Методы биохимической диагностики гиповитаминозов

После того как у больного клинически установлена  недостаточность витамина В12, следует  провести дифференциальную диагностику  между экзогенной (алиментарной) недостаточностью, В12-дефицитной анемией, эндогенной симптоматической недостаточностью В12, обусловленной  опухолевым поражением желудка (рак или полипоз), и ботриоцефальной анемией. Очень редко встречающийся в наших условиях экзогенный вариант авитаминоза В12 может диагностироваться при достоверном установлении продолжительного недостаточного поступления цианокобаламина с пищей и при исключении эндогенных нарушений всасывания витамина. При ботриоцефальной анемии практически не наблюдается признаков поражения спинного мозга; характерны симптомы гельминтозов (неприятные ощущения в животе, тошнота, зуд кожи, выраженная эозинофилия, отхождение члеников глистов, яйца глистов в кале). Для выявления или исключения опухоли желудка проводят рентгенологическое исследование его и гастроскопию. Во всех сомнительных случаях проводится стернальная пункция. У больных после травматических операций на желудке и кишечнике (гастрэктомия, субтотальная резекция желудка, резекция тонкой кишки, энтеро-энтероанастомозы и др.) при тяжелых заболеваниях тонкой кишки (спру, терминальный илеит) нужно внимательно выявлять клинические симптомы недостаточности витамина В12, начиная с неспецифических ранних признаков.

Вспомогательное значение в этих случаях имеет  определение концентрации витамина В12 и его метаболитов в крови  и моче. При дефиците цианокобаламина  его содержание в суточной моче ниже 20 нг, а метилмалоновой кислоты —  выше 5 мг, В сыворотке крови концентрация витамина В12 ниже 100 нг/мл. Эти лабораторные исследования проводятся и при подозрении на экзогенное (алиментарное) развитие дефицита витамина В12 и во всех неясных  случаях.

 

Витамин В5(РР)

Для диагностики гиповитаминоза РР определяют содержание метилникотинамида в  моче (в суточной — менее 4 мг, в  часовой — менее 0,3 мг) и уровень пиридиннуклеотидов (НАД и НАДф) в крови (менее 0,3 мкг в 1 мл 1 крови).

Диагноз основан на характерных клинических  проявлениях заболевания, данных биохимических  исследований: характерно содержание Nl-метилникотинамида в суточной моче ниже 4 мг, в часовой моче - ниже 0,3 мг; содержание никотиновой кислоты  ниже 0,2 мг. Снижается содержание в  крови и моче других витаминов  группы В.

 

Витамин Вс

Биохимическим показателем фолиевой недостаточности  может быть количество ФИГК или уроканиновой кислоты в моче. Выведение этих продуктов обмена с мочой резко  увеличивается при фолатной недостаточности  после нагрузки гистидином. Однако увеличение выведения этих метаболитов  с мочой имеет место и при  недостаточности витамина B12, а также  при заболеваниях печени, приводящих к снижению количества ферментов  уроканиназы и формиминотрансферазы в печени, и при возможном врожденном отсутствии последнего. В связи с  этим определение ФИГК в моче после  нагрузки гистидином многими исследователями  рассматривается как тест, не имеющий  ценности для дифференциального  распознавания фолатной и В12-витаминной недостаточности. Специфичность метода может быть повышена одновременным  введением витамина B12.

  В качестве надежного показателя  для дифференциального распознавания  недостаточности витамина В12 и  фолатов может быть использовано  определение в моче метилмалоновой  кислоты. Ее повышенное выведение  отмечается лишь при недостаточности  витамина В12.

  Для диагностических целей часто  определяют содержание фолатов  в тканях и жидкостях организма.  Практически используют два показателя: определение фолатов в сыворотке  и в цельной крови. Самым  ранним и наиболее чувствительным показателем фолиевой недостаточности у человека является снижение уровня фолатов в сыворотке крови. Тяжелые, клинически проявляющиеся формы фолиевой недостаточности могут быть подтверждены определением фолатов в эритроцитах или цельной крови, так как снижение содержания фолатов в эритроцитах наблюдается только при далеко зашедших формах мегалобластической анемии.

  Выявление фолатной недостаточности  на основе биохимических и  микробиологических тестов показало, что она распространена значительно  шире, чем предполагалось ранее.  Высказывается также мнение, что  фолиевая недостаточность является  одной из наиболее распространенных  среди всех болезней витаминной  недостаточности у людей. 

  Кроме мегалобластической анемии, фолатная недостаточность отмечена  при талассемии, гемоглобинопатии, серповидноклеточном малокровии, лейкозах, карциноматозах, ревматоидном артрите,  токсемиях беременности, алкоголизме.  При злокачественных новообразованиях  и гемоглобинопатии мегалобластоз  часто бывает минимальным и  фолатная недостаточность проявляется  только увеличением экскреции  ФИГК после введения гистидина. 

  Поскольку проявление тех или  иных признаков фолиевой недостаточности  в значительной мере зависит  от характера возможных сопутствующих  заболеваний, а также от индивидуальных  свойств организма, специфическая  диагностика должна базироваться  на всестороннем анализе клинических  и лабораторных данных.

