Изучение красной крови

1. Значение исследования крови.

Потребность в исследовании крови определяется, прежде всего, ее физиологической ролью, а также  изменениями, наступающими в ней  при различных патологических состояниях. Кровь тесно взаимосвязана со всеми органами и тканями. Вместе с эндокринной и нервной системами  она обуславливает единство и  целостность организма, обеспечивая  его гомеостаз.

Исследование крови является основным методом распознавания  болезней кроветворных органов. Однако значение исследования крови далеко не исчерпывается диагностикой болезней кроветворных органов. Кровь как  внутренняя среда организма является переносчиком кислорода и питательных  веществ к органам и тканям, в нее же поступают углекислый газ и продукты, образующиеся в  клетках организма в процессе обмена веществ. Гормоны, вырабатываемые в железах внутренней секреции, попадают непосредственно в кровь, в нее  же поступают различные ядовитые вещества, проникающие в организм извне или образующиеся в нем  самом. Многие возбудители инфекционных болезней и в особенности их токсины  и продукты жизнедеятельности также  циркулируют в крови заболевшего  человека. В крови содержатся иммунные тела, вырабатываемые в организме  в ответ на внедрение болезнетворных агентов. Кроме того, кровь является носителем ферментов, играющих важную роль в процессах межуточного  обмена. Высокая чувствительность кроветворных органов к колебаниям внешних  и внутренних условий делает картину  крови чрезвычайно тонким зеркалом, отражающим влияние многих физиологических  и в особенности патологических воздействий на организм.

 По всем этим причинам  исследование крови обязательно  производится наряду с измерением  температуры тела и исследованием  мочи у каждого больного независимо  от характера предполагаемого  заболевания.

Исследование крови, в  комплексе с клиническим обследованием  животного позволяет выявить  скрытые изменения в органах  и тканях, определить возникшие осложнения, дифференцировать сходные заболевания, судить о тяжести болезни, оценить  функциональное состояние отдельных  органов и систем, контролировать эффективность лечебных и профилактических мероприятий, прогнозировать исход  заболевания.

Для постановки правильного  диагноза, для его подтверждения  во всех случаях необходимы лабораторные исследования.  Правильный выбор  объема лабораторных диагностических  исследований и углубленное научное  их толкование во многом предопределяют успех и своевременность постановки диагноза, выбор методов и тактики лечения, контроль за его эффективностью.

 Без лабораторных исследований  крови (биохимический анализ крови  и общий морфологический анализ  крови) невозможно достаточно  объективно оценить функциональное  состояние почек, печени, поджелудочной  железы, иммунной системы. 

Знание функционального  состояния внутренних органов помогает правильно подобрать наиболее эффективное  лечение и предостерегает от применения лекарств, которые своими побочными  действиями могут сильно ухудшить состояние  больного. Только на основании лабораторных исследований крови можно определить необходимость применения лекарств, влияющих на иммунитет и подобрать каким именно лекарством воспользоваться в данном случае.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Значение исследования морфологии крови

В зависимости от преследуемых целей исследование крови разделяется  на морфологическое, физико-химическое, химическое, бактериологическое и серологическое.

 Бактериологическое и  серологическое исследования крови  применяются в основном для  распознавания различных инфекционных  болезней. Методики этих исследований  и их диагностическое значение  излагаются в руководствах по  микробиологии, эпидемиологии и  инфекционным болезням.

 Из первых трех указанных  видов исследования крови основным  является морфологическое. Что касается химического и физико-химического исследований крови, то в большинстве случаев они требуют сложной биохимической аппаратуры. Здесь будут изложены лишь главнейшие, наиболее часто применяемые и доступные из них. Некоторые методы химического исследования крови и их диагностическое значение уже рассмотрены в соответствующих разделах (определение содержания билирубина, глюкозы, остаточного азота, мочевины и т. п.). Подробно эти методы описаны в специальных руководствах по лабораторным методам исследования.

 Морфологическое исследование  крови состоит из подсчета  количества форменных элементов  крови — эритроцитов, лейкоцитов  и тромбоцитов — в единице  объема и качественного изучения  их под микроскопом в окрашенном  мазке крови.

 Хотя определение количества  гемоглобина относится к химическому  исследованию крови, оно обычно  производится одновременно с  подсчетом эритроцитов, так как  изменения в количестве  и в  числе эритроцитов крови теснейшим  образом связаны друг с другом.

Общий анализ крови (клиническая  морфология крови) обязательно проводится перед любым вмешательством в  организм. В клинической практике исследование морфологического состава  крови, включая подсчет количества форменных элементов крови (лейкоцитов и эритроцитов) и определение  лейкограммы, имеет большое диагностическое значение, особенно при диагностике болезней крови (лейкозы, анемии) и определении степени и характера воспалительной реакции в организме.

