Методы асептики, дезинфекции и стерилизации и их применение в условиях аптеки

Сушильный шкаф

(печь Пастера)

4. Стерилизация  паром под давлением в автоклаве

 

Наиболее надежный и часто применяемый способ. Он основан на нагревании материала  насыщенным водяным паром при  давлении выше атмосферного в специальных  приборах – стерилизаторах водопаровых, или автоклавах.

При этом способе погибают вегетативные клетки и споры микроорганизмов.

Данным  методом стерилизуют:

• стеклянные, металлические и фарфоровые предметы;
• перевязочные материалы;
• минеральные, растительные масла и жиры;
• растворы для инъекций, глазные капли, дистиллированную воду и воду для инъекций

Режимы стерилизации в автоклаве

 

1. Стеклянные, металлические и фарфоровые предметы – при 119 - 121°С (дополнительное давление 1 – 1,1 атм) 20 – 40 мин;
2. Перевязочные материалы (вата, марля, лигнин), лигатурный шелк, бельё, фильтровальную бумагу, корковые и резиновые пробки, пергамент, изделия из резины, целлюлозы, древесины – при 119 - 121°С 20 – 30 мин;
3. Минеральные, растительные масла, жиры – 119 - 121°С 120 мин в герметически закрытых сосудах;
4. Растворы для инъекций, глазные капли, дистиллированную воду и воду для инъекций – при 119 -121°С или 110°С (дополнительное давление 0,5 атм) 20 - 30 мин.

Автоклавы

Автоклавы

5. Стерилизация  текучим паром в аппарате Коха

 

Данный вид  стерилизации (при незавинченной  крышке и открытом выпускном кране  в автоклаве) основан на антибактериальном  действии пара в отношении вегетативных клеток. Он применяется в тех случаях, когда стерилизуемый материал изменяет свои свойства при температуре выше 100°С (питательные среды с витаминами, углеводами).

Для полного обеспложивания применяют принцип дробной стерилизации, т.е. стерилизуют материал при 100°С (или 80 - 90°С) в течение 20 – 30 мин 3 дня подряд.

При этом вегетативные клетки погибают, а  споры сохраняются  и за сутки  прорастают. Последующее двукратное прогревание обеспечивает достаточно надежную стерильность материала.

8. Стерилизация облучением

 

1. Лампы ультрафиолетового облучения используют для обеззараживания:
• воздуха лечебных учреждений и аптек,
• бактериологических боксов,
• лабораторий

На  качество обеззараживания влияют:

• Органические вещества
• Длина волны
• Вид обрабатываемого материала
• Температура
• Вид микроба (грибы и споры очень устойчивы)

Облучатели  могут быть закрытые и открытые. Первые используются в присутствии людей, а открытые – для быстрой стерилизации воздуха и поверхностей при отсутствии людей.

УФ  – лучи можно использовать для  стерилизации прозрачных растворов  термолабильных веществ (некоторых  белков, витаминов, антибиотиков), помещенных в сосуды из кварцевого стекла и  налитых тонким слоем. При этом сосуды необходимо периодически встряхивать, так как УФ – лучи обладают сравнительно малой проникающей способностью.

 

2) Лучевую стерилизацию для обеззараживания антибиотиков и гормонов, биологических тканей, изделий из пластмасс одноразового использования (например систем переливания крови, шприцев).

Основные  преимущества лучевой стерилизации:

• возможность обработки термолабильных материалов,
• стерилизация объектов в упаковочном виде,
• включение стерилизации в непрерывный производственный процесс.

При выборе дозы стерилизации необходимо руководствоваться двумя требованиями:

1. Облучение должно оказывать на микроорганизмы бактерицидное действие;
2. Стерилизация не должна изменять качества обрабатываемых объектов.

9. Стерилизация  фильтрованием

 

Данную стерилизацию проводят в тех случаях, когда  стерилизуемые объекты не выдерживают  нагревания. Ими могут быть растворы белков, сыворотки, некоторые витамины, летучие вещества.

Для фильтрации используют специальные фильтры, задерживающие  микробные клетки как механически, так и путём адсорбции клеток на фильтрующем материале.

Широко используют два типа фильтров:

• Мембранные фильтры
• Фильтры Зейтца

Мембранные фильтры  стерилизуют, поместив их в дистиллированную воду, автоклавированием или длительным кипячением. Держатель стерилизуют отдельно, автоклавируя. Прибор собирают в асептических условиях непосредственно перед работой.

Фильтры Зейтца автоклавируют в собранном виде, предварительно завернув в бумагу.

 

К химическим методам стерилизации относят:

1. Газовая стерилизация
2. Стерилизация растворами

Химическую стерилизацию применяют для обработки вакцин, сывороток и других биопрепаратов, консервируевых различными антисептиками (хлороформ, хинозол, мертиолат, фенол, трикрезол)

К физико–химическим методам стерилизации относят те методы, в которых физическое и химическое воздействие на микроорганизмы используется совместно.

Например, для  стерилизации некоторых растворов  лекарственных средств к ним  добавляют 0,5% фенола или 0,3% трикрезола, а также насыщенные растворы хлорбутанолгидрата с последующим нагреванием при 80°С 30 мин.