  Терапевтический метод выявления  фолиевой недостаточности. Точный  клинический диагноз фолатной  недостаточности может быть установлен  терапевтическим путем. Для этого  больного не менее чем на 10 дней переводят на диету с  возможно низким содержанием  фолатов и витамина B12. Контрольный  период без терапии исключает  возможность спонтанной ремиссии. Затем назначают фолиевую кислоту  в минимальной дозе, способной вызвать четкую гематологическую ответную реакцию. Обычно назначают внутрь 100—200 мкг фолиевой кислоты в день. В случае нарушения всасывания желательно внутримышечное введение препарата. Большие дозы фолиевой кислоты не следует применять, чтобы не вызвать неспецифической ответной реакции и не ухудшить состояние больного, если анемия обусловлена недостаточностью витамина B12, а не фолатов. Для контроля состояния могут быть использованы гематологические показатели: содержание ретикулоцитов и эритроцитов и уровень гемоглобина в периферической крови.

 

Витамин В3

Для определения пантотеновой кислоты  и ее производных в биологических  объектах (кровь, моча, ткани) и пищевых  продуктах широко используют микробиологические методы с применением в качестве тест-организмов Lactobacillus arabinosus или Saccharomycoides ludwigii КМ. Химические методы определения  пантотеновой кислоты основаны на колориметрическом  измерении содержания В-аланина, реакции  с нингидрином или 1,2-нафтохинон-4-сулъфонатом. Для выделения пантотеновой кислоты  и ее производных из биологических  объектов и их разделения используют разнообразные хроматографические методы.

 

Витамин Н(биотин)

При недостаточном поступлении биотина  в организм или недостаточном  образовании его в кишечнике  возникают изменения кожи в виде тяжелых дерматитов, выпадают волосы, поражаются ногти. Очень часто снижается  аппетит, развивается быстрая утомляемость, слабость, наблюдаются мышечные боли, гипер- и парестезии. У человека практически  не встречается.

 

Витамин С (аскорбиновая кислота)

Лабораторное  распознавание гиповитаминоза и  авитаминоза, в основном, заключается  в определении аскорбиновой кислоты  в крови и моче. Содержание ее в плазме снижается очень быстро после исключения витамина из питания. Аскорбиновая кислота исчезает из мочи еще раньше, чем из плазмы. Поэтому  определение ее часового выделения  натощак имеет определенное диагностическое  значение. Содержание аскорбиновой кислоты  в лейкоцитах достигает нулевых  значений только через 4 месяца после  выключения ее из питания, т.е. почти  в то же время, когда появляются клинические  симптомы С-авитаминоза. Таким образом, этот показатель имеет важное значение для диагностики не С-гиповитаминоза, а авитаминоза.

Важное  значение особенно в I стадии заболевания  имеет определение экскреции аскорбиновой кислоты с мочой.

Во II и III стадиях цинги клиническая  симптоматика (гингивит, стоматит, выпадение  зубов, распространенные петехиальные сыпи и кровоизлияния под кожу в мышцы, суставы, остеопороз и др.) в сочетании с анамнестическими данными о неполноценном питании  дает возможность установить правильный диагноз.

Дифференциальный  диагноз проводят с геморрагическими диатезами. При цинге нет существенных изменений в системе свертывания  крови, как при большинстве этих заболеваний. Для геморрагического васкулита не характерны массивные  кровоизлияния в мышцы и суставы, а также тяжелый гингивит.

 

Заключение

В стадиях  гиповитаминоза совокупность клинических  симптомов дефицита определенного  витамина достаточно специфична, но отдельные  симптомы могут совпадать с проявлениями основного заболевания, поэтому  их правильная оценка нередко требует  от врача исходного предположения  о возможности развития у больного данного гиповитаминоза. Диагноз  гиповитаминоза поставить очень  трудно, а зачастую даже невозможно. При гиповитаминозах нет никаких  конкретных специфических симптомов. Люди быстрее устают, легче простужаются, чаще болеют различными заболеваниями, быстрее стареют и умирают.

Важны знания врача о формах патологии  и особенностях питания, которые  могут быть причинами определенных видов витаминной недостаточности. В диагностически трудных случаях  и при необходимости установить субнормальную обеспеченность витаминами используют лабораторные исследования содержания и функции витаминов  в организме.

Диагностика гиповитаминозов чрезвычайно сложна из‑занечеткостисимптомов, сложностилабораторныханализов, даипростоневозможностиврачейзаниматьсяэтойпроблемой. Времяотвременивпечатипоявляютсяпугающиеданныеотом, чточутьлине 80 % населениядаже в самых развитых странах живет в состоянии хронического гиповитаминоза. В это можно поверить, тем более что гиповитаминоз усугубляется хроническими нервными перегрузками и загрязнением окружающей среды.

 

 

 

 

 

Используемая литература

1.Чиркин  А.А. Практикум по биохимии: учебное  пособие/ А.А. Чиркин. – Мн.: новое знание.2002. – 512с.

2.Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник/ Под ред. С.С. Дебова. – М.: Медицина, 1982, 752 с., ил.

3.Биохимия: Учебник / Под ред. Е. С. Северина. - 2 изд - е., испр. - М: ГЭОТАР-МЕД, 2004. - 784 с.: ил.