Диагностика микоплазма – инфекции культуральным методом

* DOT – доксициклин, JOS – джозамицин, OFL  - офлоксацин, ERY – эритроми-цин, TET – тетрациклин, CIP –  ципрофлоксацин, AZI – азитромицин, CLA – кларитромицин, PRI – пристинамицин.

В результате статистического анализа  не установлено статистически значимых различий в частоте встречаемости чувствительных к доксициклину штаммов у пациентов с моноинфекцией и ассоциированной микоплазменной инфекцией – 24 (100%) и 22 (95,7%) случая соответственно (р=0,98, χ² с поправкой Йетса), (рисунок 3.4). Это можно объяснить тем, что в последние годы доксициклин несколько потеснили препараты из группы макролидов, активно применяемые в терапии урогенитальной инфекции.

* S – чувствительный, R – резистентный

Рисунок 3.4 – Частота встречаемости чувствительных микроорганизмов

к доксициклину

 

Высокая чувствительность возбудителей к этому препарату  доказывает обоснованность его применения в лечении микоплазмозов. Однако он имеет свои противопоказания: препарат не показан детям, а так же в период беременности и лактации.

Установлено достоверная, более частая встречаемость резистентности к джозамицину у пациентов со смешанной инфекцией (р<0,001). При уреаплазменной моноинфекции чувствительными к джозамицину оказались 24 пациента (100%), когда к смешанной микоплазменной инфекции чувствительны лишь 9 пациентов (39,1%) (рисунок 3.5). Джозамицин благодаря высокой активности и хорошей переносимости является одним из самых широко применяемых в мире антибиотиков для лечения урогенитальных инфекций [27]. Поэтому резистентность смешанной инфекции может быть связана с широким применением препарата. 

* S – чувствительный, R – резистентный

Рисунок 3.5 – Частота встречаемости чувствительных микроорганизмов

к джозамицину

 

Для офлоксацина не установлено статистически значимых различий в частоте встречаемости чувствительных штаммов микроорганизмов (р=0,5). Моноинфекция и смешанная инфекция оказались резистентны к данному антибиотику (рисунок 3.6). Сравнивая полученные нами данные с данными более ранних исследований наблюдается постепенное увеличение количества резистентных штаммов. В связи с этим в ближайшие годы можно ожидать дальнейшего увеличения числа штаммов резистентных к офлаксоцину и, возможно, другим фторхинолонам.

* S – чувствительный, R – резистентный

Рисунок 3.6 – Частота встречаемости чувствительных микроорганизмов

к офлоксацину

 

Частота встречаемости  чувствительных к эритромицину штаммов у пациентов с уреаплазменной моноинфекцией значительно выше, чем у пациентов со смешанной инфекцией (15 и 1 соответственно, р<0,001) (рисунок 3.7). Это связано с тем, что антимикробное действие эритромицина направлено, главным образом, на U.urealyticum. В то же время эритромицин, как и большинство других макролидов, практически не действует на M.hominis.

* S – чувствительный, R – резистентный

Рисунок 3.7 – Частота встречаемости чувствительных микроорганизмов

к эритромицину

 

Для тетроциклина различия не обнаружены. Он хорошо воздействует как на моноинфекцию, так и на смешанную микоплазменную инфекцию (рисунок 3.8). Для ассоциированной инфекции было выявлено 3 случая с резистентными штаммами. Это может быть связано с повсеместным, широким применением тетрациклина в терапии инфекционных заболеваний.

 

 

* S – чувствительный, R – резистентный

Рисунок 3.8 – Частота встречаемости чувствительных микроорганизмов

к тетрациклину

 

Пациенты в обоих группах  с микоплазменными инфекциями оказались резистентны к ципрофлоксацину (рисунок 3.9). Резистентность к ципрофлоксацину in vitro обычно связывается с мутациями сайта-мишени в бактериальных топоизомеразах и ДНК-гиразы путем многоступенчатых мутаций. Единичные мутации могут скорее привести к снижению чувствительности, а не к клинической резистентности. Однако множественные мутации обычно вызывают клиническую резистентность к ципрофлоксацину и перекрестную резистентность к хинолонам. Считается, что Ureaplasma ureatitycum проявляет наследственную резистентность к ципрофлоксацину.

* S – чувствительный, R – резистентный

Рисунок 3.9 – Частота встречаемости чувствительных микроорганизмов

к ципрофлоксацину

Установлена более частая встречаемость резистентности к  азитромицину у пациентов со смешанной инфекцией (р=0,015). Оказалось, что к азитромицину наиболее чувствительны изолированные штаммы U. Urealiticum – 9 (37,5%) случаев. В 22 случаях (95,6%) при смешанной микоплазменной инфекции штаммы оказались резистентными (рисунок 3.10).

* S – чувствительный, R – резистентный

Рисунок 3.10 – Частота встречаемости чувствительных микроорганизмов

к азитромицину

 

Смешанная микоплазменная инфекция оказалась резистентна к кларитромицину в 20 (86,95%) случаях, тогда как в отношении к моноинфекции кларитромицин эффективен в 100% случаев (рисунок 3.11).

* S – чувствительный, R – резистентный

Рисунок 3.11 – Частота встречаемости чувствительных микроорганизмов

к кларитромицину

 

Для пристинамицина различия не обнаружены. Антибиотик в 100% случаев эффективен как на моноинфекцию, так и на смешанную микоплазменную инфекцию.

В целом уреаплазма оказалась чувствительной к антибиотикам тетрациклинового ряда. Так, чувствительность к доксициклину составила 100%, и тетрациклину 100%. Также имеется хорошая чувствительность к  некоторым макролидам: джозамицин 100%, кларитромицин 100%, и пристинамицин так же 100%.

При ассоциированных инфекциях чувствительность к доксициклину составила 95,7%, тетрациклину 87%, а пристинамицину 100%. К остальным антибиотикам чувствительность резко снижается. В особенности, наименьшая чувствительность ассоциированных инфекций отмечена в отношении эритромицина. Это может быть связано с присутствием М.hominis, которая малочувствительна к макролидам.

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В работе, выполненной на базе медицинского центра «Неомед» г. Минска, было проведено изучение культурального метода для выявления микоплазм и выделения чувствительных и устойчивых штаммов урогенитальных микоплазм к 9 антибиотикам. Нами было обследовано 100  пациентов г. Минска детородного возраста (женщины 19–44 лет, мужчины — 27–41 год). Положительный результат наблюдался у 47 человек.

В настоящем исследовании с помощью культурального экспресс-теста были выделены как уреаплазменная моноинфекция (24 (51,06%) пациента), так и ассоциированная микоплазменная инфекция (23 (48.9%) пациента).

Установлено, что частота встречаемости чувствительных к доксициклину и тетрациклину штаммов U. urealiticum составила 100% , и 95,7% и 87% соответственно, в отношении смешанной инфекции.

Среди макролидов высокая активность в отношении U. urealiticum была показана джозамицином (100%) и кларитромицином (100%), в то время как ответ на эритромицин и азитромицин был не очень высок (62,5% и 37,5% соответственно).

Для ассоциированной инфекции джозамицин, офлоксацин, эритромицин, ципрофлоксацин, а также кларитромицин и азитромицин оказались эффективены лишь в единичных случаях.

Возможное проявления резистентности у ассоциированных микоплазменных инфекций возникает по причине того, что на M. hominis не оказывают влияния антибиотики из группы макролидов к которым относятся эритромицин, джозамицин, кларитромицин, азитромицин.

Таким образом, при лечении  урогенитальных микоплазмозов традиционно считаются препараты тетрациклинового ряда. Однако повсеместное широкое применение тетрациклинов в терапии инфекционных заболеваний привело к значительному возрастанию количества резистентных штаммов.

Группа таких антибиотиков, как макролиды, линкозамиды применяются, когда тетрациклины противопоказаны, например для новорожденных. По механизму действия они сходны с тетрациклинами. Применение фторхинолонов также приводит к образованию устойчивых штаммов, но эти препараты пока высокоэффективны у большой категории больных.

 

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

 

