Микробиология – как наука, ее цели и задач

проведение первичного посева на питательные среды для  выделения возбудителя и получения  чистой культуры

-дифференциацию и  идентификацию выделенных культур

-определение чувствительности  их к антибактериальным препаратам

-забор проб клинического материала и транспортировку его в лабораторию

результаты многих диагностических  исследований при заболеваниях, этиология  которых связана с жизнедеятельностью бактерий, в значительной степени  зависят от вида патологического  материала, времени и способа его взятия.

основные правила взятия любого материала на исследование:

Материал собирают в  количестве, достаточном для тщательного  исследования

-Материал должен соответствовать  характеру инфекционного процесса (учитывают особенности инфекционного  процесса, место максимальной локализации возбудителя и пути его выделения в окружающую среду)

-При заборе материала  использовать только стерильные  инструменты и посуду, соблюдая  правила асептики для предупреждения  загрязнения

Собранный материал доставляют в лабораторию в максимально сжатые сроки (1-2 часа). При невозможности доставки в указанные сроки весь биоматериал хранят в холодильнике, кроме крови и материала, исследуемого на наличие менингококка, которые необходимо хранить при температуре 35-37оС. Если имеются централизованные лаборатории , обслуживающие большие регионы, целесообразно пользоваться транспортными средами (Стюарта, Амиеса и пр.)

-материал для исследования  по возможности собирают до  начала антибактериальной терапии

-микроорганизмы чувствительны  к факторам окружающей среды, в связи с эти надо обращаться с собранным материалом, так, чтобы максимально сохранить жизнеспособность возбудителей.

При направлении на исследование обязательно писать сопроводительный лист, в котором указываются Ф.И.О., возраст, отделение, предварительный диагноз, вид материала, дата и время взятия материала.

Наиболее правильный способ взятияжидких материалов - объемно  с помощью стерильного шприца. Отбор тампоном производят только при  невозможности осуществления объемного  метода (отделяемое женских половых органов, ушей, глаз и т.д )

-При аспирации закрытых  полостей кожу в месте прокола  дезинфицируют антисептиками в  течении 1-2 мин. 

-Свищи и фистулы  первоначально очищают от отделяемого  и забор материал производят  из глубины.

-Жидкий материал из открытых ран при хирургических вмешательствах отбирают объемно шприцем

-Отделяемое из дренажей  также берут шприцем и используют  концы удаленных дренажных трубок. 

-Биоптаты из ран  получают путем иссечения участка  ткани из глубоких слоев раны и производят забор отделяемого тампоном после тщательной обработки раны физ.раствором и 70 градусным этиловым спиртом для удаления поверхностно вегетирующей микрофлоры, а также антисептических и антибактериальных препаратов.

Вирусы - это форма  жизни, которые относятся к царству Vira. Целый ряд признаков отличает вирусы от прокариотов и эукариотов. Известно три типа взаимодействия вирусов с клетками хозяина.     

Вирусы существуют в 2-х  формах - внеклеточной - вирион и внутриклеточной - вирус. Для вируса характерно:

1. Наличие только 1 типа  нуклеиновой кислоты (ДНК или  РНК);

2. Отсутствие клеточного  строения и белоксинтезирующих  систем

3. Возможность интеграции  в клеточный геном

Внутриклеточный вирус  есть самореплицирующая форма, не способная  к бинарному делению. Для вируса характерен дизъюнктивный (разобщенный) способ размножения (репродукция). Вирусы относятся к царству Vira, которое разделено по типу нуклеиновой кислоты на 2 подцарства - РНК-содержащие и ДНК-содержащие вирусы. Принадлежность вирусов к определенным семействам определяется типом нуклеиновой кислоты, структурой, фрагментацией генома или целостностью, наличием или отсутствием внешней оболочки.

РНК-содержащие (11 семейств): пикорнавирусы,

калицивирусы, реовирусы, ретровирусы, тогавирусы, флавивирусы, буньявирусы, ареновирусы, рабдовирусы, парамиксовирусы, ортомиксовирусы

ДНК-содержащие (7 семейств): аденовирусы, паповирусы,

парвовирусы, герпесвирусы, гепаднавирусы, поксвирусы.

    Размеры вирионов  различных вирусов колеблется  от 15 до 400

нм, имеют различную  форму: палочковидную, нитевидную, сферическую, сперматозоидную. 

     Структура  простого вириона состоит из  нуклеокапсида (нуклеопротеида), в  состав которого входит вирусный  геном (нуклеиновая кислота),  защищенный белковой оболочкой - капсидом (ДНК или РНК и белки). Капсид состоит из капсомеров и определяет форму вириона.

     Вирионы  со сложным капсидом   покрыты      внешней  оболочкой - суперкапсидом,  в составе которого содержатся  липиды и полисахариды. липидный  и углеводный состав вириона определяется клеткой хозяина. Липиды стабилизируют структуру сложных вирионов.

Вирусные заболевания  в сумме превышают заболеваемость, вызванную другими возбудителями. Социальная значимость и огромный ущерб, наносимый здоровью населения и  экономике, выводят грипп на первое по значимости место среди патологий человека инфекционной природы.

Вирусы- возбудители респираторных  инфекций обладают тропизмом к клеткам  дыхательных путей. Могут вызвать  похожую клиническую картину, и  для их распознавания необходима вирусологическая лабораторная диагностика.

Взаимодействие вируса с клеткой хозяина:

1.адсорбция на клетке (играет роль тканевая специфичность)

2. проникновение вируса  в клетку и его «раздевание»

3. синтез компонентов  (образование вируспецифических белков в цитоплазме)

4. полная сборка вириона

5. выход вирусных частиц  из клетки

В результате взаимодействия развивается либо:

1. Продуктивная инфекция
2. Абортивная инфекция
3. Интегративная инфекция

Методы культивирования  вирусов:

1. На куриных эмбрионах
2. В культурах клеток и тканей
3. Заражение восприимчивых животных

Различают ДНК и РНК- содержащие вирусы.

Источник инфекции (зависит  от заболевания):

- больные и вирусоносители

- животные

Пути передачи (зависит  от заболевания):

- воздушно-капельный

- фекально-оральный

- половой

- вертикальный

- парентеральный

- контактный

- трансмиссивный

Лабораторная диагностика (зависит от заболевания):

- вирусоскопический метод  (ЦПД)

- РИФ

- вирусологический метод  (куриный эмбрион, первичные и  перевиваемые КК HeLA, Hep-2)

- биологический метод

- серологический метод  (РСК, РН, РТГА)

- молекулярно-биологический  (ПЦР, ДНК-зонды)

Профилактика (зависит  от заболевания):

- живые вакцины

- убитые вакцины

- лейкоцитарный интерферон

 

Тема №5 «Общие принципы микробиологической диагностики паразитарных заболеваний и микозов. Постановка этиологического диагноза»

Цель: Основной целью является формирование у студентов знаний о заболеваниях, вызванных грибами, их значении в развитии современной патологии, принципах их диагностики.

Тезисы лекции:

Микозы  разнообразны как по биологическим особенностям их возбудителей, так и по патогенезу и клинике самой болезни. Они широко распространены среди людей в связи с урбанизацией, широким нерациональным применением антибиотиков, иммунодефицитами. Заболевания, вызываемые патогенными грибами, называются микозами. До сих пор отсутствует единая классификация микозов и их возбудителей, что затрудняет изучение и борьбу с ними.

Грибы – это  эукариоты, клетки их имеют разнообразную форму  и размеры. Клетки грибов (гифы) образуют мицелий – вегетативное тело гриба. Различают воздушный (находится над поверхностью питательной среды) и субстратный мицелий.

Размножение грибов – половое и  бесполое. Культивирование грибов осуществляют в аэробных условиях при температуре 28-33⁰С. Среды – Сабуро, Чапека, сусло-агар.

     Грибковые инфекции  человека делятся на 3 группы:

Поверхностные;

Подкожные;

Глубокие.

К поверхностным микозам относятся: трихофития, микроспория, эпидермофития. К подкожным – споротрихоз, хромомикоз, мицетома. К глубоким – кокцидиоз, гистоплазмоз, бластомикоз, криптококкоз.

Характеристика:

-местные, диссеминированные, острые, подострые, хронические формы;

-развивается ГЧЗТ;

-интоксикация;

-поражение кожи и подкожной  клетчатки;

-поражение внутренних органов;

-обнаруживается высокий титр АТ.

Лабораторная диагностика:

Клиническая картина микозов весьма полиморфна, поэтому во всех случаях  диагноз должен быть подтвержден  лабораторными методами исследования, успех которых во многом зависит  от правильного взятия материала.

Со слизистых оболочек- ватным тампоном, ложкой Фолькмана.

Основные принципы диагностики:

1. Микроскопия:

- экспересс – метод

- по Граму

- с едким калием

- с нитрозином или тушью

- по Романовскому-Гимзе

- по Гомори

- по Гридли

- по Мак Манусу

- РИФ

- «раздавленная капля»

2. Выделение возбудителя (от нескольких дней до нескольких недель)

- на неселективных средах

- на селективных средах

- латекс-агглютинация

- аллергические пробы

- определение НК

Лечение:

- полиеновые антибиотики

- азолы

- аллиламины

- морфолины

 

Медицинская паразитология - раздел зоологии, изучающий паразитов человека и животных.

