Иммуноморфологическая оценка эффективности примененения противобруцеллезных вакцин

 

 

2.3. Иммуноморфологические изменения в организме морских свинок  после одно-,  двухкратной иммунизации

 

Выраженные  патогистологические, иммуноморфологические  изменения в органах и тканях морских свинок, привитых вакциной из штамма бруцелл 82-ПЧ, отмечали на месте введения вакцины, а также в регионарных к месту введения прививочного препарата правых паховых и контррегионарных  левых паховых лимфатических узлах и селезенке.

     В  первые сутки после иммунизации в вышеуказанных органах и тканях морфологические изменения обнаруживались лучше при субмикроскопическом исследовании. В лимфоузлах  иммунизированных животных наблюдали повышение, по сравнению с таковыми интактных морских свинок, количества гранулоцитов, нейтрофилов и клеток стромы. В регионарных лимфатических узлах (РЛУ) у части лимфоцитов обнаруживали ядра со складчатой оболочкой, свидетельствующие об активации этих клеток.

      По истечению двух  дней после  вакцинации место инъекции вакцины было отечным, отмечали студенисто- геморрагическую инфильтрацию подкожной клетчатки, выраженное полнокровие сосудов и мелкоточечные кровоизлияния.

     Отмечали  серозно - воспалительный отек  рыхлой клетчатки с очаговым  скоплением нейтрофилов, лимфоцитов  и гистиоцитов. Микроскопически местами наблюдали распад нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов. Кроме того, в воспаленной ткани встречались макрофаги, загруженные гемосидерином. Кровеносные сосуды были полнокровны и расширены, а местами отмечали очаговые скопления эритроцитов.

    Фолликулы  правого пахового лимфоузла (регионарный  к месту инъекции) имели расширенные  герминативные центры, которые содержали  бластные клетки и лимфоциты.  В мякотных тяжах отмечали  большое количество лимфо- и  плазмобластов. Подкапсулярные синусы были сдавлены гиперплазированной  лимфоидной тканью, а мозговые содержали значительное число лимфоцитов. В контррегионарных и отдаленных лимфатических узлах существенные морфологические изменения не отмечали.

По истечению  трех дней после иммунизации патоморфологические изменения на месте введения вакцины, а также в РЛУ, КРЛУ, отдаленных лимфатических узлах и селезенке были почти аналогичны с таковыми, описанными в предыдущий срок исследования. Однако, распад нейтрофильных лейкоцитов и лимфоцитов на месте введения наблюдался местами на значительном протяжении. По всей воспаленной ткани встречали макрофаги, загруженные гемосидерином, которые в местах геморрагий выступали в виде компактных скоплений.

По истечению 1 недели после иммунизации в тканях на месте введения вакцины возникли очаги продуктивного воспаления с небольшими некротическими фокусами. В местах некроза отмечали густое скопление хроматина  ядер распавшихся клеток с наличием среди них небольшого числа сохранившихся нейтрофилов и лимфоцитов. Вокруг некротического очажка обнаруживали обширную зону молодой грануляционной ткани с фокусами диапедезных кровоизлияний, а местами  очаговый выпот фибрина.   

     Введение  вакцины из штамма бруцелл  82-ПЧ вызывало выраженные морфологические  изменения. В почках подопытных морских свинок капилляры сосудистых клубочков были неравномерно налиты, а некоторые клубочки имели лапчатый вид и эндотелий их пролиферировал. Отмечали зернистую дистрофию эпителия  извитых канальцев, очаговые диапездные геморрагии и скопления лимфоидно-гистиоцитарных клеток в строме органа. В сердечной мышце наблюдали полнокровие сосудов и зернистую дистрофию кардиомиоцитов. Активация клеток лимфоидно-гистиоцитарного типа в легких приводила местами к утолщению межальвеолярных перегородок и очаговому скоплению их в перебронхиальной и переваскулярной ткани. Со стороны печени,  проявлялось полнокровием сосудов, зернистой дистрофией гепатоцитов, пролифирацией звездчатых ретикулоэндотелиоцитов. Среди печеночных клеток заметно увеличилось число клеточных элементов, имеющих диплоидные и гиперхромные ядра.  В надпочечниках отмечали расширение коркового вещества за счет гиперплазии клеток пучковой зоны и умеренное кровенаполнение  сосудов [128].

К 10 дню опыта  в тканях на месте введения вакцины обнаруживали очаг грануляционной ткани с небольшими участками кровоизлияний. В мякотных тяжах лимфоузлов обнаруживали значительное количество плазматических клеток различной степени зрелости. Мозговые синусы были расширены, в просвете некоторых из них отмечали нежную сеть фибрина, а в других -незначительное число малых, средних лимфоцитов и макрофагов. В паракортикальной и мантийной зонах фолликулов лимфоузлов происходило повышение активности кислой и щелочной фасфотазы, что указывало на увеличение количества  Т- и  В- лимфоцитов.

    Через  2 недели после вакцинации плазмоклеточно  – макрофагальная реакция   в лимфоузлах всё усиливалась.  Фолликулы лимфоузлов имели расширенные  герминативные центры, мякотные  тяжи были гиперплазированы и  содержали большое количество клеток плазмоцитарного ряда. Встречались вновь формирующиеся вторичные фолликулы. Стенка мелких кровеносных сосудов была в состоянии мукоидного набухания. Активность щелочной и кислой  фосфатазы в лимфоузлах оставалась очень  высокой.

