Вирус инфекционной анемии лошадей

 

РЕФЕРАТ

по дисциплине «Вирусология и биотехнология»

раздел частная ветеринарная вирусология

«ВИРУС ИНФЕКЦИОННОЙ АНЕМИИ ЛОШАДЕЙ»

 

 

 

Исполнитель:

Студент 3 курса ФВМ (ВСЭ),

Группа № 18

Мелкова Е.А.

 

 

 

 

Москва 2014

СОДЕРЖАНИЕ

1.Введение...........................................4

2.Характеристика вируса..............................5

2.1.Таксономия вируса................................6

2.2.Морфология вируса................................6

2.3.Этапы репродукции................................7

2.4.Культивированиее вируса..........................9

3.Диагностика болезни вызываемой этим вирусом........9

3.1.Постановка предварительного  диагноза.............9

3.1.1.Эпизоотологические данные......................9

3.1.2.Патогенез.....................................10

3.1.3.Клинические признаки..........................11

3.1.4.Патологоанатомические  изменения...............13

3.2. Виды патологического материала.................14

3.3. Этапы лабораторной  диагностики.................15

3.3.1.ПЦР (полимеразно-цепная  реакция)..............15

3.3.2.РНГА (реакция непрямой  гемагллютинации).......16

3.3.3.РИФ (реакция иммунофлуоресценции).............18

3.3.4.Биопроба......................................20

4.Профилактика и меры  борьбы........................21

5.Заключение........................................23

6.Список литературы.................................24

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1.Введение

  Инфекционная анемия лошадей (лат. — Anemia infectiosa equorum; англ. — Equine infectious anemia; ИНАН) — болезнь однокопытных, характеризующаяся поражением кроветворных органов, рецидивирующей лихорадкой, септическими явлениями, геморрагическим диатезом, анемией с уменьшением содержания гемоглобина и числа эритроцитов, ускоренным их оседанием, упадком сил и длительным вирусоносительством .

  Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб

  Впервые ИНАН описал во Франции Лигаей (1843). В 1859 г. Ангиннард экспериментально доказал заразный характер болезни путем введения крови больных анемией здоровым лошадям. Карре и Балле (1904) установили вирусную природу болезни и доказали, что возбудитель содержится в крови и органах больного животного. В 1969 г. Коно выделил вирус в культуре лейкоцитов. В России Помудин сообщал о случаях заболевания лошадей ИНАН в 1910 г. Я.Е. Коляков и соавт. (1932) впервые разработали методы диагностики ИНАН.

  Болезнь была широко распространена в периоды Первой и Второй мировых войн. В последнее время, по данным МЭБ, болезнь встречается в США, Австралии, Японии, Индии, в странах Африки, Европы, а также в странах СНГ и в России.

Коневодство стран, где регистрируют инфекционную анемию, терпит большой экономический ущерб. Летальность при первичных вспышках болезни колеблется от 20 до 80 %. Особенно больших расходов требует проведение сложных мероприятий по диагностике, профилактике и ликвидации болезни.

2.Характеристика вируса

  Устойчивость вируса к физико-химическим факторам. Вирус инфекционной анемии лошадей может долго переживать в организме однокопытных животных и относительно устойчив к внешней среде. Солнечные лучи инактивируют его через 1—3 часа. Кипячение убивает вирус, мгновенно. Прогревание крови, содержащей вирус, при температуре 59—60° в течение двух часов, полностью инактивирует возбудителя. Вирус в сыворотке крови, консервированной хинозолом, погибает за 2 часа, если прогревать ее при 58°. Вирус инфекционной анемии лошадей чрезвычайно устойчив к низким температурам. Вирус, содержащийся в сыворотке крови, подвергнутой пятикратному замораживанию при температуре минус 72—73° и оттаиванию при 40°, сохранял свои вирулентные свойства. Лиофилизированная кровь больной лошади сохраняла патогенные свойства в течение 117 месяцев, а сыворотка крови — в течение 31 месяца. В инфицированном сене вирус погибает при температуре 10—15° за 120 дней, а при 18—20° — за 98 дней. В водопроводной воде вирус утрачивает вирулентность через 219 суток. В навозе при правильной биотермической обработке вирус погибает через 30 суток. Вирус инфекционной анемии лошадей довольно устойчив к воздействию различных химических средств. Глицерин ослабляет его после 4-месячного контакта и полностью инактивирует через 7 месяцев.

   В 4%-ный раствор  формалина инактивирует вирус  в течение 5 минут, но вирус можно  реактивировать через 15 минут 2%-ным  раствором аммиака; 0,5%-ный раствор  фенола обезвреживает вирус через 10 месяцев. Вирус сохраняет свою активность при pH от 2,5 до 12,0, устойчив к трипсину.

 

2.1.Таксономия вируса

РНК-содержащий вирус, относящийся к роду Lentivirinae, семейству Retroviridae. Вирус обнаруживает высокую степень полиморфизма. Чаще всего вирионы сферической формы, со средним диаметром 90—140 нм, имеют двухконтурную оболочку. В вирионе выявлено два серологически реагирующих антигена — растворимый и клеточно-ассоциированный, которые выявляются в РДП. Вирус обладает гемагглютинирующим свойством, содержит обратную транскриптазу.

 

2.2.Морфология вируса

Вирус инфекционной анемии лошадей имеет конический капсид длиной около 120 нм и шириной 60 и 20 нм соответственно на широком и узком конце. В его структуре обнаружено 6 основных белков с молекулярной массой от 9 до 90 кД и 4 минорных полипептида. В состав наружного слоя оболочки вирионов входит 2 гликопротеина gp90 и gp45, не связанные между собой дисульфидными связями. Определена полная последовательность нуклеотидов в геномной РНК вируса инфекционной анемии лошадей, имеющей длину 8200 нуклеотидов. У него, как и у ВИЧ, важную роль в регуляции экспрессии играет ген tat; мРНК tat состоит из 3-х экзонов: первые 2 генома трансактиваторы tat, а 3-й, вероятно, кодирует белок rev. У изолята МА-1, характеризующегося отсутствием вирулентности, определена последовательность нуклеотидов в 3-концевой половине геномной РНК вируса. По сравнению с изолятом Войминг в составе области z3 у изолята МА-1 имеется последовательность длиной в 66 нуклеотидов. В этой области локализован мощный усилитель транскрипции. Предполагается, что авирулентность МА-1 связана с этими изменениями в последовательности области z3 длинного концевого повтора в геномной РНК.

2.3.Этапы репродукции

Адсорбция

Вирус адсорбируется на определенных участках клеточной мембраны — так называемых рецепторах. Клеточные рецепторы могут иметь разную химическую природу, представляя собой белки, углеводные компоненты белков и липидов, липиды.

Проникновение в клетку

Существует два способа проникновения вирусов животных в клетку: виропексис и слияние вирусной оболочки с клеточной мембраной. При виропексисе после адсорбции вирусов происходят впячивание участка клеточной мембраны и образование внутриклеточной вакуоли, которая содержит вирусную частицу. Вакуоль с вирусом может транспортироваться в любом направлении в разные участки цитоплазмы или ядро клетки. Процесс слияния осуществляется одним из поверхностных вирусных белков капсидной или суперкапсидной оболочки.

Биосинтез компонентов вируса

Проникшая в клетку вирусная нуклеиновая кислота несет генетическую информацию, которая успешно конкурирует с генетической информацией клетки. Она дезорганизует работу клеточных систем, подавляет собственный метаболизм клетки и заставляет ее синтезировать новые вирусные белки и нуклеиновые кислоты, идущие на построение вирусного потомства.

Формирование (сборка) вирусов

Синтезированные вирусные нуклеиновые кислоты и белки обладают способностью специфически «узнавать» друг друга и при достаточной их концентрации самопроизвольно соединяются в результате гидрофобных, солевых и водородных связей.

Выход вирусов из клетки

Различают два основных типа выхода вирусного потомства из клетки. Первый тип — взрывной — характеризуется одновременным выходом большого количества вирусов. При этом клетка быстро погибает. Такой способ выхода характерен для вирусов, не имеющих суперкапсидной оболочки. Второй тип — почкование. Он присущ вирусам, имеющим суперкапсидную оболочку.

2.4.Культивирование вируса

Применяют метод биопробы на живых чувствительных к предполагаемому вирусу системах:

- Заражение лабораторных  животных : кролики,молодые белые мыши;

- В первичных культурах  клеток: куриных эмбрионов, почек крупного рогатого скота, свиней, ягнят;

- В перевиваемых клетках: HeLa, КЭМ-Ла, L, ПЭС, где он вызывает образование некротических бляшек.

- Вразвивающихся куриных эмбрионах, что сопровождается поражением ХАО и гибелью эмбриона через 24-96 ч.

3.Диагностика болезни  вызываемой этим вирусом.

3.1. Постановка предварительного  диагноза.

3.1.1. Эпизоотологические  данные.

В естественных условиях инфекционной анемией болеют лошади, ослы и мулы. Источником возбудителя инфекции служат больные животные. Лошади с латентным течением болезни могут быть вирусоносителями в течение 10 лет и более. Из организма больной лошади вирус выделяется с секретами и экскретами, содержащими белок: мочой, калом, носовой слизью, молоком. Факторами передачи служат корма, вода, навоз, подстилка и другие инфицированные объекты. Основной путь заражения — трансмиссивный — через кровососущих насекомых, особенно слепней, в слюне которых вирус сохраняется длительное время. Здоровые лошади могут заболевать инфекционной анемией в результате поступления в организм через кожу даже 0,01 мл зараженной крови. Это обстоятельство позволяет считать кровососущих насекомых (слепней, комаров, мух-жигалок) основным фактором передачи возбудителя инфекции. Этим и объясняется тот факт, что болезнь чаще регистрируется в летнее время (ярко выраженные сезонность и стационарность), в долинах и поймах рек, в лесисто-болотистых местностях. Кроме того, массовое заболевание лошадей наблюдается в годы с жарким и сухим летом.

