Рацион должен состоять из минимального
количества продуктов.
Лекарственная терапия должна
соответствовать тяжести заболевания.
2. Собственная
работа
2.1. Материалы и методы
исследования
Научно-исследовательская работа
выполнена за период прохождения производственной
практики в условиях ветеринарной клиники
«Ваш ветеринар», расположенной в городе
Новокузнецке.
Изучив документацию за последние
3 года, я проанализировала данные о состоянии
здоровья животных, поступавших в клинику
«Ваш ветеринар» в данный период, и сделала
следующие выводы: большинство животных
наблюдалось в клинике с болезнями желудочно-кишечного
тракта, что составило 68 %. В 57% случаев
это был гастроэнтерит и гепатопатия
алиментарного характера.
Для проведения исследований
было сформировано две группы животных
по 5 голов, поступивших в клинику на начальных
стадиях острого гастроэнтерита и на стадии
длительного течения заболевания. Диагноз
у опытных животных ставился на основании:
анамнестических данных (неправильное
кормление, возможность отравления);
клинических признаков (угнетённое
состояние, анорексия, рвота, жидкие каловые массы, анемичность видимых слизистых
оболочек и конъюнктивы, снижение тургора кожи);
результатов общего и биохимического
анализов крови.
У заболевших животных производился
забор венозной крови для следующих исследований:
содержание гемоглобина, количество эритроцитов
и лейкоцитов, СОЭ; определение общего
белка, активности аспартатаминотрансферазы
(АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ),
и содержание гемоглобина, по нижеприведённым
методикам. Данные тесты выбраны как показывающие
функциональное состояние печени.
Мазок периферической крови
для характеристики лейкоцитарной формулы.
Повторный забор крови на общий
анализ производился через 5 дней после
начала лечения. Повторный биохимический
анализ крови рекомендован через 30 дней
после курса гепатопротекторов.
Определение
общего белка сыворотки крови, активности
аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы
(АлАТ) проводились с помощью биохимического анализатора StatFax 3300.
Для определения
гемоглобина крови в специальную пипетку
набирается кровь до отметки (20 мм/куб),
опускают её в пробирку с делением гемоглобинометра
Сали, в которую предварительно наливают
раствор соляной кислоты до деления 10.
Пробирку со смесью крови и соляной кислоты
слегка смешивают и оставляют на пять
минут. К смеси крови с соляной кислотой
после 5-ти минутного её состояния пипеткой
добавляют по каплям дистиллированную
воду; после каждого добавления воды смесь
разменивают до тех пор, пока цвет крови
сравняется с цветом стандарта. Уровень
гемоглобина определяет цифра деления
на пробирке, до которой добавляется вода,
пока не получится одинаковая окраска
исследуемой жидкости и стандарта.
Определение
количества эритроцитов и лейкоцитов
Оборудование
и реактивы:
1. смесители (меланжеры)
или пробирки для подсчета
эритроцитов и лейкоци тов.
2. 3% - раствор NaCl (для
разведения эритроцитов) или жидкость
Гайема.
3. 3% раствор уксусной
кислоты.
4. Счетная камера.
Смесители представляют
собой капиллярную пипетку с расширением-
ампулой, содержащей бусинку, способствующую
смешению крови с разводящей жидкостью.
Смесители, предназначенные для подсчета
эритроцитов, обладают капилляром более
тонкого калибра и более объемистой ампулой
на них нанесены метки одна - 0,5 другая
- перед входом в ампулу - 1.0, третья - у выхода
из ампулы - 101.
При набирании крови
до метки 0,5 она окажется разведенной в
200 раз, при набирании до 1,0 - в 100 раз. Для
разведения эритроцитов применяют 3% раствор
поваренной соли или жидкость Гайема,
в которой лучше сохраняется форма эритроцитов.
Смеситель для лейкоцитов имеет более
широкий просвет капилляра и меньшую по
величине ампулу. Нанесены три метки: 0,5
, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в
10, либо в 20 раз (чаще разводят в 20 Раз).
Для разведения лейкоцитов используют
3 - 50% раствор уксусной кислоты. Уксусная
кислота растворяет эритроциты, что позволяет
вести подсчет только лейкоцитов.
Счетная
камера. Для подсчета форменных
элементов наиболее часто применяется
камера типа Бюркера с выгравированной
на ней сеткой Горяева. Счетная камера
состоит из толстого предметного стекла
с особым углублением. На дне углубления
счетной камеры выгравирована сетка, в
клетках которой и подсчитываются форменные
элементы. По краям углубления имеются
возвышения, куда накладывается покровное
стекло.
Между нижней поверхностью
этого стекла и дном углубления образуется
замкнутое пространство, которое и представляет
собой счетную камеру. Глубина камеры
соответствует 0,1 мм. Счетная камера типа
Бюркера разделена пополам глубокой канавкой
и имеет на каждой половине сетку Горяева,
что позволяет сразу считать 2 капли, не
заполняя вновь камеры. Сетка Горяева
имеет 225 больших квадратов (15Х15), 25 из которых
разделены на малые, по 16 в каждом; имеются
также пустые квадраты, собранные в группы
по 4 квадрата. Всего в сетке 100 больших
пустых квадратов, собранных в 25 групп
(5X5). Каждая сторона маленького квадратика
равна 1/20 мм, а так как высота камеры составляет
0,10 мм, то объем равен 1/4000 ммЗ.
