Контрольная работа по "Патологии"

ВОПРОСЫ:

         16.Апоптоз, его механизмы и значение в патологии.

 

       96.Фагоцитоз. Классификация и характеристика фагоцитов.Факторы бактерицидности фагоцитов.Формы патологии фагоцитоза, связанные с дефицитов бактерицидных факторов фагоцитов.

 

 

       161.Эритроцитозы,определение классификация, виды.

 

         ЗАДАЧА  73:

    Больная А., 23 лет при поступлении в клинику предъявляет жалобы на тошноту, рвоту, кожный зуд. Заболела 4 дня тому назад. При осмотре: склеры и кожные покровы желтушные, печень и селезенка увеличены. АД -100/60 мм рт.ст.пульс-60 в минуту, ритмичный. Общее содержание в сыворотке билирубина 76 мкмоль/л, из них непрямого-20,5 мкмоль/л. В моче присутствуют билирубин, уробилин.

1. Определить тип желтухи. Аргументируйте ответ.
2. Каковымеханизмы гипербилирубинемии и уробилинурии при данном типе желтухи?

 

 

 

 

 

 

   16.Апоптоз, его механизмы и значение в патологии.  АПОПТО́З (от греч. apoptosis — «отпадающий»), генетически обусловленный процесс физиологической гибели клеток.   В организме здорового человека клеточный гомеостаз определяется балансом между гибелью и пролиферацией клеток. Апоптоз - программированная клеточная гибель, энергетически зависимый, генетически контролируемый процесс, который запускается специфическими сигналами и избавляет организм от ослабленных, ненужных или повреждённых клеток. Ежедневно, примерно около 5% клеток организма подвергаются апоптозу, а их место занимают новые клетки. В процессе апоптоза клетка исчезает бесследно в течение 15-120 минут.

     Апоптоз - это биохимически специфический тип гибели клетки, который характеризуется активацией нелизосомных эндогенных эндонуклеаз, которые расщепляют ядерную ДНК на маленькие фрагменты. Морфологически апоптоз проявляется гибелью единичных, беспорядочно расположенных клеток, что сопровождается формированием округлых, окруженных мембраной телец (“апоптотические тельца”), которые тут же фагоцитируются окружающими клетками.

Это энергозависимый  процесс, посредством которого удаляются  нежелательные и дефектные клетки организма. Он играет большую роль в  морфогенезе и является механизмом постоянного контроля размеров органов. При снижении апоптоза происходит накопление клеток, пример - опухолевый рост. При  увеличении апоптоза наблюдается прогрессивное  уменьшение количества клеток в ткани, пример - атрофия.

   Апоптоз имеет свои отличительные морфологические признаки, как на светооптическом, так и на ультраструктурном уровне. При окраске гематоксилином и эозином апоптоз определяется в единичных клетках или небольших группах клеток. Апоптотические клетки выглядят как округлые или овальные скопления интенсивно эозинофильной цитоплазмы с плотными фрагментами ядерного хроматина. Поскольку сжатие клетки и формирование апоптотических телец происходит быстро и также быстро они фагоцитируются, распадаются или выбрасываются в просвет органа, то на гистологических препаратах он обнаруживается в случаях его значительной выраженности. К тому же апоптоз - в отличие от некроза - никогда не сопровождается воспалительной реакцией, что также затрудняет его гистологическое выявление.

   Апоптоз - это механизм гибели клеток, который имеет ряд биохимических и морфологических отличий от некроза.Наиболее четко морфологические признаки выявляются при электронной микроскопии.

     Механизм апоптоза

     TNF-α и Fas-лиганд (CD178) запускают каскад биохимических реакций, финальным этапом которых является дефрагментация хромосом и гибель клетки. На поверхности клеток организма имеются специальные рецепторы для TNF-α, это TNF-RI (с молекулярной массой 55-60 кДа) и TNF-RII (с молекулярной массой 75-80 кДа), а для Fas-лиганда рецептор Fas / APO-1 (CD95).

TNF-R и Fas / APO-1(CD95) имеют  гомологию в экстрацеллюлярных  доменах, представленную в виде  цистеин богатых доменов и  гомологичную последовательность  в интрацеллюлярной части рецептора.

Связывание TNF-α и Fas-лигандов с рецепторами апоптоза активирует интрацеллюлярные "домены смерти" (DED - death effector domain) этих рецепторов: DED, DED1 и DED2 и ряд посредников, включая  церамиды, ras, SAPK / JNK, протеиновые тирозинкиназы, катепсин D и протеазы ICE / CED-3 семейства, которые каскадно проводят смертельный  сигнал. Цистеиновые протеазы ICE / CED-3 семейства находятся в составе  интрацеллюлярной части рецептора  апоптоза в неактивной форме, они  относятся к интерлейкин-lβ расщепляющим ферментам (ICE). Это семейство включает ряд различных типов протеаз, многие протеазы имеют несколько  обозначений. Семейство цистеин-аспартат протеаз ещё называют каспазами.

Кроме семейства каспаз, в регуляции апоптоза принимает  участие семейство Bcl-2 белков, в котором Bcl-2, Bcl-XL, Ced-9, Bcl-w, и Mcl-1 белки ингибируют апоптоз, а Bcl-2 гомологи (BH) 1-3, Bax подобный белок, Bak, Bok, и состоящие только из BH3 региона, Bad подобный белок, Bid, Bik, Bim, и Hrk выполняют проапоптозную функцию.

Активация DED, DED1 и DED2 вызывает каскадную перестройку и активацию  протеаз ICE / CED-3 семейства. Первым этапом является превращение не активной про-каспазы-8 в активную каспазу-8. Каспаза-8 активирует каспазу-3 и Bid. Bid взаимодействуя с Bax способствует выходу из митохондрий цитохрома C, который активизирует каспазу-9. В  свою очередь активная каспаза-9 приводит к появлению активных каспаз-3, - 6, - 7. В свою очередь активные ICE начинают взаимодействовать с рядом внутриклеточных  субстратов: поли-(АДФ-рибозо) полимеразой (PARP), участвующей в репарации  ДНК и модификации активности некоторых ядерных белков, ламином  В1, топоизомеразой I и Р-актином. Все  члены семейства ICE / CED-3 протеаз содержат каталитический остаток цистеина и  расщепляют субстраты после аспарагиновой  кислоты. Специфическое расщепление PARP, ламина В1, топоизомеразы I и Р-актина под действием ICE-подобных протеаз  на большие и малые фрагменты  приводит клетку к гибели, так как  большие фрагменты этих субстратов и являются активными нуклеазами, которые разрезают хромосомы  на фрагменты. Например, PARP расщепляется CPP32 / Yama на два фрагмента 85 и 24 кДа, из которых апоптоз-специфическим является фрагмент 85 кДа. Активация протеаз ICE / CED-3 семейства может происходить  и под действием фосфолипидов, например, церамидов, которые способны активировать CPP32 / Yama.

Свободный сфингозин  образуемый из церамидов в результате его гидролиза церамидазой так  же активирует ICE-подобные протеазы и  ускоряет апоптоз.Важная роль в осуществлении  апоптоза принадлежит тироксину (Т4).Он регулирует функционирование протеиновой  тирозинкиназы, важного элемента реализации сигнала смерти. При недостатке этого  гормона щитовидной железы происходит подавление апоптоза.

IL-lβ блокирует апоптоз. ICE-подобные протеазы взаимодействуют  с IL-lβ, а не с PARP, ламином  В1, топоизомеразой I и Р-актином.  В результате чего не происходит  образования активных нуклеаз,  и клетка избегает апоптоза.

На взаимодействие TNF-α  и Fas-лигандов с TNF-R и Fas / APO-1(CD95) и проведение апоптотического сигнала оказывают  влияние Bcl и Bax белки. Так белки Bcl семейства: Bcl-2, Bcl-xL и Bcl-xS блокируют выход цитохрома  С из митохондрий и таким образом  предотвращают превращение про-каспазы-9 в активную форму, отменяют атоптотический сигнал. В свою очередь Bax белки способствуют выходу цитохрома С из митохондрий  и образованию активной каспазы-9, которая инициирует продолжение  и активацию апоптотическог каскада, начавшегося с присоединения TNF-α  или Fas-лигандов к TNF-R и Fas / APO-1(CD95). Быть или не быть апоптозу зависит от соотношения Bcl и Bax белков в митохондриях. Преобладание экспрессии белков Bcl семейства  блокирует запуск апоптоза, а преобладание экспрессии Bax белков способствует реализации сигнала смерти.