Инъекционные раствора и глазные  капли таким методом стерилизовать нельзя!

1. Газовая стерилизация

 

Данную стерилизацию применяют в герметических сосудах, например в автоклавах и специальных  контейнерах.

К стерилизационным газам относятся:

• Формальдегид
• Окись этилена
• Бромид метила
• Надуксусная кислота

Газом стерилизуют  изделия медицинской техники (аппарат  для искусственного кровообращения, катетеры, зонды, хирургические перчатки). После стерилизации газ удаляют  продуванием стерильного воздуха.

Для деконтаминации воздуха и поверхностей используют метод аэрозольной стерилизации. Применяют водные растворы перекиси водорода:

• 3% раствор рассчитан на уничтожение вегетативной флоры или ежедневной уборке производственных помещений,
• 6% раствор применяют при генеральной уборке.

Для стерилизации воздуха в боксах, операционных используют:

• Раствор, содержащий 3% перекиси водорода и 0,5% молочной кислоты;
• 3 - 6% перекиси водорода и 0,5% сульфонола.

Растворы  распыляют за 40 – 50 мин до работы, при этом обсеменённость воздуха  снижается в 30 – 40 раз.

2. Стерилизация  растворами

 

Для химической стерилизации растворами используют водорода пероксид и надкислоты (дезоксон-1); стерилизацию проводят в закрытых ёмкостях из стекла, пластмассы или ёмкостях, покрытых неповрежденной эмалью.

Эффективность данной стерилизации зависит от:

• концентрации активно действующего вещества,
• времени стерилизационной выдержки
• температуры стерилизующего раствора

В фармацевтической практике с целью обеспложивания растворов, находят применение следующие  вещества:

• Нипагин – метиловый эфир параоксибензойной кислоты. Применяется в концентрации о,25%, в которой его бактерицидность превышает таковую фенола в 2,6 раза.
• Нипазол – пропиловый эфир параоксибензойной кислоты. Ввиду малой растворимости в воде рекомендуется применять 0,07% раствор смеси 7 частей нипагина и 3 частей нипазола.
• Хлорбутанолгидрат (хлорэтон) – применяется в концентрации 0,5%
• Трикрезол – метилфенол. Обладает большей бактерицидностью, чем фенол, и при этом значительно меньшей ядовитостью. Применяется в концентраци до 0,3%.

Стерильность. Методы определения стерильности лекарственных  препаратов.

 

Все препараты, выпускаемые  для инъекций, должны быть стерильными. В соответствии с современными требованиями стерильными должны быть растворы для  инъекций, глазные капли, все лекарственные  формы для новорожденных.

Но нередко  стерильный препарат может содержать  продукты жизнедеятельности или  распада микробных клеток, которые  служат причиной его прирогенности.

Пирогены – это эндотоксины микроорганизмов, по химической структуре которые представляют из себя глюцидо-липидо-полипептидный комплекс. (Особенно их много у грам-отрицательных бактерий и грибов). Пирогены проходят через бактериальные фильтры, устойчивы к нагреванию и другим факторам окружающей среды, нередко освободить от них готовый продукт не удаётся.

 

 

Требования при  изготовлении инъекционных растворов:

 

• Растворы, изготовляемые для инъекций, перед  стерилизацией должны содержать не более 30 микробных клеток в 1 мл; время от момента их изготовления до стерилизации не должно превышать 1½ часа.
• Предназначенная для изготовления стерильных лекарственных форм дистиллированная вода до стерилизации не должна содержать кишечной палочки, а общее количество микроорганизмов не должно превышать 10 – 15 клеток на 1 мл.
• Глазные капли и лекарственные средства для новорожденных готовят так же, как и  растворы для инъекций в асептических условиях, и стерилизуют.

После стерилизации растворы для инъекций контролируют по физико-химическим показателям:

• внешний вид,
• величина pH,
• подлинность и количественное содержание действующих веществ

 

Контроль параметров и эффективности различных методов  стерилизации

 

1) Термических  методов. Осуществляют с помощью  контрольно-измерительных приборов, химических и биологических тестов.

В качестве химического  теста стерилизации используют вещества, изменяющие свой цвет или физическое состояние при определенных параметрах стерилизации.

Бактериологический  контроль осуществляют с помощью биотеста стерилизации. (Биотест стерилизации – объект из установленного материала, обсеменённый тест-микроорганизмами, предназначенный для контроля эффективности стерилизации определённым стерилизирующим средством.

2) Газовая  стерилизация. Осуществляют с помощью  контрольно-измерительных приборов, химических  и биологических тестов.

3) Стерилизация  растворами химических препаратов. Проводят химическим и физическим  методами, определяя содержание  активного действующего вещества  в исходном и рабочем растворах,  а также температуру рабочего  раствора.

4) Стерилизация  фильтрованием. Осуществляют прямым  посевом пробы фильтрата в  питательную среду.

Подготовка бокса  для испытания стерильности лекарственных  сред

 

1) Помещение бокса  моют горячей водой с мылом  и обрабатывают дезинфицирующими  растворами в следующей последовательности: