Кампилобакторы. Лабораторная диагностика кампилобактериоза

    б) производят рассев загрязненной культуры в чашки Петри с последующим  отсевом характерных колоний в пробирки на ПЖА;

    в) культуры вносят в пастеровские пипетки  под слой ПЖА;

    г) смешанные культуры пропускают через  мембранные фильтры.

Более сложным делом является изоляция термофильных кампилобактеров: C.jejuni, C.coli, C.laridis.

    Для их выделения пригоден ПЖА с добавлением 7% аминопептида-2 и 0,05% тиогликолата натрия. Пробирки, чашки Петри помешают в эксикатор или в микроанаэростат, воздушный микробассейн которых наполняется газовой смесью, состоящей из 5% кислорода, 10% углекислого газа и 85% азота. Культивирование ведется в термостате при температуре 43°С.

    Кампилобактеры  этих видов  имеют длину от I до 3 мкм, толщину - 0,5-1 мкм. Микробные клетки имеют вид точильного камня - они  более широкие в средине и  сужены в концах. На твердых питательных  средах патоген образует более мелкие колонии (0,1-0,3 мл), блестящие, без - форм. Отличительной особенностью этих кампилобактеров является и то, что они не растут при температуре 25°С, гидролизуют натриевую соль гипуровой кис лоты.

    Биохимическая активность различных видов кампилобактеров слабо выражена. Вместе с тем, некоторые показатели этой активности используют для дифференциации возбудителей рода Campilobacter (табл. 3). 

Таблица 3. Идентификация кампилобактеров  по биохимическим свойствам(по Берги,1980)

Биологическое исследование.

    Для биопробы используют беременных морских  свинок, куриные эмбрионы, белых  мышей, кроликов, при необходимости  стельных телок, суягных овец.

    Морских свинок инфицируют внутрибрюшинно или  во влагалище. В положительных случаях  морские свинки абортируют. Если в течение 10-12 дн. аборта не будет, то их убивают. Абортированные плоды и содержимое полости матки исследуют бактериологически. Беременным крупным животным культуру возбудителя вводят подкожно или через рот. Животные абортируют или их убивают. Материал также подвергают бактериологическому исследованию. У опытных кроликов через 2-3 дн. патология проявляется диареей. Куриные эмбрионы заражают на хорионалантоисную оболочку в дозе 25 млн.м.кл. Гибель эмбрионов происходит на 3-7 сутки. Отход их достигает 30-60%.

Серологические  исследования.

    Серологическую  диагностику проводят путем постановки РА, РСК (РДСК) и методом флуоресцирующих  антител. У крупного рогатого скота  обычно РА ставят с влагалищной слизью (РАВС), у овец - с сывороткой крови.

Для постановки РА необходимы: агглютинирующие моноспецифические сыворотки, нормальная сыворотка, исследуемая суспензия (антиген), заводской антиген. Типирование культур вначале проводят ориентировочно по капельной РА, с помощью специфических сывороток, затем окончательно в пробирочной РА.

    Достоверность исследования слизи от коров на кампилобактериоз зависит от состояния половых  органов. Необходимо материал брать  в период полового покоя животного. Важно, чтобы в этот период отсутствовали  патологические выделения из влагалища. Слизь забирается на стерильный тампон, который помешают в пробирку, и в те же сутки доставляют в лабораторию. В лаборатории, данный тампон переносят в другую пробирку, содержащую 5 мл стерильного формалинизированного - 3%-ного раствора поваренной соли, и выдерживают 12-14 ч при температуре 1-4°С. После этого, тампоны отжимают пинцетом, жидкость центрифугируют 30 мин. при 2,5-3 тыс.об/мин.

    Для РА используют надосадочную жидкость в разведении: 1:50, 1:100, 1:200, 1:400. За положительную реакцию принимают четкую агглютинацию во всех четырех или в первых двух разведениях. При сомнительном результате - агглютинация выражена слабо и только в первых двух пробирках. При исследовании сыворотки крови овец РА ставят в трех разведениях - 1:100, 1:200, 1:400. Реакцию считают положительной при наличии выраженной агглютинации в разведении 1:200 и 1:400 на 3-4 креста. РА оценивают отрицательной, когда нет агглютинации или она наблюдается в титре 1:100 на 1-2 креста.

    В последние годы для диагностики  c.jejuni разработана технология приготовления антигена, приготовлены гипериммунные адсорбированные кроличьи ОН - сыворотки. Предложена также реакция коагглютинации.

    Убедительной  для подтверждения диагноза на кампилобактериоз является реакция длительного связывания комплемента (ГДСК). Для ее постановки требуется: исследуемая нормальная сыворотка крови, антиген, комплемент, гелюли зин, эритроциты барана, физиологический раствор. Реакцию оценивают по задержке гемолиза, выраженному в крестах.

    РДСК  дает показатель через 2-4 недели после заражения телят. При исследовании слизи от этих же животных положительная РА обнаруживается лишь через 3-4 месяца после их заражения. Поэтому для определения ареала эпизоотического процесса целесообразно в начале животных исследовать в РДСК.

    Срок  исследования: серологического - 4 дн., бактериологического - 10 дн.

Кампилобактериоз  у крупного рогатого скота следует  дифференцировать от бруцеллеза, трихомоноза; у овец - от бруцеллеза, сальмонеллеза, хламидиоза; у свиней - от бруцеллеза, сальмонеллеза, хламидиоза; у норок - от сальмонеллеза. 