Апоптоз может регулироваться действием многих внешних факторов, которые ведут к повреждению  ДНК. При невосстановимом повреждении  ДНК путем апоптоза происходит элиминация потенциально опасных для организма  клеток. В данном процессе большую  роль играет ген супрессии опухолей р53. К активации апоптоза также  приводят вирусные инфекции, нарушение  регуляции клеточного роста, повреждение  клетки и потеря контакта с окружающими  или основным веществом ткани. Апоптоз - это защита организма от персистенции поврежденных клеток, которые могут  оказаться потенциально опасными для  многоклеточного организма.

При стимуляции тканей каким-либо митогеном ее клетки переходят в  состояние повышенной митотической активности, которая обязательно  сопровождается некоторой активацией апоптоза. Судьба дочерних клеток (выживут  они или подвергнутся апоптозу) зависит  от соотношения активаторов и  ингибиторов апоптоза:

ингибиторы включают факторы роста, клеточный матрикс, половые стероиды, некоторые вирусные белки;

активаторы включают недостаток факторов роста, потерю связи  с матриксом, глюкокортикоиды, некоторые  вирусы, свободные радикалы, ионизирующую радиацию.

При воздействии активаторов  или отсутствии ингибиторов происходит активация эндогенных протеаз и  эндонуклеаз. Это приводит к разрушению цитоскелета, фрагментации ДНК и  нарушению функционирования митохондрий. Клетка сморщивается, но клеточная  мембрана остается интактной, однако повреждение  ее приводит к активации фагоцитоза. Погибшие клетки распадаются на небольшие, окруженные мембраной, фрагменты, которые  обозначаются как апоптотические тельца. Воспалительная реакция на апоптотические клетки не возникает.

     Автономный механизм апоптоза

     При развитии эмбриона различают три категории автономного апоптоза: морфогенетический, гистогенетический и филогенетический.Морфогенетический апоптоз участвует в разрушении различных тканевых зачатков. Примерами являются:

разрушение клеток в  межпальцевых промежутках;

гибель клеток приводит к разрушению избыточного эпителия при слиянии небных отростков, когда  формируется твердое небо.гибель клеток в дорсальной части нервной  трубки во время смыкания, что необходимо для достижения единства эпителия двух сторон нервной трубки и связанной  с ними мезодермы.

    Гистогенетический апоптоз наблюдается при дифференцировке тканей и органов, что наблюдается, например, при гормональнозависимой дифференцировке половых органов из тканевых зачатков. Так, у мужчин клетками Сертоли в яичках плода синтезируется гормон, который вызывает регрессию протоков Мюллера (из которых у женщин формируются маточные трубы, матка и верхняя часть влагалища) путем апоптоза.

Филогенетический апоптоз  участвует в удалении рудиментарных  структур у эмбриона, например, пронефроса.При  различных состояниях может наблюдаться  как ускорение, так и замедление апоптоза. Несмотря на то, что апоптоз  могут активировать различные факторы, характерные для определенных типов  клеток, однако конечный путь апоптоза регулируется точно установленными генами и является общим, независимо от причины активации апоптоза.

Все факторы, усиливающие  или ослабляющие апоптоз, могут  действовать прямо на механизм гибели клетки или опосредованно, путем  влияния на регуляцию транскрипции.

В некоторых случаях  влияние этих факторов на апоптоз  является решающим (например, при глюкокортикоид-зависимом  апоптозе тимоцитов), а в других не имеет особой важности (например, при Fas - и TNF-зависимом апоптозе). В процессе регуляции принимает участие  большое количество веществ. Наиболее изученными из них являются вещества из семейства bcl-2.

Bcl-2 ген впервые был  описан как ген, который транслоцируется  в клетках фолликулярной лимфомы  и ингибирует апоптоз. При дальнейших  исследованиях оказалось, что  Bcl-2 является мультигеном, который  обнаруживается даже у круглых  червей. Гомологичные гены были  также обнаружены в некоторых  вирусах. Все вещества, относящиеся  к данному классу делятся на  активаторы и ингибиторы апоптоза.

К ингибиторам относятся: bcl-2, bcl-xL, Mcl-1, bcl-w, аденовирусный E1B 19K, Эпштейн-Барр-вирусный BHRF1.К активаторам относятся bax, bak, Nbk / Bik1, Bad, bcl-xS.