Вспышка инфекционной анемии обычно продолжается 3-5 мес. Вначале обнаруживают лошадей, у которых болезнь проявляется остро, в дальнейшем превалируют случаи хронического и латентного течения. Через 1-2 года случаев выраженной болезни не регистируют, но многие животные остаются вирусоносителями.

3.1.2.Патогенез

Вирус проникает в организм восприимчивых животных главным образом парентерально и разносится по всем органам и тканям. Особенно интенсивно размножается в костном мозге и крови, вызывая угнетение эритропоэза и гемолиз части эритроцитов во время приступа лихорадки. Через 5 дней после заражения число эритроцитов в 1 мкл крови уменьшается до 1,5...3 млн [(1,5...3,0) 1012/л), в результате показатель гематокрита и содержание гемоглобина уменьшаются на 50%. Уже через 24 ч после заражения скорость оседания эритроцитов (СОЭ) значительно увеличивается. В результате ЦПД вируса на клетки кроветворных органов в крови больных лошадей появляется большое количество чужеродного белка (тканевого антигена), который и индуцирует аллергическое воспаление тканей и усиленную продукцию антител против этих антигенов. Вследствие этого вирус инфекционной анемии присутствует в крови в виде иммунного комплекса вирус + антитело.

3.1.3.Клинические  признаки

Инкубационный период длится чаще от нескольких дней до месяца. Различают сверхострое, острое, подострое и хроническое течение болезни. В развитии инфекционного процесса характерна определенная цикличность с чередованием периодов обострения (рецидивов) и затухания (ремиссий), что создает в конечном счете многообразие клинического ее проявления.

При сверхостром течении отмечают быстрый подъем температуры тела, геморрагический гастроэнтерит, асфиксию, сердечную слабость, атаксию, параличи задних конечностей и гибель животных через 1-2 дня.

Острое течение болезни также характеризуется лихорадкой (41-42 °С), угнетением, нарушением сердечной деятельности, исхуданием при сохраненном аппетите, набуханием и бледностью конъюнктивы с наличием на ней кровоизлияний, отеками в области живота, препуция, конечностей, шаткостью походки, одышкой, быстрым развитием анемии. Кровь становится водянистой (разжижение), число эритроцитов уменьшается до 1 млн в 1 мкл (1 • 1012/л). Содержание гемоглобина снижается до 35-50 г/л, СОЭ повышена (70...80 мм в первые 15 мин). Продолжительность болезни 1-3 нед, иногда 1 мес, после чего животные погибают.

Подострое течение болезни длится 2-3 мес, сопровождается ремиттирующей лихорадкой и такими же симптомами в период рецидива, как при остром течении. В период ремиссии указанные признаки постепенно исчезают и животные выглядят здоровыми. Чем чаще и продолжительнее приступы лихорадки, тем быстрее истощаются защитные силы организма, и животные в конце концов погибают.

Хроническое течение болезни чаще является продолжением подострого. Оно характеризуется чередованием лихорадочных периодов (через 1-3 дня) и продолжительных периодов покоя (ремиссии) длительностью до нескольких месяцев. Во время рецидивов наблюдают те же симптомы, что и при остром течении болезни: утомляемость, одышку, сердцебиение, потливость, тремор мышц, исхудание и гибель животного.

Латентное течение инфекционной анемии отмечают обычно в стационарно неблагополучных пунктах у резистентных лошадей. Для него характерны резкие и кратковременные подъемы температуры тела. Такие животные внешне кажутся здоровыми, но являются вирусоносителями и представляют большую опасность для окружающего поголовья, служат источником возбудителя инфекции. Болезнь может длиться годами, проявляясь иногда лишь заметным исхуданием, быстрой утомляемостью и учащенным сердцебиением при физической нагрузке. В организме латентно больных лошадей вирус может персистировать до конца жизни животного.

3.1.4.Патологоанатомические  изменения

На вскрытии у животного, павшего после острого течения болезни, отмечают септические явления. Наблюдаются исхудание, желтушный оттенок конъюнктивы, слизистой оболочки носа. Подкожная и межмышечная клетчатка желтушная, пронизана кровоизлияниями, с зонами студневидного серозно-геморрагического инфильтрата. Лимфатические узлы, особенно портальные и почечные, набухшие, сочные. Селезенка сильно увеличена (спленомегалия), кровенаполнена, с кровоизлияниями под капсулой, пульпа дряблая. Печень увеличена, дряблая, мозаичного цвета. Сердце увеличено, миокард серо-глинистого цвета. В желудочно-кишечном тракте геморрагическое воспаление слизистой оболочки с кровотечениями в полость.