Медицинскую паразитологию можно  разделить на: 1. протозоологию - изучает  паразитических простейших; 2. гельминтологию - изучает паразитических червей; 3. арахноэнтомологию - изучает членистоногих, имеющих медицинское значение.

Простейшие - это одноклеточные  животные, размножающиеся в организме  хозяина. Клетка - эукариотическая. Протозойные  заболевания - группа антропонозных  и зоонозных заболеваний, вызываемых патогенными простейшими.

 По законам систематики живых  организмов простейшие относятся  к следующим высшим таксонам:

Домен (империя): Eucarya

Царство: Animalia

Подцарство: Protozoa

А далее следуют: отделы, классы, порядки, семейства, роды, виды, подвиды.

Простейшие являются одноклеточными эукариотическими  микроорганизмами, которые по структуре своих клеток очень близки к животным клеткам. Клетка простейших снаружи покрыта эластической мембраной – пелликулой (или более плотным слоем кутикулой). Некоторые из них снабжены опорными фибриллами и минеральным скелетом. Часть простейших имеют постоянную форму вегетативного тельца (например, жгутиковые, реснитчатые); другие – непостоянную форму (например, саркодовые). Многие простейшие совершают активные движения с помощью постоянных (жгутики, реснички) или временных (корненожки) органов движения.

Большинство простейших гетеротрофы  и питательные вещества  поступают  в клетку путем фагоцитоза и пиноцитоза. Переваренные вещества поступают в  цитоплазму, а непереваренные остатки  выбрасываются из клетки в любой части тела или через особое отверстие – порошицу.

Многие простейшие в неблагоприятных  условиях образуют цисту. При инцистировании клетка сжимается, округляется,  отбрасывает  или втягивает вовнутрь органы.

Гельминтозы – группа антропонозных и зоонозных болезней, вызываемых паразитическими червями – гельминтами (греч. Helmins, helminthos – паразитические черви).

Гельминты – низшие многоклеточные организмы относятся к надтипу Scolecida.  В организме человека паразитирует два типа сколецид – плоские черви (Plathelminthes) и круглые черви (Nemathelminthes) - таблица 2.

Различают 2 класса плоских червей - Trematoda (трематоды или сосальщики); Cestoda (цестоды или ленточные черви - лентецы)  и один класс круглых  червей – Nematodа. Каждый из классов содержит значительное число родов и видов.

Соответственно латинским названиям  гельминтов названы вызываемые ими  заболевания (глистные инвазии, гельминтозы) – аскаридоз, анкилостомоз, тениоз, энтеробиоз, трихинеллез, эхинококкоз  и т.д.

Гельминты проходят ряд последовательных стадий жизненного цикла. Половозрелые формы (имаго) паразитируют  в организме окончательного хозяина, а незрелые формы (яица, личинки) развиваются или в окружающей среде (геогельминты), или паразитируют в промежуточном хозяине (биогельминты). Человек может быть как окончательным, так и промежуточным хозяином.  Человек может быть инвазирован одновременно несколькими видами гельминтов.

В основе классификации  простейших лежит способ передвижения:

1.саркодовые

2.жгутиконосцы

3.реснитчатые

4.споровики

Вызываемые заболевания:

Амебиаз кишечный и внекишечный, некротические поражения кожи, роговицы, менингоэнцефалит,  лейшманиоз (кожный, кожно-слизистый, висцеральный), трипаносомоз, трихомониаз, лямблиоз, малярия, токсоплазмоз, микроспоридиоз и др.

Пути передачи (зависит  от вида возбудителя)

1.трансмиссивный

2.парентеральный

3.трансплацентарно

4.половой

5.фекально-оральный

Лабораторная диагностика:

Исследуемый материал (зависит  от клиники заболевания):

Кровь, костный мозг, ликвор, биптаты  тканей

Методы (зависят от вида возбудителя  и клиники заболевания):

1. Микроскопия (по Граму, Романовскому-Гимзе, р-ом Люголя, смесью Сафаралиева, «раздавленная капля»)
2. Культивирование (среда Рейса, Павловой, Джонсона-Трассела, печеночная среда с цистеином)
3. Серологический (РИА, ИФА, РИФ, РСК, РПГА)
4. Анализ НК
5. Биологический
6. Аллергический