Культивирование вирусов в куриных эмбрионах. Вирус инфекционного гепатита собак

Таким образом, в ответ на действия вируса Ad can-1 и развитие патологических реакций система иммунитета начинает продуцировать антитела, которые подавляют жизнедеятельность вируса. Параллельно нарастают реакции клеточного иммунитета, а в ответ на разрушение вирусом клеток иммунной системы, активизируется продукция новых лейкоцитов. Переболевшие животные приобретают, как правило, пожизненный иммунитет.

6. Клинические признаки

По данным литературы 30-40 летней давности, заболевания инфекционным гепатитом чаще протекает в острой форме, в результате чего через 24 часа или через 3-5 дней животное погибает. В настоящее время, видимо в связи с массовыми вакцинациями и повышением устойчивости собак к этому возбудителю, столь высоковирулентные штаммы вирусов встречаются очень период ремиссий, отмечают редко. На современном этапе чаще отмечают более хроническое течение болезни, гибель собак от которой весьма незначительна.

Считается, что  первые клинические признаки болезни  в естественных условиях появляются на 3-10-й день после инфицирования. Животное становится вялым, апатичным, отказывается от корма. Позднее появляются рвота (часто с желчью) и понос (диарея).

Для раннего  периода характерно развитие тонзиллитов (ворота инфекции) и фарингитов. При  значительной патологии могут развиваться  небольшие серозные или гнойные  истечения из носа и глаз.

При остром течении  болезни, особенно соответствующие симптомы лихорадки:

* подъем температуры  (иногда до 41С)

* одышка и  учащённое дыхание

* расстройство  сердечно-сосудистой системы - тахикардия, иногда даже с ослаблением наполнения пульса и аритмией

Наиболее характерные нарушения отмечают со стороны желудочно-кишечного тракта и печени. Как правило, на ранних стадиях печень увеличена и очень болезненна. Увеличение органа отмечают и рентгенографически. Пальпация в области правого подреберья обычно вызывает беспокойство животного. Вследствие нарушения функций этого органа усилено проникновение желчных пигментов (билирубина) в кровь, в результате чего слизистые оболочки рта и глаз могут приобретать желтушный оттенок, а выделяемая моча становится темно-бурой. (Явления желтушности связаны также и с усиленным разрушением эритроцитов при геморрагических экссудациях).

Из-за нарушения  синтеза в печени альбумина у  животных в некоторых случаях  могут развиваться гипопротеинемические отеки в области подгрудка  и брюшной целости (асцит). Развитие асцита связывают также и с нарушением кровотока в системе воротной вены.

При острой печеночной недостаточности может развиться  ацидоз. В результате нарушения обмена метионина происходит образование  и усиленное выделение через  легкие метилмеркаптана. Вследствие этого при дыхании животного иногда может ощущаться специфический сладковато-зловонный залах этого продукта.

При сильных  болях в области печени животное принимает неестественную сидячую  позу с широко расставленными передними лапами.

Картина крови  при остром течении (или ремиссии) характеризуется выраженной лейкопенией. В крови исчезают эозинофилы, а  у нейтрофилов наблюдается сдвиг  ядра влево (т.е. появление юных, менее  совершенных и активных клеток). Увеличивается количество моноцитов. По данным некоторых авторов, ускоряется СОЭ (скорость оседания эритроцитов) до 20-30 мм. Снижается резистентность эритроцитарных мембран. В сыворотке крови обнаруживают повышение уроки билирубина и трансаминаз.

В период выздоровления, наоборот, как уже отмечалось, наблюдается увеличение количества лейкоцитов (до 30-35 тыс.) и в том числе эозинофилов (до нормы). При этом температура падает и снижается токсикоз.

Характерным клиническим  симптомом при инфекционном гепатите собак служит появление одностороннего или двухстороннего кератита на глазах, называемого в иностранной литературе "blue eye" (голубой глаз) [7]. Симптом появляется, как правило, при выздоровлении и в определенной степени может свидетельствовать о благоприятном течении болезни. Считается, что в основе механизма его появления могут лежать процессы адсорбции иммунных комплексов (вирус-антитело) на эндотелии сосудов глаза. В результате развивается поверхностное воспаление роговицы глаза, из-за чего её поверхность становится шероховатой с бело-голубоватым оттенком. Помутнение роговицы возникает очень быстро (иногда в течение нескольких часов). Причем так же быстро может и исчезнуть.

При инфекционном гепатите у собак могут развиваться  нервные явления, напоминающие симптомы при чуме. Возникают они в результате сосудистых патологий (отеков и геморрагий) в области оболочек спинного и головного мозга. Появляются нарушения координации движения, судороги, параличи и парезы. Нервные явления при этой болезни протекают гораздо легче, чем при чуме, и могут быстро проходить без последствий.

При более хроническом  течении отмечают нарушение пищеварительных  функций, а постоянные диареи и рвота  приводят к истощению и обезвоживанию  организма. Это, в свою очередь, влечет за собой нарушение электролитного обмена (гипокалиемию и гипонатриемию). Животное сильно худеет, слабеет, с трудом поднимается. При резких движениях иногда стонет. Погибают собаки, как правило, находясь в состоянии комы и не реагируя на внешние раздражители.

Хроническое течение  болезни может продолжаться от нескольких недель до 2-3 месяцев. При этом болезнь приобретает ремитирующий характер, и вслед за периодом кажущегося выздоровления начинается новая ремиссия болезни. Беременные самки при хроническом течении инфекционного гепатита не могут вынашивать потомства и либо абортируют, либо рождают нежизнеспособных щенят.

Таким образом, характерными клиническими признаками для этой болезни являются нарушения  функций желудочно-кишечного тракта и особенно печени, со всеми вытекающими  отсюда симптомами, лейкопения, иногда лихорадка и ряд других симптомов, связанных с множественными воспалительными реакциями в различных органах.

7. Диагностика

В практических условиях наиболее часто прижизненный диагноз этой болезни ставят на основании  клинических признаков и серологических тестов.

С целью обнаружения  противовирусных антител в сыворотке  крови больных инфекционным гепатитом  собак разработаны реакции диффузной  преципитации (РДП) в агаровом геле, иммуноферментный (EUSA), радиоиммунный  и другие тесты. Тем не менее они не всегда решают проблемы диагностики на ранних этапах болезни и не могут давать дифференциальных результатов, если заболевшее животное раньше уже подвергалось вакцинации и имеет антитела, индуцированные введением вакцины.

Более перспективно обнаружение непосредственно вирусного антигена. Описано использование для этой цели реакции иммунофлуоресценции и иммуноферментного метода. Принципиально возможно использование и других иммунологических тестов на обнаружение антигена. Тем не менее, для практического использования тесты эти должны быть высокочувствительными, относительно простыми и недорогими. Поэтому широкого применения эти методы пока не нашли. В отдельных случаях для диагностики могут быть использованы эпизоотические данные.

8. Лечение

В настоящее  время этиотропное лечение инфекционного гепатита отсутствует. Соблюдают строгую диету. Больным собакам рекомендуют нежирные корма: молочные супы или каши с добавлением небольшого количества свежего мяса. Для симптоматической терапии назначают витамины группы В (В|, Вг, В12)- Витамин В12 в организме больного животного снижает жировую инфильтрацию и способствует повышению функциональной способности печени. Его рекомендуется животным вводить внутримышечно в течение 4-5 дней, взрослым собакам - по 400-500 мкг, молодым - по 250- 300 мкг. Одновременно в течение 10-15 дней следует давать с кормами фолиевую (0,05-0,06 мг/кг массы животного) и аскорбиновую (0,5 г) кислоты. Аскорбиновая кислота способствует гликогенизации печени, повышает ее антитоксическую функцию, усиливает регенерацию печеночных клеток. Высокий лечебный эффект при инфекционном гепатите собак дает си-репар. Этот препарат обладает липотропным действием, и резко улучшает печеночное кровоснабжение. Сирепар инъецируют внутримышечно в дозе 1-1,5 мл в течение 10 дней. Для уменьшения интоксикации вводят внутривенно раствор глюкозы (40%-ный) по 10-30 мл 1-2 раза в день, а также гексаметилентетрамин (40%-ный) -3-5 мл, хлористый кальций (10%-ный)-5-10 мл. Кроме вышеуказанных препаратов при инфекционном гепатите собак назначают поливитаминные препараты (тривит, тетравит, пушновит, ундевит, декамевит), белковые гидролизаты (гидролизин, аминопептид), гамма-глобулин и др. При смешанных и секундарных инфекциях назначают антибактериальное и специальное лечение.

• Введение гипериммунных сывороток (Гискан, Витакан и др.) в лечебной дозе 3 раза с интервалом 24 часа;
• Введение антигистаминных препаратов (димедрол, супрастин и др.) для профилактики аллергических реакций;
• Внутривенное введение солевых растворов с рибоксином и раствора 5% глюкозы с аскорбиновой кислотой;
• Иммуномодуляторы (ронколейкин, циклоферон, иммунофан и др.);
• Эссенциале, сирепар и др. препараты для поддержки функции печени;
• Поливитамины (аминовит, витамины группы В, аскорбиновая кислота и др.);
• Симптоматическая терапия (противорвотные и антидиарейные препараты, жаропонижающие).

   В случаях  острого поражения желудочно-кишечного  тракта (рвота, понос) - полное лишение  корма в первые 24-48 часов, при  обязательном введении внутривенно  или подкожно электролитных растворов и глюкозы. Далее обязательно назначается диета. Рекомендуем диетические корма промышленного производства.

9. Профилактика

Большое значение имеет своевременное выявление  больных и переболевших вирусным гепатитом собак и надежная их изоляция, а в племенных питомниках выбраковка.

Для предупреждения заболевания собак вирусным гепатитом  осуществляют общие ветеринарно-санитарные мероприятия: предупреждение заноса возбудителя; своевременное диагностирование гепатита; проведение мероприятий, направленных на ликвидацию болезни.

Для специфической  профилактики инфекционного гепатита собак за рубежом широко применяют  инактивированные и живые вакцины, обычно в комбинации с вакцинами  против чумы, бешенства, лептоспироза. В нашей стране проходит испытания  инактивированная культуральная моновакцина против гепатита собак и пушных зверей.

Для активной специфической  профилактики инфекционного гепатита собак различными фирмами предложен  рад вакцин, в том числе и  ассоциированных, где вирус Ad can-1 используется совместно с возбудителями других болезней. Имеющиеся вакцинные препараты создают при правильном применении иммунитет достаточной напряженности, что позволяет в основной массе предохранять собак от заражения.

В условиях угрозы заражения допускается применение собакам, непривитым от инфекционного гепатита, специфической антисыворотки. Однако пассивная иммунная защита в этом случае может быть легко прорвана массивной дозой возбудителя и продолжается не более 2-3 недель.

Новорожденные щенки могут приобретать антитела вместе с молоком переболевших матерей. Колостральный иммунитет в этом случае может продолжаться до 1-1,5 месяца.

С целью профилактики можно проводить и другие общие  ветеринарно-санитарные мероприятия, направленные на недопущение контакта с источником инфекции, ликвидацию факторов переноса и т.д. Однако эти мероприятия эффективны лишь в условиях группового содержания животных (питомники, своры и т.д.).

Иммунитет. У переболевших животных формируется стойкий длительный иммунитет.

Кормление. В случае острого поражения желудочно-кишечного тракта (рвота, понос) - полное лишение корма в первые 24-48 ч, но предлагать чистую воду, воду с глюкозой или электролитные растворы с глюкозой. Затем назначают заместительную диетотерапию.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Заключение

С давних времен и до сих пор продолжается борьба с различными инфекционными, вирусными заболеваниями животных. В лабораториях с помощью культивирования исследуются падматериалы и создаются эффективные методы лечения. Культивирование вирусов производят для накопления вируссодержащего материала с целью изучения иммунобиологических, антигенных, морфологических и других свойств вирусов, а также для приготовления биологических препаратов (вакцин, сывороток).

В настоящее  время существуют несколько методов  культивирования вирусов: на культуре тканей; на восприимчивых животных и на куриных эмбрионах (метод, описанный ранее). 

Преимущество  куриных эмбрионов, в свою очередь, заключается в том, что если в  них и присутствует какой-нибудь патогенный вирус, то он, по-видимому, будет  заражать только птиц, а не млекопитающих, также обладают сравнительно высокой жизнеспособностью и устойчивостью к различным воздействиям. При культивировании вируса птиц на курином эмбрионе необходимо принять специальные меры предосторожности, чтобы исключить появление нежелательных вирусов и микоплазм.

Одно из заболеваний, имеющее важное значение в лечение  и профилактике больных животных является вирус инфекционного гепатита собак, поражающий собак всех пород, но чаще – молодых. Наибольшая смертность от этой болезни среди щенков.

Считается, что  заражение происходит главным образом  через рот, так как вирус обнаруживается в слюне больных животных. Однако его находили и в моче собак, перенесших гепатит, даже спустя шесть месяцев  после того, как все другие симптомы болезни исчезли.

Подсчитано, что  по крайней мере 75% взрослых собак невосприимчивы к гепатиту, в то время как почти все щенки подвержены этому заболеванию. Отсюда специалисты заключают, что взрослые собаки, имеющие иммунитет, переболели гепатитом в легкой форме еще будучи щенками, что, возможно, не было даже замечено.