Количественное определение флавоноидов и фенолокислот в надземной части соссюреи спорной

Dо- оптическая плотность ГСО кверцетина (среднее из трех измерений), равное 0,400;

Mо- масса ГСО кверцетина, г;

М- масса  навески сырья, г;

W- влажность, %.

 

 

 

Таблица 11 – Содержания флавоноидов в экстракте из надземной части соссюреи спорной разного года сбора.

№ опыта	Сырье 2008 г сбора Срок хранения 4 года		Сырье 2009 г сбора Срок хранения 3 года		Сырье 2010 г сбора Срок хранения 2 года
	A	X	A	X	A	X
1	0,195	1,061	0,206	1,121	0,234	1,273
2	0,200	1,088	0,204	1,110	0,230	1,252
3	0,185	1,007	0,200	1,088	0,220	1,197
4	0,190	1,034	0,205	1,116	0,215	1,170
5	0,180	0,980	0,198	1,0778	0,210	1,143
6	0,181	0,985	0,195	1,061	0,208	1,132
Ā /	0,188	1,026±0,052	0,201	1,096±0,052	0,219	1,195±0,052
Параметры статистической обработки	σ2= 0,00277; σ= 0,05265; σх=0,0215; Ip=0,052; А = 4,35

 

2.Определение фенолокислот в надземной части соссюреи спорной.

 

Ранее из водно-этанольного экстракта соссюреи спорной нами была выделена кофейная кислота, кроме этого максимум поглощении экстракта четко выражен в области 325 нм (рис. 5), характерной для гидроксикоричных кислот, что позволяет вести определение суммы фенолокислот в пересчете на кофейную кислоту (E=782).

1

2

200

300

400

 

Рис. 5. УФ-спектры растворов ГСО  кофейной кислоты (2) и экстракта из надземной части соссюреи спорной на 70% этаноле (1).

2.1. Выбор оптимальной концентрации этанола

Для проведения исследований готовили три пробы: по 1,0 г сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм помещали в колбы со шлифом вместимостью 100 мл, экстрагировали этанолом различной концентрации (20, 40, 70 и 95% соответственно) трижды по 30 мин на водяной бане при температуре 80 °С. Извлечения объединяли и фильтровали через бумажный фильтр («Красная лента») в мерные колбы вместимостью 100 мл, доводили соответствующим этанолом до метки (раствор А). 0,5 мл раствора А (аликвота) помещали в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводили 95% этанолом до метки. Оптическую плотность измеряли на спектрофотометре «СФ2000» при l 325 нм.

В соответствии с результатами измерений, оптимальной  для извлечения фенолкарбоновых кислот является концентрация этанола 70% (табл. 14).

Таблица 12 – Зависимость содержания фенолкарбоновых кислот в экстракте соссюреи спорной от концентрации этанола

Концентрация этанола, %	Оптическая плотность			Среднее значение
20	0,684	0,723	0,715	0,707±0,031
40	0,808	0,827	0,810	0,815±0,016
70	0,835	0,819	0,840	0,855±0,046
95	0,630	0,567	0,544	0,580±0,067

2.2. Определение содержания фенолокислот в надземной части

соссюреи спорной

Методика определения. Аналитическую пробу сырья массой 1,0 г (т.н.), измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2-3 мм помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, экстрагируют 70% этанолом трижды по 45 мин на водяной бане при температуре 80 °С. Извлечения объединяют и фильтруют через бумажный фильтр («Красная лента») в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят 70% этанолом до метки (раствор А). 0,5 мл (аликвота) полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят 95% этанолом до метки. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при l 325 нм.

Расчет  процентного содержания фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту осуществляют по формуле:

Х _{(%)  =}     D · 100 · 25 · 100               

                 Ε_к.к. · М ·(100-W) · 0,5     

где  D- оптическая плотность испытуемого раствора;

Ε_к.к.- показатель удельного поглощения кофейной кислоты;

М- масса  навески сырья, г;

W- влажность, %.

Результаты измерений представлены в таблице 13.

 

 

Таблица 13 – Содержания фенолкарбоновых кислот в экстракте из надземной части соссюреи спорной разного года сбора.

№ опыта	Сырье 2008 г сбора Срок хранения 4 года		Сырье 2009 г сбора Срок хранения 3 года		Сырье 2010 г сбора Срок хранения 2 года
	Ā	X	A	X	A	X
1	0,755	5,152	0,835	5,698	0,827	5,643
2	0,766	5,227	0,819	5,589	0,813	5,548
3	0,718	4,899	0,840	5,732	0,818	5,582
4	0,784	5,349	0,824	5,623	0,835	5,698
5	0,786	5,363	0,833	5,684	0,875	5,971
6	0,723	4,934	0,868	5,923	0,894	6,100
Ā /	0,755	5,154±0,107	0,837	5,708±0,107	0,844	5,757±0,107
Параметры статистической обработки	σ2= 0,01148; σ= 0,10713; σх=0,0437; Ip=0,107; А = 1,86

 

Выводы

 

 

В результате проделанной работы:

1. Разработаны методики количественного определения флавоноидов и фенолокислот в экстракте из надземной части соссюреи спорной.
2. Содержание флавоноидов в пересчете на рутин составило: 0,71±0,075; в пересчете на кверцетин 1,195±0,052.
3. Определено содержание гидроксикоричных кислот, что составило 5,757±0,107 в пересчете на кофейную кислоту.