Ход исследования:
Для подсчета эритроцитов
берут смеситель для эритроцитов, надевают
резиновую трубочку, легким насасыванием
набирают кровь из укола до метки 0,5. Избыток
крови удаляют фильтровальной бумагой,
после чего кончик смесителя погружают
в приготовленный заранее флакон с 3% раствором
поваренной соли или раствором Гайема
и насасывают раствор, заполняя всю ампулу
до метки 101. Тотчас снимают резиновую
трубку, зажимают смеситель по длине между
большим и указательным или средним пальцем
и встряхивают в течение 3 минут. После
этого заполняют счетную камеру, сливают1-2
капли и выпускают последующую каплю на
сетку.
Для подсчета лейкоцитов
кровь из места укола набирают до метки
0,5, затем разводят 3% раствором уксусной
кислоты до метки 11. Энергично встряхивают
в течение 3 минут, после чего сливают
1-2 капли и заполняют
счетную камеру. При работе с пробирками
для подсчета эритроцитов,
наливают 4 мл 3% раствора поваренной соли
или жидкости Гайема и в нее выпускают
0,02 мл.крови,
отмеренной пипеткой
от гемометра Сали. Для подсчета белых
кровяных элементов в пробирку наливают
0,4 мл 3 - 5% раствора
уксусной кислоты и
0,02 мл крови. Энергично встряхивают пробирки,
затем в жидкость опускают пипетку из
гемометра Сали и,
набрав содержимое,
заполняют счетную камеру.
Заполнение
счетных камер:
Хорошо вымытое и вытертое
шлифованное покровное стекло накладывают
на выступающие боковые края. Мякотью
больших пальцев покровное стекло притирают,
двигая вверх и вниз, все время плотно
прижимая, пока не появятся, так называемые,
Ньютоновы кольца. Перед заполнением камеры
вновь энергично встряхивают смесители.выпускают
2 капли на фильтровальную бумагу, а третьей
заполняют щелку между камерой и покровным
стеклом. Жидкость по капиллярности засасывается
между ними и заполняет пространство над
сеткой. Жидкость при заполнении камеры
не должна затекать в желобки, если это
стучится, то ее удаляют фильтровальной
бумагой.
Подсчет эритроцитов.
Подсчет производят спустя 1-2 минуты (когда
эритроциты осядут на дно камеры), пользуясь
объективом 40Х и окуляром 7X, либо объективом
8Х и окуляром 15Х.
Чтобы не сбиться со
счета, придерживаются определенной
последовательности
счета: передвигая из квадрата в квадрат
по
горизонтали один ряд
слева направо, следующий - справа налево.
Считают, помимо находящихся внутри квадрата,
все эритроциты, лежащие на двух линиях,
например, на левой и верхней, и пропускают
все лежащие справа и снизу. Считать эритроциты
надо в 5 больших квадратах, т. е. в 80 маленьких.
Чтобы избежать неточности,
вследствие не вполне равномерного распределения
крови в камере, выбирают для подсчета
не 5 рядом лежащих квадратов, а продвигаются
по всей сетке.
Количество эритроцитов
в 1 ммЗ (искомое)
вычисляют следующим образом: единицей
счета всегда, при всяком подсчете, в любой
сетке служит малый квадрат. Объем его,
как было указано, равен 1/4000 мм3. Сосчитав
эритроциты в 5 больших квадратах (80 малых
квадратов), делят это количество на 80
и умножают на 200 (степень разведения крови)
и на 4000 (чтобы получить количествоклеток
во всем кубическом миллиметре);практически,
следовательно, полученное число умножают
на 10000 (прибавляют четыре нуля).
Подсчет лейкоцитов.
Для получения достаточно точного результата
при подсчете лейкоцитов необходимо сосчитать
не менее 100 больших квадратов (=1600 малых).
Количество лейкоцитов в 1 мм3 получается
следующим образом: число, сосчитанное
в3100 больших квадратах, делят на 1600 (приводят
к 1 малому квадрату) и умножают на 20 (степень
разведения) и на 4000; практически, сокращая
постоянные цифры формулы, количество
сосчитанных лейкоцитов (при разведении
в 20 раз) умножают на 50.
Определение скорости
оседания эритроцитов (СОЭ) – неспецифический лабораторный
показатель крови, отражающий соотношение
фракций белков плазмы; изменение СОЭ
может служить косвенным признаком текущего
воспалительного или иного патологического
процесса. Проба основывается на способности
эритроцитов в лишенной возможности свёртывания
крови оседать под действием гравитации.
В норме величина СОЭ у собак не превышает
2–5 мм/час, а у кошек – 6–10 мм/час.
Принцип метода заключается в следующем.
Удельная масса эритроцитов превышает
удельную массу плазмы, поэтому они медленно
оседают на дно пробирки. Скорость, с которой
происходит оседание эритроцитов, в основном
определяется степенью их агрегации, то
есть их способностью слипаться вместе.
Из-за того, что при образовании агрегатов
уменьшается отношение площади поверхности
частиц к их объёму, сопротивление агрегатов
эритроцитов трению оказывается меньше,
чем суммарное сопротивление отдельных
эритроцитов, поэтому скорость их оседания
увеличивается. Агрегация эритроцитов
главным образом зависит от их электрических
свойств и белкового состава плазмы крови.
В норме эритроциты несут отрицательный
заряд и отталкиваются друг от друга. Степень
агрегации (а значит и СОЭ) повышается
при увеличении концентрации в плазме
так называемых белков острой фазы – маркеров
воспалительного процесса. В первую очередь
– фибриногена, C-реактивного белка, церулоплазмина,
иммуноглобулинов и других. Напротив,
СОЭ снижается при увеличении концентрации
альбуминов.
Определение СОЭ проводят методом Панченкова
(в капилляре). В методе Панченкова в качестве
антикоагулянта используют цитрат натрия.
В капилляр набирают 2,5 мкл цитрата и в
тот же капилляр добирают 7,5 мкл крови
или в заранее раскапаные пробирки с цитратом
добавляют 7,5 мкл крови, кровь с цитратом
перемешивают в пробирке, снова набирают
в капилляр и устанавливают в специальный
штатив на 1 час. По методу Вестергрена
(в пробирке).
В градуированный на 100 делений капилляр
Панченкова набирают до метки «Р» 5%-ый
раствор цитрата натрия и переносят его
на часовое стекло. Затем в тот же капилляр
набирают дважды кровь до метки «К» и оба
раза выдувают её на часовое стекло. Кровь,
тщательно перемешанную с цитратом натрия,
вновь набирают в капилляр до метки «К».
Капилляр ставят в штатив строго вертикально.
СОЭ учитывают через 1 час, при необходимости
через 24 часа и выражают в миллиметрах.
Более ста лет данный лабораторный тест
применяется для количественного определения
интенсивности разнообразных воспалительных
процессов. Так, чаще всего увеличение
СОЭ связано с воспалительными процессами,
отравлениями, инфекциями, инвазиями,
опухолями, гемобластозами, кровопотерей,
травмами, оперативными вмешательствами.
Хотя воспаление и является наиболее
частой причиной ускорения оседания эритроцитов,
увеличение СОЭ также может обусловливаться
и другими, в том числе и не всегда патологическими,
состояниями [9].
Несмотря на свою неспецифичность определение
СОЭ все еще является одним из наиболее
популярных лабораторных тестов для установления
факта и интенсивности воспалительного
процесса.
Эластичность, или
упругость, тургор кожи зависит от содержания
в ней жидкости — крови в сосудах, лимфы
в межтканевых щелях, а также от степени
развития подкожной клетчатки и тонуса
нервной системы. При дегидратации организма,
истощении, недостаточном кровообращении
упругость кожи уменьшается.
Эластичность кожи проверяют
так: кожу собирают в складку двумя пальцами
в области холки. У здоровых животных кожная
складка быстро расправляется. Задержка
этого процесса до 10... 15 с и более указывает
на понижение или потерю эластичности.
Эластичность кожи понижается
при профузном поносе, полиурии, рвоте,
кровопотерях и коллапсе. По мере улучшения
состояния животного эластичность кожи
восстанавливается.
- Анализ
результатов исследования
У собак первой группы,
т.е. поступивших в клинику в течение первых
суток от начала заболевания, наблюдались
следующие клинические признаки: многократная
рвота через 1-2 часа после приема пищи,
аппетит сохранен, жидкие каловые массы
кашицеобразной консистенции с примесью
слизи, температура тела в пределах физиологической
нормы (от 37,8 до 39,3), активность животных
и тургор кожи не снижены. После опроса
владельцев чаще всего выясняется, что
животное накормили свининой или колбасой
(любая еда со стола) или резко решили изменить
тип рациона животного (фабричное кормление
на натуральное или наоборот).
В сыворотке крови
наблюдалось повышение печеночных ферментов:
АЛТ и АСТ. Общий анализ крови: увеличение
скорости оседания эритроцитов, лейкоцитоз,
нейтрофилия, лимфопения.
У собак второй группы
(заболевание длится несколько дней, самостоятельное
лечение положительного эффекта не принесло)
наблюдается отсутствие аппетита, рвотные
позывы, стул водянистый, сильное истощение,
слабость, бледность видимых слизистых
оболочек, значительное снижение тургора
кожи, температура тела ниже физиологической
нормы (от 35,8 до 37,5).
В сыворотке крови
наблюдалось значительное повышение печеночных
ферментов: АЛТ и АСТ, снижение содержания
общего белка. Общий анализ крови: увеличение
скорости оседания эритроцитов, лейкопения.
Животные первой группы лечились
по стандартной схеме, в которую входили
следующие лекарственные препараты: