Для доступа воздуха
открыть кран посевного штуцера. ..
- Добавить подготовленный и охлаждённый до 15ºС биопрепарат из МФ-1000 в количестве 500л и перемешать в течение не менее 15 минут. Общее количество препарата должно составить 2000л.
- Передача готового препарата на фасовку.
- Охладить готовый препарат в РОЗ-2,5 при перемешивании до температуры 15ºС, отключить мешалку.
- По согласованию с бригадой фасовки начать передачу препарата на участок фасовки: открыть краны на линии подачи из РОЗ на участок фасовки и кран посевного штуцера на люке (посевной штуцер должен быть закрыт стерильной повязкой или ватно-марлевой пробкой). Все остальные краны должны быть закрыты.
3.5.Мойка и дезинфекция
оборудования.
- После освобождения оборудования промыть ферментеры , РОЗ и фасовочную линию водой из шланга, отсоединить и промыть водой с дезраствором . Обработать дезраствором (0,2% раствором анолита, растворами хлорамина или перекиси водорода – по заданию, готовятся в соответствии с инструкциями по подготовке и использованию дезрастворов № Т-2 и Т-4) внутренние поверхности оборудования, вычистить вручную стенки, крышки, все глухие места.
- После обработки с дезраствором сделать выдержку в течение 30мин., после чего слить дезраствор в трап, заполоснуть оборудование стерильной водой и оставить оборудование пустым с приоткрытой крышкой (открытым люком) до следующей операции.
- При подготовке РОЗ к фасовке препарата обработку дезраствором и заполаскивание проводить непосредственно перед загрузкой РОЗ. После обработки закрыть люк и закрыть стерильной ватно-марлевой пробкой кран посевного штуцера на люке.
- Шланги промыть водой, затем дезраствором (либо отсоединить и отдать на стерилизацию).
- Периодически (особенно после операций с ПМФ) промывать дезраствором линию выхлопа: заполнить линию дезраствором через ферментёр, закрыть все краны на линии, сделать выдержку в течение 30 минут, затем дезраствор слить.
4.ПРИГОТОВЛЕНИЕ
БИОПРЕПАРТА “ЗАКВАСКА ДЛЯ СИЛОСОВАНИЯ
КОРМОВ”
4.1.ХАРАКТЕРИСТИКА
СЫРЬЯ, МАТЕРИАЛОВ И ГОТОВОЙ
ПРОДУКЦИИ.
- Солод ячменный молотый – размолотые или дробленые проросшие зерна ячменя. При попадании на кожу не опасен, смыть водой, при попадании в глаза и на слизистые - промыть водой. Средства индивидуальной защиты – спецодежда (халат или комбинезон х/б), резиновые перчатки.
- Меласса свекловичная – густая коричневая вязкая жидкость с содержанием 45 - 50% сахара, со сладковатым запахом, хорошо растворима в воде. Плотность - г/см3. При попадании на кожу не опасна, смыть водой, при попадании в глаза и на слизистые - промыть водой. Средства индивидуальной защиты – спецодежда (халат или комбинезон х/б), резиновые перчатки.
- Кукурузный экстракт – густая расслаивающаяся жидкость коричневого цвета со специфическим запахом, содержит большое количество соединений азота, хорошо растворим в воде. Плотность - г/см3. Перед подготовкой навесок необходимо хорошо перемешать.
При попадании на кожу
не опасен, смыть водой, при попадании
в глаза и на слизистые - промыть водой.
Средства индивидуальной защиты – спецодежда
(халат или комбинезон х/б), резиновые перчатки.
- Соль поваренная пищевая (хлорид натрия NaCl) – кристаллы белого или сероватого цвета, хорошо растворимые в воде.
При попадании на кожу
не опасен, смыть водой, при попадании
в глаза и на слизистые вызывает
раздражение, промыть водой.
Средства индивидуальной защиты – спецодежда
(халат или комбинезон х/б), резиновые перчатки.
- Мел технический – порошок белого или сероватого цвета, без запаха.
При попадании на кожу
не опасен, смыть водой, при попадании в глаза и
на слизистые - промыть водой.
Средства индивидуальной защиты – спецодежда
(халат или комбинезон х/б), резиновые перчатки.
- Гидроксид натрия NaOH (щелочь) – белые или сероватые пластины или кусочки неправильной формы, хорошо растворяются в воде (42% при 0ºС) с выделением большого количества тепла. Действие на организм: растворы (особенно концентрированные) вызывают сильные ожоги кожи и слизистых, дерматиты, экземы, вдыхание пыли и паров вызывает раздражение и ожоги дыхательных путей. При попадании в глаза возникает глубокий ожог, который может привести к слепоте. При попадании на кожу и слизистые – убрать кристалл или каплю «щипком» и немедленно промыть большим количеством воды, при попадании в глаза – промыть большим количеством воды, обратиться к врачу. Средства индивидуальной защиты – резиновые перчатки, респиратор, очки, спецодежда (халат или комбинезон х/б).
- Аммиачная вода – водный раствор аммиака NН3 с концентрацией 28-29%, прозрачная жидкость с резким удушливым запахом, плотность 0,9 г/см3.
Действие на организм:
пары вызывают острые отравления (токсическое
действие на нервную систему), раздражение
дыхательных путей (вплоть до отёка
лёгких), бронхиты, головокружения, слезотечение
и резь в глазах. При попадании на кожу,
слизистые и в глаза возникают поражения
тканей.
При попадании на кожу
и слизистые – промыть водой,
при попадании в глаза – промыть водой,
обратиться к врачу, при отравлении
парами – вывести пострадавшего на
свежий воздух, обратиться к врачу.
Средства индивидуальной защиты – резиновые
перчатки, противогаз марки К, очки, спецодежда
(халат или комбинезон х/б).
- Хлорамин – белый порошок, хорошо растворим в воде. Водный раствор применяется в качестве дезинфицирующего средства. Действие на организм: вызывает дерматиты, экземы, раздражение дыхательных путей, коньюктивиты. При попадании на кожу и слизистые – промыть водой, при попадании в глаза – промыть водой, обратиться к врачу. Средства индивидуальной защиты – резиновые перчатки, респиратор, очки, спецодежда (халат или комбинезон х/б).
- Известь хлорная – пылящий белый порошок, мало растворим в воде. Водный раствор хлорной извести применяется в качестве дезинфицирующего средства. Действие на организм: вызывает дерматиты, экземы, раздражение дыхательных путей, коньюктивиты. При попадании на кожу и слизистые – промыть водой, при попадании в глаза – промыть водой, обратиться к врачу. Средства индивидуальной защиты – резиновые перчатки, респиратор, очки, спецодежда (халат или комбинезон х/б).
- Анолит – прозрачный дезинфицирующий раствор с содержанием перекисных соединений и соединений активного хлора в количестве от 0,2 до 0,5%. При попадании на кожу не опасен, смыть водой, при попадании в глаза и на слизистые - промыть водой. Средства индивидуальной защиты – резиновые перчатки, спецодежда (халат или комбинезон х/б).
- Пергидроль (30-35% раствор перекиси водорода) – прозрачная бесцветная жидкость без запаха. Растворы перекиси водорода обладают выраженным бактерицидным и спороцидным действием. Действие на организм: концентрированные растворы вызывают глубокие ожоги кожи и слизистых, вдыхание паров вызывает раздражение и ожоги дыхательных путей. При попадании в глаза возникает глубокий ожог, который может привести к слепоте. При попадании на кожу и слизистые – убрать каплю «щипком» и немедленно промыть большим количеством воды, при попадании в глаза – промыть большим количеством воды, обратиться к врачу. Средства индивидуальной защиты – резиновые перчатки, респиратор, очки, спецодежда (халат или комбинезон х/б), закрытая резиновая обувь.