 

Список  литературы

1. Басаргин Д.Д. Флавоноиды некоторых дальневосточных видов  соссюрей Saussurea DC.(Asteraceae) // Тез. докл. Всесоюз. науч. конф. Результаты и перспективынаучных исследований в области создания лекарственных средств из растительного сырья. М., 1987. – С.32-33.
2. Верещагин В.Н., Соболевская К.А., Якубова А.И. Полезные растения Западной Сибири, М., 1959. – 347 с.
3. Волхонская, Т.А. Обследование растений горного массива Монгун-Тайга и нагорья Сангилен на содержание флавоноидов // Растит.рес. / Т.А. Волхонская, В.М  Ханминчун., О.И.  Фролова – 1983. – Т.19, вып. 4. – С. 455-464.
4. Ворошилов В.Н. Поиски нового лекарственного растительного сырья. – М.: 1941. – С. 255.
5. Дощинская Н.В. Анатомическое строение Saussurea salicifolia (L.) DC./ Некоторые вопросы фармакогнозии дикорастущих и культивир. раст. Сибири. Томск, 1969. – С. 149.
6. Дикорастущие полезные растения России  / Под ред. А.А. Буданцева, Е.Е. Лесиовской. – СПб.: Изд-во СПХФА, 2001. – 663 с.
7. Крылов Г.Р., Степанов Э.В. Зеленая аптека Кузбасса. – Кемерово: Кн. Изд-во, 1979. – 230 с.
8. Куваев, В.Б. Предварительная химическая оценка лекарственных растений тибетской медицины, произрастающих в Забайкалье / В.Б. Куваев, К.Ф.  Блинова / Вопр.фармакогнозии  – 1961. – Вып.1. – С. 113-162.
9. Куприянов А. Н. Конспект рода Saussurea DC. Флора Алтайского края. // Ботан. Исслед. Сибири и Казахстана. Сборник научных статей гербарий им. В. В. Сапожникова. – Барнаул. 1996. – Вып. 2 – С. 20-29.
10. Лавренов В.К., Лавренова В.Б./ Полная энциклопедия лекарственных растений. Т II. – СПб.: «Издательский дом «Нева», М.: «Олма-Пресс», 1999 – 816 с.
11. Липшиц С. Ю., Род Соссюрея — Saussurea DC Горькуша (Saussurea) // Флора СССР, т. 27, М. - Л., 1962. – С. 361 – 537.
12. Липшиц С. Ю.  Род   Saussurea  DC / СЮ. Липшиц. - Л.: Наука, 1979. – 282 с.
13. Литвиенко В.М., Максютина Н. П., Колесников Д.Г. Получение полиамида / В. М. Литвиненко, Н. П. Максютина, Д. Г. Колесников // Медицинская промышленность СССР – 1962. – №3. – С. 40-43.
14. Нурмухаметова К.А. Исследование некоторых видов соссюреи как противопаразитарного средства / К.А. Нурмухаметова: Автореф. дисс. канд. фарм. наук. - Пермь, 2000. – 23 с.
15. Попов М. Г. Флора Средней Сибири. Т. 2. М. – Л.: Изд-во А Н СССР, 1959 – С. 755-765.
16. Постников Б.А. К изучению биологических и морфологических особенностей сибирских видов рода Saussurea DC // Комплексное изучение полезных растений Сибири. Новосибирк, 1974. – С. 56-61.
17. Постников Б. А. Фитохимическое изучение сибирских видов рода Saussurea DC. В кн.: Комплексное изуч. полезных раст. Сибири. – Новосибирск: Наука, 1974. – С. 157-162.
18. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. СПб.: Наука, 1993. С. 165-170.
19. Сергиевская Л. П. Saussurea DC. – Соссюрея. В кн.: Крылов П. Н. Флора Сибири. 12(доп.), ч. 2 – Томск, 1964. – С. – 3497 – 3500.
20. Телятьев В.В. Полезные растения Центральной Сибири. – Иркутск, 1985. – 383 с.
21. Федорова В.С. Соотношение содержания аскорбиновой кислоты и флавоновых веществ в дикорастущих растениях Алтая / В.С. Федорова / Растит. ресурсы Сибири, Урала и Д. Востока. – Новосибирск, 1965. – С.70-73.
22. Филатова Н.С. Соссюрея (горькуша) – Saussurea DC. / В книге: Иллюстрированный определитель растений Казахстана. – Алма-Ата: Наука, 1972. – Т.2. – С. 397-404.
23. Флора Сибири Т.13.: Аsteraceae / сост. И. М. Красноборов, М. Н. Ломоносова, Н. Н. Тупицына и др., Новосибирск: Наука, 1997. – 472 с
24. Химический анализ лекарственных растений. / Под ред. Н. И. Гринкевич, П. П. Софронич. – М.: Изд-во Высшая школа, 1983. – С. 176.
25. Хроматография на бумаге. / Под ред. И. М. Хайс, К. Мацек. – М.: 1962. – 849 с.
26. Шишкина Е.С., Никитин Ю.П., Соболевская К.А. и др. Исследов. лекарств. пр-тов природ. и синтетич. происхожд. Томск, 1975. – С. 90-92.
27. Harborne, J. E. The Flavonoilds / J. E. Harbone, T. J. Mabry, H. Mabry. – London: Chapman and Hell, 1975. – 1204 p.
28. Hörhammer, Wagner, Jzquiedo et al. – Arch. Parm (Weinheim), 1958, Bd. 291/63. S. 269.
29. Hörhammer W., Wagner J. // Pham. Ztg 1959. Bd. 104. S.783.
30. Hörhammer W., Wagner J. // Arch. Pharm., 1960. Bd 293/65. S. 169.
31. Kassmann W., Endres J., Pauckner T. et al // Chem. Ber. 1957, Bd 90. S. 1125.
32. Mabry T.J. The Systimatic Identification of Flavonoids/ T.J Mabry, K. R. Markham M. B. Tomas. – Springer Verlag: Berlin, Heidel berg, New York. 1970. – 354 p.