 

 Наиболее часто определяют  в крови такие показатели, как: 

 

концентрация гемоглобина 

 

общего белка 

 

мочевина

 

креатинин

 

билирубин

 

соотношение белковых фракций (протеинограмма)

 

активность щелочной фосфатазы  сыворотки крови 

 

активность трансаминаз (АлТ и АсТ)

 

активность амилазы 

 

концентрация кальция  и фосфора 

 

глюкозы крови 

 

холестерина, хлоридов

 

количество форменных  элементов крови (лейкоцитов и эритроцитов), лейкоформулу, скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Морфологическое исследование крови производится в мазках, приготовляемых на предметных или покровных стеклах  и окрашенных по одному из указанных  ниже способов. Для получения хороших  мазков необходимо соблюсти ряд технических  условий и первое из них - чистоту  и тщательность обезжиривания стекол. Для этого следует тщательно  промытые водой стекла погрузить, по крайней мере на час, в смесь спирта с эфиром, после чего хорошо обмыть их дистиллированной водой и обсушить. Мазок должен быть тонким, равномерным и не достигать краев стекла, для чего стекло, употребляющееся для размазывания крови, должно быть достаточно тонким и иметь шлифованные ребра. Предметным стеклом, недалеко от его края, касаются выступившей на месте прокола кожи капли крови так, чтобы маленькая капля осталась на предметном стекле. Другое шлифованное стекло, поставленное коротким ребром под углом в 45° к первому впереди капли, подводят к капле крови, которая в силу капиллярности расплывается вдоль ребра. Тогда легким и быстрым движением стекла вперед кровь размазывают тонким слоем по предметному стеклу (рисунок 1).

 

 Рисунок 1. Схема производства  мазка крови на предметном  стекле

 

Мазки приготавливаются также  и на покровных стеклах. Для этого, прикоснувшись покровным стеклом  к выступившей из места укола  капле крови, наносят очень маленькую  каплю крови на стекло, которое накладывается на другое покровное стекло так, чтобы углы наложенного стекла приходились на середину ребер нижнего. Капля очень тонким слоем распределяется между стеклами, и тогда последние, захваченные за кончики, разводят и получают два тонких препарата (рисунок 2).

 Рисунок 2. Схема производства  мазка крови на покровных стеклах

 

 Мазок высушивают на  воздухе и на его середине  иглой обычно отмечают фамилию  исследуемого и дату.

Окрашивание сухих мазков производят после предварительной  фиксации. Лучшая фиксация достигается  в абсолютном метиловом алкоголе в течение трех минут или смеси  Никифорова, состоящей из равных частей абсолютного этилового алкоголя и эфира в течение 10-30 минут  в зависимости от толщины мазка.

Тонкое морфологическое  исследование крови с помощью  светового микроскопа возможно только на окрашенных препаратах. Принцип  всех предложенных для этой цели окрасок  основан на химическом сродстве различных  составных частей клетки к определенным красящим веществам, обычно к анилиновым краскам, и в меньшей мере на их физических свойствах.

Принцип дифференциальной окраски  разработан отечественным ученым Д.Л. Романовским. Из множества предложенных для этой цели окрасок наилучшими являtтся окраска по Романовскому - Гимза (Giemsa). Краска Гимза состоит из метиленазура (Azur I), эозина и метиленовой синьки, растворенных в метиловом алкоголе и глицерине. В щелочном растворе метиленовой синьки через некоторое время отщепляется другое красящее вещество, которое придает раствору фиолетовый оттенок и которое можно извлечь из раствора хлороформом в виде ярко-красной краски.

 Рабочий раствор краски (из продажной готовой краски) приготавливают из расчета 1,5 капли на 1 мл дистиллированной воды. После фиксации окраску в течение 25-30 минут лучше всего производить в чашках Петри, где стекла укладываются на стеклянных палочках, намазанной стороной вниз, так как при этом осадок из краски оседает на дно чашки и не загрязняет мазка. По истечении 25-30 минут мазки извлекают, промывают водой и высушивают на воздухе. Краска очень хорошо дифференцирует ядро, но значительно хуже нейтрофильную зернистость протоплазмы.

 Так как краска приготовлена на метиловом алкоголе, то предварительная фиксация препарата не нужна. Мазок покрывают неразведенной краской Май - Грюнвальд и фиксируют таким образом в течение трех минут, затем к покрывающей мазок краске добавляется равное количество воды (если, например, краски было употреблено 10 капель, то и воды надо прибавить 10 капель). Далее мазок окрашивают в течение 1 минуты. Краску сливают и препарат докрашивают, как было указано выше, раствором краски Гимза в течение 10-15 минут, после чего промывают водой.