- Сода кальцинированная – бесцветные кристаллы, растворимые в воде (17,8% при 20ºС, при нагревании растворимость повышается). Водные растворы имеют щелочную реакцию. Действие на организм: может вызывать дерматиты, экземы (особенно горячие и концентрированные растворы), пыль соды вызывает раздражение дыхательных путей, изъязвления слизистой, коньюктивиты. При попадании на кожу и слизистые – промыть водой, при попадании в глаза – промыть водой, обратиться к врачу. Средства индивидуальной защиты – резиновые перчатки, респиратор, очки, спецодежда (халат или комбинезон х/б).
- Препарат «Закваска» - представляет собой культуральную жидкость от желтого до коричневого цвета, содержащую молочно-кислые микроорганизмы Lactobacillus plantarum шт. МК-1 в количестве не менее 1*107 КОЕ/мл, хорошо смешивающуюся с водой, со специфическим кисловатым запахом. При попадании на кожу и слизистые – смыть водой с мылом, при попадании в глаза – промыть водой. Средства индивидуальной защиты - резиновые перчатки, спецодежда (халат или комбинезон х/б).
- Стерилизация (пропарка) МФ-250.
Стерилизация ферментера проводится в
автономном режиме либо с использованием
парогенератора в соответствии с «Инструкцией
№ О-2 по работе на машинах ферментационных
МФ-250».
- Подготовка и стерилизация питательной среды.
Подготовка ферментера
к стерилизации, стерилизация и
охлаждение питательной среды
проводится в соответствии с
«Инструкцией № О-2 по работе на машинах ферментационных МФ-250».
3.3.1. Среда на основе
солода ячменного.
При приготовлении
Закваски в ферментерах МФ-250:
- Залить в ферментер 100л водопроводной воды с температурой 40-60 ºС.
- Загрузить в ферментер при включенной мешалке 14кг молотого солода и 4 кг мелассы, добавить 100л воды, перемешать в течение нескольких минут. По заданию – добавить NaCl (соль поваренную) в заданном количестве.
- Замерить рН среды, рН должна быть в пределах (6,0-6,5). При необходимости довести рН до этого значения 10%-ным раствором NaOH.
- Простерилизовать питательную среду в ферментере (сделать выдержку при температуре (110-115) ºС в течение 1 часа).
- Охладить питательную среду (запрограммировать температуру культивирования 32ºС).
- При достижении температуры 35ºС вызвать лаборанта и совместно с ним отобрать в асептических условиях (над пламенем спиртовки или факела) пробу питательной среды в количестве 1л для определения рН, стерильности, кислотности и содержания сахара в питательной среде (при отсутствии лаборанта отобрать пробу самостоятельно в оставленную стерильную посуду).
- Подсоединить к штуцеру барботера баллон с углекислым газом, открыть краны на линии подачи воздуха и выхлопа, осторожно приоткрыть вентиль баллона и провести продувку питательной среды углекислым газом в течение 3-5 минут. Закрыть вентиль баллона, после падения давления на ферментере закрыть краны на линии подачи и выхода воздуха и кран посевного штуцера и отсоединить баллон. Контроль продувки вести по давлению на манометрах.
При приготовлении
Закваски в РОЗ-2,5:
- Подготовить 5 или 6 ферментеров (по заданию) к загрузке питательной среды.
- Подготовить концентрат питательной среды на основе солода в четырех ферментерах: залить в каждый ферментер по 100л водопроводной воды с температурой 40-60 ºС, при включенной мешалке загрузить по 20кг молотого солода, добавить 100л воды, перемешать в течение нескольких минут.
- Загрузить в пятый ферментер 150л воды и 40 - 60кг мелассы (по заданию), перемешать в течение нескольких минут.
- По заданию – в шестой ферментёр загрузить 150л воды и NaCl (соль поваренную) в заданном количестве, перемешать в течение нескольких минут.
- Стерилизацию питательной среды вести одновременно во всех аппаратах аналогично стерилизации при приготовлении закваски в ферментерах с той разницей, что охлаждение питательной среды после стерилизации можно вести не до 35ºС, а до 40-50ºС.
- Подготовить РОЗ – 2,5 к загрузке питательной среды: он должен быть вымыт, обработан дезраствором и заполоснут стерильной водопроводной водой. Все краны и люк РОЗ должны быть закрыты, посевной штуцер (на люке) закрыт стерильной ватно-марлевой пробкой.
- Открыть на РОЗ кран посевного штуцера (со стерильной ватно-марлевой пробкой), кран подачи водопроводной воды и залить в РОЗ 1000л стерильной водопроводной воды с температурой 35 - 40ºС (объём воды замерять по водомеру).
- По окончании охлаждения концентрата питательной среды в ферментёрах поочередно подсоединить ферментеры с помощью стерильного шланга к РОЗ. Для этого один конец шланга закрепить на патрубке сливного штуцера ферментера, а другой – на патрубке сливной крестовины РОЗ.
- Открыть краны на сливном штуцере ферментера и краны подачи на насос на сливной крестовине РОЗ, краны на посевных штуцерах РОЗ и ферментера (со стерильной ватно-марлевой повязкой) также должны оставаться открытыми.
- Подключить РОЗ к электросети.
- На КИП шкафа управления РОЗ запрограммировать рабочую температуру 35 ºС.
- Включить насос и передать концентрат питательной среды из ферментеров в РОЗ – 2,5 при включенных мешалках ферментеров (кроме раствора поваренной соли!). Ферментёр с концентратом мелассы заполоснуть небольшим количеством стерильной воды.
- При необходимости добавить в РОЗ стерильную воду с таким расчётом, чтобы общий объем среды в РОЗ после посева был 2500л.
- Включить мешалку РОЗ и тумблер автоматического регулирования температуры и перемешать питательную среду в течение не менее 30 минут.
- Замерить рН среды, рН должна быть в пределах (6,0-6,5). При необходимости довести рН до этого значения 10%-ным раствором NaOH.
- Вызвать лаборанта и совместно с ним отобрать через посевной штуцер в асептических условиях пробу питательной среды в количестве 1л для определения рН, стерильности, кислотности и содержания сахара в питательной среде (при отсутствии лаборанта отобрать пробу самостоятельно).
- По заданию - передать в РОЗ раствор поваренной соли (в этом случае проба на содержание сахара отбирается до передачи солевого раствора, а проба на рН и стерильность – после передачи; коррекция рН также проводится после передачи раствора соли).
- При достижении температуры 35 ºС отключить мешалку.
- По заданию подсоединить к штуцеру барботера баллон с углекислым газом, открыть кран на штуцере барботера, осторожно приоткрыть вентиль баллона и провести продувку питательной среды углекислым газом в течение 10-20 минут, контролируя подачу газа по давлению на манометре. Закрыть вентиль баллона, после выхода из РОЗ остаточного количества газа закрыть кран на штуцере барботера, кран посевного штуцера и отсоединить баллон.
3.3.2. Среда на основе
мелассы и кукурузного экстракта.
При приготовлении
Закваски в ферментерах:
- Залить в ферментер 200 л водопроводной воды с температурой 40-60 ºС.
- Загрузить в ферментер при включенной мешалке 4 кг кукурузного экстракта и 4 кг мелассы, перемешать в течение нескольких минут.
- Замерить рН среды, рН должна быть в пределах (6,0-6,5). При необходимости довести рН до этого значения 10%-ным раствором NaOH.
- По заданию – добавить мел технический в количестве 2 кг или аммиачный буфер в заданном количестве (аммиачный буфер предварительно готовится в лаборатории на основе аммиачной воды).
- Простерилизовать питательную среду в ферментере (сделать выдержку при температуре (110-115) ºС в течение 1 часа).
- Охладить питательную среду (запрограммировать температуру культивирования 32ºС).
