на 1/4 чашки), инкубируют при 42оС в течение 20-24 ч, после чего учитывают результат: наличие роста бактерий указывает на принадлежность к P.aeruginosa. На этом исследование завершается. Если указанная среда не изменилась, продолжают изучение посевов на 5% кровяном агаре или других селективных средах, которые культивировались при 37оС 20-24 ч. Обращают внимание на характерные признаки колоний бактерий, запах триметиламина и сине-зеленое окрашивание среды. По наличию уникального сине-зеленого пигмента (пиоцианина) можно окончательно идентифицировать на этом этапе до 75% штаммов синегнойной палочки. Для идентификации беспигментных штаммов требуется постановка дополнительных тестов: на барийчувствительность, цитохромоксидазу, нитратредуктазу, желатиназу, аргининдигидролазу, лизиндекарбоксилазу, окисление глюкозы и маннита на среде Хью — Лейфсона, индукцию пиоцианина на среде Кинг А и пиовердина на среде Кинг В. Тест на цитохромоксидазу ставится с 1% водным раствором диметилпарафенилендиамина; тесты на нитратредуктазу, аргининдигидролазу, лизиндекарбоксилазу — микрообъемным методом с учетом через 3-4 ч. Остальные тесты учитывают через 24 ч. Идентификацию синегнойной палочки проводят по результатам тестов по представленной таблице дифференциальных признаков бактерий (табл. 18).

Информация о работе Псевдомонады