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Эритроциты и лейкоциты.

Кроветворение, гемопоэз (от греч. haima - кровь и poiesis - изготовление, сотворение), процесс образования, развития и созревания форменных элементов крови у животных. В процессе кроветворения принято различать: эритропоэз (образование эритроцитов), лейкопоэз (образование лейкоцитов) и тромбоцитопоэз (образование тромбоцитов, или кровяных пластинок). Лейкопоэз подразделяют на гранулопоэз (образование зернистых лейкоцитов - гранулоцитов) и лимфопоэз (образование лимфоцитов). У беспозвоночных кроветворение осуществляется в основном в полостных жидкостях и в самой крови (гемолимфе). У зародышей млекопитающих кроветворение начинается в желточном мешке, печени и вилочковой железе. На более поздних стадиях развития гемопоэз перемещается в костный мозг, а лимфоциты начинают развиваться не только в вилочковой железе, но и в селезёнке и лимфатических узлах. У взрослых млекопитающих кроветворение происходит в кроветворных органах: эритропоэз, гранулопоэз и тромбоцитопоэз осуществляются в основном в костном мозге, лимфопоэз - в лимфатических узлах, вилочковой железе и селезёнке. Высокоспециализированные форменные элементы крови имеют короткий жизненный цикл. Несмотря на непрерывное разрушение клеток крови, количество их в течение жизни организма сохраняется более или менее постоянным, так как гибнущие клетки заменяются новыми. Постоянство морфологического состава крови в физиологических условиях достигается динамическим равновесием процессов гомопоэза и кроверазрушения, регулируемых нейрогуморальными механизмами, а также функциональными механизмами депонирования крови. Все зрелые клетки крови, несмотря на различия между ними, происходят, по-видимому, из единых родоначальных стволовых кроветворных клеток. Линия стволовых клеток поддерживается в организме в течение всей его жизни, что обеспечивает непрерывность кроветворения. При созревании (дифференцировке) кроветворные клетки подвергаются сложным изменениям и делятся ещё несколько раз.

Таким образом, из небольшого числа стволовых клеток образуется большое число специализированных форменных элементов крови. Гемопоэз подчиняется сложной регуляции, чем обеспечивается изменение количества и качества клеток крови в соответствии с потребностями организма (например, при изменении содержания кислорода в воздухе), а также восстановление их числа при потерях крови. Эта регуляция осуществляется рядом гормонов, витаминов (например, цианкобаламин, фолиевая кислота), а также особыми веществами - эритропоэтинами, лейкопоэтинами. Патологические изменения могут касаться кроветворение в целом или характеризоваться преимущественно поражением эритропоэза, лейкопоэза или тромбоцитопоэза. При этом могут наблюдаться как качественные, так и количественные изменения . Всё многообразие нарушений при различных нозологических формах по существу сводится либо к повышенной, либо к пониженной пролиферации кроветворных клеток, сочетающейся с извращениями их нормальной дифференциации. Нарушения кроветворения лежат в основе болезней системы крови.

Эритроциты возникли в  процессе эволюции как клетки, содержащие дыхательные пигменты, которые осуществляют перенос кислорода и диоксида углерода. Зрелые эритроциты у рептилий, амфибий, рыб и птиц имеют ядра. Эритроциты млекопитающих – безъядерные; ядра исчезают на ранней стадии развития в костном мозге. Эритроциты могут  быть в форме двояковогнутого  диска, круглые или овальные (овальные у лам и верблюдов), диаметр  составляет 0,007 мм, толщина - 0,002 мм ,. В 1 мм3 крови человека содержится 4,5-5 млн эритроцитов. Общая поверхность всех эритроцитов, через которую происходит поглощение и отдача О2 и СО2, составляет около 3000 м2, что в 1500 раз превышает поверхность всего тела.

Каждый эритроцит желтовато-зелёного цвета, но в толстом слое эритроцитарная масса красного цвета (греч. Erytros – красный). Красный цвет крови обусловлен наличием в эритроцитах гемоглобина.

Образуются эритроциты в  красном костном мозге. Средняя  продолжительность их существования  составляет примерно 120 сут., разрушаются они в селезёнке и в печени, лишь небольшая их часть подвергается фагоцитозу в сосудистом русле.

Эритроциты, находящиеся  в сосудистом русле, неоднородны. Они  различаются по возрасту, форме, размеру, устойчивости к неблагоприятным  факторам. В периферической крови  одновременно находятся молодые, зрелые и старые эритроциты. Молодые эритроциты в цитоплазме имеют включения  – остатки ядерной субстанции и называются ретикулоцитами. В норме ретикулоциты составляют не более 1% от всех эритроцитов, повышенное их содержание указывает на усиление эритропоэза.