- При достижении температуры 35ºС вызвать лаборанта и совместно с ним отобрать в асептических условиях (над пламенем спиртовки или факела) пробу питательной среды в количестве 200 мл для определения рН, стерильности, кислотности и содержания сахара в питательной среде (при отсутствии лаборанта отобрать пробу самостоятельно в оставленную стерильную посуду).
- Подсоединить к штуцеру барботера баллон с углекислым газом, открыть краны на линии подачи воздуха и выхлопа, осторожно приоткрыть вентиль баллона и провести продувку питательной среды углекислым газом в течение 3-5 минут. Закрыть вентиль баллона, после падения давления на ферментере закрыть краны на линии подачи и выхода воздуха и кран посевного штуцера и отсоединить баллон. Контроль продувки вести по давлению на манометрах.
При приготовлении
Закваски в РОЗ-2,5:
- Подготовить 2 ферментера к загрузке питательной среды.
- Подготовить концентрат питательной среды: залить в каждый ферментер по 150л водопроводной воды с температурой 40-60 ºС, при включенной мешалке загрузить в один ферментёр 50 кг кукурузного экстракта, а в другой – 50 кг мелассы, перемешать в течение нескольких минут.
- Простерилизовать питательную среду одновременно в обоих ферментёрах (сделать выдержку при температуре (110-115) ºС в течение 1 часа).
- Охладить питательную среду до температуры 40-50ºС.
- Подготовить РОЗ – 2,5 к загрузке питательной среды: он должен быть вымыт, обработан дезраствором и заполоснут стерильной водопроводной водой. Все краны и люк РОЗ должны быть закрыты, посевной штуцер (на люке) закрыт стерильной ватно-марлевой пробкой.
- Открыть на РОЗ кран посевного штуцера (со стерильной ватно-марлевой пробкой), кран подачи водопроводной воды и залить в РОЗ 1800л стерильной водопроводной воды с температурой 35 - 40ºС (объём воды замерять по водомеру).
- По окончании охлаждения концентрата питательной среды в ферментёрах поочередно подсоединить ферментеры с помощью стерильного шланга к РОЗ. Для этого один конец шланга закрепить на патрубке сливного штуцера ферментера, а другой – на патрубке сливной крестовины РОЗ.
- Открыть краны на сливном штуцере ферментера и краны подачи на насос на сливной крестовине РОЗ, краны на посевных штуцерах РОЗ и ферментера (со стерильной ватно-марлевой повязкой) также должны оставаться открытыми.
- Подключить РОЗ к электросети.
- На КИП шкафа управления РОЗ запрограммировать рабочую температуру 35 ºС.
- Включить насос и передать концентрат питательной среды из ферментеров в РОЗ – 2,5 при включенных мешалках ферментеров, после передачи концентрата заполоснуть ферментёры небольшим количеством стерильной воды и передать её в РОЗ (общий объем в РОЗ после посева должен быть 2500л).
- Включить мешалку РОЗ и тумблер автоматического регулирования температуры и перемешать питательную среду в течение не менее 30 минут.
- Замерить рН среды, рН должна быть в пределах (6,0-6,5). При необходимости довести рН до этого значения 10%-ным раствором NaOH.
- Вызвать лаборанта и совместно с ним отобрать в асептических условиях (над пламенем спиртовки или факела) пробу питательной среды в количестве 200 мл для определения рН, стерильности, кислотности и содержания сахара в питательной среде (при отсутствии лаборанта отобрать пробу самостоятельно).
- По заданию – загрузить в РОЗ через посевной штуцер в асептических условиях (над пламенем факела) аммиачный буфер в заданном количестве.
- При достижении температуры 35ºС отключить мешалку.
- По заданию подсоединить к штуцеру барботера баллон с углекислым газом, открыть кран на штуцере барботера, осторожно приоткрыть вентиль баллона и провести продувку питательной среды углекислым газом в течение 10-20 минут, контролируя подачу газа по давлению на манометре. Закрыть вентиль баллона, после выхода из РОЗ остаточного количества газа закрыть кран на штуцере барботера, кран посевного штуцера и отсоединить баллон.