Лечение 

    Для лечения больных быков применяют пеницеллин и стрептомицин по I мл ЕД, антибиотики эмульгируют в 50-60 мл растительного масла или рыбьего жира. Препараты вводят в препуциальннй мешок после его обработки антисептическими растворами. Одновременно с этим указанные антибиотики в дозе по 4 тыс. ЕД на кг массы животного на 0,5% растворе новокаина 2 раза в сутки инъецируют внутримышечно. После четырехдневного лечения делают перерыв за 5-6 дней. Затем курс терапии повторяют: дважды в сутки внутримышечно вводят окситетрациклин по 5 тыс. ЕД/кг массы животного. Препуций обрабатывают 5%-ной эмульсией фуразолидона. Через месяц после лечебных процедур сперму быка трижды с интервалом в 10 дней подвергают бактериологическому исследованию на кампилобактериоз. При отрицательных результатах исследования быков признают здоровыми. Коров лечат также пенициллином и стрептомицином. Антибиотики по 1 млн ЕД вводят в полость матки в течение 4 дней. Кроме этого инъекцируют внутримышечно стрептомицин по 4 тыс. ЕД на кг массы в сутки. Влагалище орошают раствором фурациллина или риванола. Важным обстоятельством обеспечивающим эффективность лечения, является определение чувствительности кампилобактеров к препаратам. Из приведенных выше данных в этих целях с наилучшим успехом могут быть использованы: ампициллин, стрептомицин, канамицин, левомицетин, мицерин, мономицин, окситетрациклин, пентриксил, теллуристокислый калий, тетрациклин, тиомерсал, фуразолидон, хлортетрациклин, дигидрострептомицин с ампициллином, окситетрациклин с олеандомицином или с фуразолидоном. 
 
 
 

Меры  борьбы и профилактика 

    Основным  источником возбудителя кампилобактериоза  служат быки-производители. Поэтому в стратегии противоэпизоотических мероприятий значение отводится постоянному контролю за состоянием здоровья их в отношении данной патологии. Принимаются меры по недопущению таких быков для воспроизводства стада в хозяйствах и на предприятиях племживобъединения. Комплектование предприятий скотоводства должно осуществляться животными, происходивший из благополучных ферм по кампилобактериозу, после профилактического их карантина и лабораторного обследования.

    В случае установления диагноза на кампилобактериоз зараженные быки-производители подлежат изоляции. Вопрос о их использовании в воспроизводстве должен решаться с учетом ценности данных животных. Ценные особи подлежат лечению под лабораторным контролем. Их использование может быть решено после надежного убеждения, основанного на наличии многократных бактериологических исследований при отрицательных результатах. В комплексе общих профилактических мер является нежелательным использование быков- производителей в вольной случке.

    В программе профилактических мероприятий  следует также отводить внимание контролю за состоянием здоровья маточного поголовья в отношении инфекционных и инвазионных заболеваний органов воспроизведения. Нужно помнить и о том, что кампилобактеры могут распространяться не только через контаминированную сперму, но и при контакте больных животных со здоровыми. Необходимо учитывать также период кампилоносительства у коров. Видимо возможность самовыздоровления коров, если их не осеменять в течение трех месяцев, нельзя признать состоятельной. Такие животные должны подлежать изоляции и лечению до полного освобождения от кампилобактеров из организма животных. Важным мероприятием является ликвидация бесконтрольного использования быков в стадах маточного поголовья.

    В неблагополучных пунктах по вибриозу овец вводятся ограничительные мероприятия. Больное поголовье животных подлежит изоляции в отдельные группы. Абортированные плоды, последы собирают в специальную тару, дезинфицируют. Животных подвергают лечению. В неблагополучных пунктах проводят иммунизацию.

    При кампилобактериозе среди других видов животных также необходимо выполнять систему ограничительных мероприятий, животных обрабатывать антибиотиками тетрациклинового ряда.

    В системе противокампилобактериозных мероприятий особое значение приобретает  устранение путей распространения  вибрионов. Животные являются основным резервуаром кампилобактеров. Аналогичное положение занимает дикая и домашняя птица. Это обуславливает необходимость обеспечения условий, ограничивающих или полностью исключающих контакт синантропной птицы с животноводческими фермами, выгулами.

    На  фермах, предприятиях, перерабатывающих сырье жи вотного происхождения, в блоках общественного питания  должны в полном объеме выдерживаться  требования техноло гии, особенно требования санитарной культуры при переработке  сырья животного происхождения. Показано, что трансформация возбудителя происходит различными путями: через молоко, полученное от коров с заболеванием мастит, через мясо, контаминированное возбудителем в период разделки туш животных, в период приготовления мясных, колбасных полуфабрикатов и т.д. Немаловажное значение в комплексе мероприятий отводится осуществлению дератизации, дезинсекции и дезинфекции на животноводческих объектах, на перерабатывающих предприятиях, а также на предприятиях общественного питания. Отходы пищевых предприятий используются в корм животным, в случае контаминации их кампилобактерами они могут стать одним из факторов в распространении и заражении животных.

    Кампилобактериоз  относится к зооантропонозам. Заболевание людей в связи с этим может быть обусловлено контактом при содержаний и уходе за сельскохозяйственными животными, птицей, в собачьих питомниках, а также при работе в качестве персонала на убойных площадках, мясокомбинатах, молокозаводах. Заражение возможно в домашних условиях в результате контакта с собакой, кошкой, имеющих признаки диареи, а также при содержании декоративных птиц. Большой риск заражения людей существует при употреблении воды из озер, рек, ручьев. Если они подвергаются загрязнению сбросами с животноводческих ферм, комплексов, предприятий перерабатывающих сырье животного происхождения. В этом отношении могут представлять эпизоотологическую и эпидемиологическую опасность площадки, навесы для летне-лагерного содержания животных, обычно размещаемые по берегам водных источников. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Литература 

1. Бюллетень  Всесоюзного института экспериментальной  ветеринарии. - М. - 1984. - Вып. 56.

2. Голиков А.В.  Вибриоз животных и птицы. - М., 1978.- 110 с.