Члены этого семейства  взаимодействуют друг с другом. Одним  из уровней регуляции апоптоза является взаимодействие белок-белок. Белки  семейства bcl-2 формируют как гомо - так и гетеродимеры. Например, bcl-2-ингибиторы могут образовать димеры bcl-2-активаторами. Таким образом, жизнеспособность клеток зависит от соотношения активаторов  и ингибиторов апоптоза. Например, bcl-2 взаимодействует с bax; при преобладании первого жизнеспособность клетки повышается, при избытке второго - уменьшается. К тому же белки семейства bcl-2 могут  взаимодействовать с белками, не относящимися к этой системе. Например, bcl-2 может соединятся с R-ras, который  активирует апоптоз. Другой белок, Bag-1, усиливает способность bcl-2 ингибировать апоптоз.

В настоящее время  принято считать, что гены, участвующие  в регуляции роста и развития опухолей (онкогены и гены-супрессоры опухолей), играют регулирующую роль в  индукции апоптоза. К ним относятся:

bcl-2 онкоген, который  ингибирует апоптоз, вызванный  гормонами и цитокинами, что приводит  к повышению жизнеспособности  клетки;

Белок bax (также из семейства bcl-2) формирует димеры bax-bax, которые  усиливают действие активаторов  апоптоза. Отношение bcl-2 и bax определяет чувствительность клеток к апоптотическим факторам и является “молекулярным  переключателем”, который определяет, будет ли происходить рост или  атрофия ткани.

c-myc онкоген, чей белковый  продукт может стимулировать  либо апоптоз, либо рост клеток (при наличии других сигналов  выживания, например, bcl-2)

Ген р53, который в норме  активирует апоптоз, но при мутации  или отсутствии (что обнаружено в  некоторых опухолях) повышает выживаемость клеток. Установлено, что р53 необходим  для апоптоза при повреждении  клетки ионизирующим излучением, однако при апоптозе, вызванном глюкокортикоидами  и при старении, он не требуется.

     Снижение апоптоза

     Продукт р53 гена следит за целостностью генома при митозе. При нарушении целостности генома клетка переключается на апоптоз. Наоборот, белок bcl-2 ингибирует апоптоз. Таким образом, недостаток р53 или избыток bcl-2 приводит к накоплению клеток: эти нарушения наблюдаются в различных опухолях. Изучение факторов регулирующих апоптоз имеет важное значение в разработке лекарственных препаратов, усиливающих гибель клеток злокачественных новообразований.

Аутоиммунные заболевания  могут отражать нарушения в индукции апоптоза лимфоидных клеток, способных  реагировать с собственными антигенами. Например, при системной красной  волчанке наблюдается нарушение Fas-рецепторов на клеточной поверхности лимфоцитов, что ведет к активации апоптоза. Некоторые вирусы повышают свою выживаемость путем ингибирования апоптоза инфицированных клеток, например, вирус Эпштейна-Барра  может воздействовать на обмен bcl-2.

     Ускорение апоптоза

     Ускорение апоптоза доказано при синдроме приобретенного иммунодефицита (СПИД), нейротрофических заболеваниях и некоторых заболеваниях крови, при которых наблюдается дефицит каких-либо форменных элементов. При СПИДе вирус иммунодефицита может активировать CD4 рецептор на неинфицированных Т-лимфоцитах, ускоряя, таким образом, апоптоз, что приводит к истощению клеток данного типа.

     Значение апоптоза в развитии организма и патологических процессах

     Апоптоз играет важную роль в развитии млекопитающих и в различных патологических процессах. Функционирование bcl-2 требуется для поддержания жизнеспособности лимфоцитов, меланоцитов, эпителия кишечника и клеток почек во время развития эмбриона. bcl-x необходим для ингибирования смерти клеток в эмбриогенезе, особенно в нервной системе. Bax необходим для апоптоза тимоцитов и поддержания жизнеспособности сперматозоидов во время их развития. р53 является геном супрессии опухолей, поэтому в эмбриогенезе особой роли не играет, но обязательно необходим для супрессии опухолевого роста. Мыши, у которых отсутствовали оба р53 гена, проявляли чрезвычайно высокую склонность к развитию злокачественных опухолей в результате полного или частичного нарушения апоптоза предопухолевых клеток. Усиленный синтез белка, кодируемого bcl-2 геном, приводит к подавлению апоптоза и, соответственно, развитию опухолей; данный феномен обнаружен в клетках В-клеточной фолликулярной лимфомы.