Усиление иммуноморфологических реакций отмечали также в селезенке. Наряду с фолликулами, с расширенными герминативными центрами, встречали вновь формирующиеся лимфоидные фолликулы.

    Через  три недели после введения  вакцины иммуноморфологические  реакции в лимфоузлах подопытных животных были сходны с таковыми, отмеченными на 15 сутки опыта. Разница заключалась в том, что среди клеточных элементов мякотных тяжей лимфоузлов преобладющими были плазмоциты. Последние обнаруживали  и в мозговых тяжах.

Иммуноморфологические процессы в селезенке оставались также на прежнем уровне, но среде клеточных элементов красной пульпы было много плазмоцитов. Наблюдали небольшую фибротизацию перефолликуллярной зоны органа.

В почках,  печени, миокарде и надпочечниках полнокровие  сосудов, зернистая дистрофия паренхиматозных элементов и очаговые скопления мононуклеарных клеток в интерстициальной ткани сохранялись почти на прежнем уровне.

     Через  4 недели после вакцинации в  тканях на месте инокуляции  препарата заметных патоморфологических изменений не отмечали.

     Иммуноморфологические  реакции  в лимфоузлах все  еще оставались хорошо выраженными.  Фолликулы их имели расширенные  герминативные центры, перефолликулярная  зона заметно обеднена клеточными  элементами, мякотные тяжи гиперплазированы, а промежуточные мозговые синусы расширены. В последних обнаруживали скопление эритроцитов, лейкоцитов, макрофагов. Среди плазмоцитов мякотных и мозговых тяжей преобладали зрелые формы.

      В селезенке иммуноморфологические  процессы также оставались хорошо выраженными, а среди плазматических клеток красной пульпы преобладаю-  щими были зрелые формы.

Морфологические изменения в паренхиматозных  органах характеризовались наличием в интерстициальной ткани очаговых скоплений лимфоидно-гистиоцитарных клеток и зернистой дистрофией паренхиматозных элементов.

     Таким  образом, проанализировав  данные  полученные в результате проведения  исследований приходим к выводу, что вакцина из штамма бруцелл       82-ПЧ вызывает выраженные иммуноморфологические  процессы в организме иммунизированных  морских свинок, проявляющиеся усилением функциональной активности иммунокомпетентных клеток в виде лимфоидно - гиперпластической, макрофагальной и плазмоклеточной реакцией, а также фагоцитоза бруцелл вакцинного штамма лимфоцитами и макрофагами лимфоузлов и селезенки, сопровождающийся перестройкой структурных элементов этих клеток, лизисом бактерий в фаголизосомах макрофагов и переводом их в иммуногенную форму, способствуя тем самым формированию напряженного иммунитета.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                                                                           ЗАКЛЮЧЕНИЕ

 

1.  Вакцина  из  штамма бруцелл  82-ПЧ в дозе 2 млрд.м.т. вызывает выраженные  иммуноморфологические      процессы      в     организме     морских     свинок, проявляющиеся   фагоцитозом   бруцелл    вакцинного   штамма  макрофагами и лимфоцитами    лимфоузлов    и   селезенки,   усилением   функциональной  активности     иммунокомпетентных     клеток     в виде плазмоклеточной, лимфоидно-гиперпластической   и   макрофагальной   реакциями   и   лизисом  бактерий    в    фаголизосомах     и     переводом    в    иммуногенную    форму.

2.  Вакцина   из   штамма  бруцел   82-ПЧ против бруцеллеза   является   достаточно   иммуногенной, способствует повышению количества   иммунокомпетентных    клеток    в периферической   крови,    образованию    в   лимфоидных   органах большого количества  антителообразующих клеток,  их  созревание  и переходу  в более зрелые  формы.

3. Преимущественным    отличительным     признаком     вакцины    из    штамма    82-ПЧ против бруцеллеза от других противобруцеллезных           прививочных препаратов,  является  его   не   абортогенность   у животных и отсутствие поствакцинальных изменений в    иммунокомпетентных    органах    плодов   и    формирование   напряженного   иммунитета.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

СПИСОК  ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

 

1. «Динамика гематологических показателей  в крови животных при применении противобруцеллезных вакцин» «Сборник научных трудов магистрантов» №1, 2010 г.

      2.«Бруцеллезге қарсы вакциналарды қолданған кезде теңіз доңыздарының органдарындағы иммундық компетентті жасушалардың динамикасының деңгейі». «Сборник научно-практической конференции среди студентов и магистрантов»  №1, 2010 г.

     3. «Иммуноморфологические исследования органов и тканей при применении противобруцеллезных вакцин из штаммов бруцелл 82, 82-ПЧ» «Білім және ғылым»  №2, 2010 г. Кушалиев.К.Ж.

    4. «Динамика уровня содержания иммунокомпетентных клеток морских свинок при применении противобруцеллезных вакцин», «Білім және ғылым»,  №1 2010 г. Кушалиев.К.Ж.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

~ ~