1. Дмитреев Г.А. Урогенитальные бактериальные инфекции: диагностика.// Инфекции и антимикробная терапия. – 2003. – т.5.-№1. – с.5-11.
2. Микоплазмы./ Борхсениус С.Н., Чернова О.А., Чернов В.М., Вонский М.С. – СПб.: Наука, 2002. – 320с.
3. Семенов Н.В., Мардалешвили И.Г., Банников А.И. Урогенитальный микоплазмоз. – СПб. – 2001. – 18с.
4. Черкес Ф.К., Богоявленская Л.Б.,Бельская Н.А. Микробиология./ Под ред. Ф.К. Черкес. – М.: Медицина. – 1986. – 512с.
5. Адаскевич В.П. Инфекции, передаваемые половым путем. Руководство для врачей. – М.: Мед.кн.; Н.Новгород: НГМА, 1999. – 416с.
6. Кисина В.И., Ширшова Е.В. Существует ли связь урогенитальных микоплазм с патологией органов мочеполовой системы.// Consiliummedicum Журнал доказательной медицины для практикующих врачей. – Том 07/ N4 – 2005 [Электронный ресурс] – режим доступа http://www.consilium-medicum.com/media/gynecology/05_04/226.shtml свободный.
7. Прозоровский С.В., Раковская И.В., Вульфович Ю.В. Медицинская микоплазмология – М.: «Медицина», 1995. – 288с.
8. Прозоровский С.В., Раковская И.В., Горина Л.Г., Вульфович Ю.В., Гончарова С.А., Неустроева В.В., Гамова Н.А. Персистенция микоплазм в инфицированном организме: наблюдения, причины и механизмы, диагностика.// Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 1997. - №4. – с.47-51.
9. Болтович А.В., Соловьёва А.В. Генитальный микоплазмоз у женщин. Методическое пособие. – Ханты-Мансийск: ГУИПП «Полиграфист», 2003.– 36с.
10.   Лабораторная диагностика микоплазмозов у людей: Методические рекомендации. – Л.: 1988. – 38с.
11.   Гамова Н.А., Гончарова С.А. Обнаруженные с помощью реакции агрегат-гемагглютинации антигенов различных биоваровU. urealyticum в сыворотке крови пациентов с воспалительными заболеваниями урогенитального тракта и нарушениями репродуктивной функции.// Клиническая лабораторная диагностика. – 2003. -№4. – с.46-48.
12.   Абрамченко В.В., Башмакова М.А., Корхов В.В., Антибиотики в акушерстве и гинекологии. – СПб.: СпцЛит, 2000. – 218с.
13.    Тец В. В. Микроорганизмы и антибиотики: заболевания, передающиеся половым путем. – СПб.: Левша, 2004. – 244 с.
14.   Башмакова М.А., Кошелева Н.Г., Калашникова Е.П. Инфекция и бактериальная колонизация урогениталий у беременных, влияние на течение беременности, плод и новорожденного ребенка.// Акушерство и гинекология. – 1995. - №1. – с.15-18
15.   Bebear C.M., Renaudin H. Comparative Activities of Telithromycin, Levofloxacin, and Other Antimicrobial Agents against Human Mycoplasmas.// Antimicrobial Agents and Chemotherapy – 2000. p. 1980 – 1982.
16. Алексанян Л.А.[и др.] Макролиды. – М.: «Диалог» – МГУ, 2000. – 108с.
17.   Виноградова И.А., Шурыгина Е.В. Фармакология макролидов // Учебное пособие / ПетрГУ. Петрозаводск: 2001. – 52с.
18. Barry A.L. and Thornberry C. Susceptibility Tests: Diffusion Test Procedures.// Manual of clinical microbiology. – 5th ed. – 1991. – p.1117-1125.
19. Cassell G.H., Waits K.B., Watson H.L. et al. Ureaplasma urealyticum role in prematurity and disease in newborns.// Clin. Microbiol. Rev. – 1993. – Vol.6. – p.69-87.
20. Sahm D.F. and Washington J.A. Antibacterial Susceptibility Tests: dilution Methds.// Manual of clinical microbiology. – 5th ed. – 1991. – p.1105-1116.
21. Thornberry C. Antimicrobial Susceptibility Testing: General Considerations.// Manual of clinical microbiology. – 5th ed. – 1991. – p.1059-1064.
22. Yao J.D. and Moellering R.C. Antibacterial Agents.// Manual of clinical microbiology. – 5th ed. – 1991. – p.1065-1098.
23. Бриан Л.Е. Бактериальная резистентность и чувствительность к химиопрепаратам. - М.: Медицина, 1984. - 274с.
24. Евсюкова И.И. [и др.] Опыт использования азитромицина (Сумамеда) в терапии внутриутробных инфекций у новорождённых // Сумамед в лечении заболеваний, передающихся половым путём – СПб: 1998. – с. 16 – 20.
25. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. – М.: МедиаСфера, 2002. – 312 с.
26. Определитель бактерий Берджи: В 2 т. Под ред. Дж. Хулта, Н. Крига.
27. Colombo U., Pifarotti G., Amidani M. et al. Rokitamycin in the treatment of female genital Chlamydia and Mycoplasma infections. Comparative study vs josamycin // Minerva Ginecol.— 1998.— 50 (11).— P. 491—497.

 

 

Минск 2012