Шпаргалка по "Микробиологии"

Патогенез. В организме здорового человека, менингококки с помощью фимбрий прикрепляются к клеткам эпителия слизистой носоглотки. Капсула обеспечивает им устойчивость к фагоцитозу и инвазивные свойства.

Клинически менингококковая инфекция проявляется по-разному. Различают 3 основные формы: назофарингит, менингит и менингококкемию. Возникновение заболевания и клинические проявления зависят от состояния микроорганизмов и от свойств менингококков, их вирулентности.

Путь распространения возбудителя  в организме – гематогенный. Распространение микроорганизмов по тканям обеспечивают гиалуронидаза и нейраминидаза. Возникающая бактериемия сопровождается массивным распадом микробных клеток, вследствие чего возникает токсинемия. Чем больше эндотоксина (ЛПС клеточной стенки) циркулирует в организме заболевшего, тем тяжелее протекает болезнь. При массовой гибели большого числа менингококков и одновременном высвобождении эндотоксина часто наступает бактериальный или эндотоксический шок: поражение сосудов, свертывание в них крови, гипоксия, ацидоз.

Генерализация менингококковой инфекции может быть вследствие снижения сопротивляемости организма при вирусных инфекциях (особенно грипп), травмах и других воздействиях, изменяющими иммунологический статус организма, создающими иммунодефицитное состояние. Т.о., в патогенезе менингококковой инфекции сочетаются септические и токсические процессы + аллергические реакции.

Иммунитет после перенесенного заболевания (генерализованные формы) формируется прочный. Повторные заболевания возникают редко. В сыворотке крови больных обнаруживаются антимикробные (бактерицидные) АТ, которые обеспечивают защиту от последующего заболевания.

Лабораторная диагностика  менингококковых заболеваний основана на бактериоскопии выделеной культуры и биохимической идентификации Neisseria meningitidis. Материал для исследования – спинномозговая жидкость (СМЖ), кровь и отделяемое носоглотки, взятое тампоном из глубоких отделов позади мягкого нёба. Забор материала желательно проводить до начала антибактериальной терапии.

В окрашенных мазках крови или отделяемого  из носоглотки обнаруживают грамотрицательные одиночные кокки или диплококки, что значительно облегчает распознавание Neisseria meningitidis при характерной клинической картине. Грамотрицательные парные кокки в окрашенных по Граму мазках СМЖ больного с неврологической симптоматикой указывают на менингококковую этиологию заболевания. Следует помнить, что обнаружение Neisseria meningitidis в мазках СМЖ затруднено, и в этих случаях диагноз менингококкового менингита подтверждают обнаружением АГ Neisseria meningitidis в реакциях латекс-агглютинации или встречного иммуноэлектрофореза. В период менингококцемии грамотрицательные диплококки могут быть обнаружены в окрашенных мазках из соскобов петехий, а также в лейкоцитах периферической крови.

Посев материала для получения  культуры производят на твёрдые или  полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь или асцитическую жидкость. Культуры инкубируют в течение 18-24 ч. при 37°С в сосуде со свечой или специальном термостате с повышенным содержанием (8-10%) СО₂.

Оксидаза-положительные колонии предположительно рассматривают как принадлежащие к видам Neisseria.

Наличие в культуре Neisseria meningifidis подтверждают образованием уксусной кислоты при ферментации глюкозы и мальтозы (но не лактозы, сахарозы и фруктозы).

Принадлежность к серогруппам определяют серологически (РА).

Профилактика и лечение. Для специфической профилактики используют менингококковую химическую вакцину (из ПС АГ серогрупп А и С), эффективна при иммунизации людей в коллективах, где широко распространено носительство менингококков этих серогрупп.

Препарат выбора - бензилпенициллин, также эффективны полусинтетические пенициллины (ампициллин, оксациллин). Более оптимально назначение антибиотиков в сочетании с диуретиками. При непереносимости пенициллинов назначают левомицетин или рифампицин. Антимикробную терапию следует сочетать с симптоматическими средствами, корригирующими водно-солевой и кислотно-щелочной баланс, а также с седативными средствами и глюкокортикоидами.

13. Нейссерии. Лабораторная диагностика  гонореи.

ГОНОКОККИ. N. gonorrhoeae.

Морфология. Имеют форму, сходную с менингококками, – похожи на кофейные зерна, располагаются парами, вогнутыми поверхностями друг к другу. В мазках из гноя располагаются внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоза). Под влиянием лекарственных веществ становятся крупными шарами или, наоборот, мелкими зернами. Под действием пенициллина переходят в L-форму.

Для культивирования гонококков на питательных средах требуется добавление к ним человеческого белка (сыворотки, крови или асцитической жидкости). Растут лучше при содержании в  атмосфере 3–10% СО₂. На асцит-агаре образуют прозрачные колонии с ровными краями и блестящей поверхностью.

БХ свойства слабо выражены – из углеводов расщепляют только глюкозу, образуют каталазу и оксидазу. Протеолитической активностью не обладают.

АГ структура изменчива.

Экология и распространение. Единственный хозяин – человек. Вне организма человека гонококки быстро погибают, не выдерживая высыхания, охлаждения, высокой температуры. Но в толстой капле гноя на влажных предметах гонококки могут оставаться жизнеспособными в течение суток. Чувствительны к дезинфектантам (хлоргексидин, фенол) и к антибиотикам – пенициллину, тетрациклину, эритромицину. Однако высокая заболеваемость гонореей в последние годы и самолечение больных привели к широкому распространению устойчивых к сульфаниламидам и антибиотикам гонококков.

Патогенез. Передается от больного человека половым путем, реже – через предметы обихода (губки, полотенца и др.). Наличие фимбрий обеспечивает адгезию при контакте с рецепторами эпителиальных клеток мочеполовых путей. Соединяясь с ворсинками цилиндрического эпителия слизистой оболочки уретры (у женщин ещё и эндоцервикального канала), гонококки проникают внутрь клеток путем эндоцитоза. Возникает острый уретрит, цервицит. У женщин, помимо матки, поражаются придатки (трубы, яичники), у мужчин – семенные пузырьки, предстательная железа. Повреждающим началом является эндотоксин – ЛПС клеточной стенки.

Возможна и экстрагенитальная  локализация гнойно-воспалительного  процесса (в прямой кишке, глотке), осложнения (артрит, эндокардит, менингит, фарингит), а также гонококковая септикопиемия.

Гонококки вызывают конъюнктивит – бленнорею у новорожденных – при прохождении родовых путей больной гонореей матери.

Иммунитет. Образующиеся АТ не обладают защитными свойствами, клеточный иммунитет не формируется.

Лабораторная диагностика. Бактериоскопический метод. У мужчин исследуется отделяемое уретры, у женщин -- отделяемое уретры, шейки матки и прямой кишки. Из материала готовят мазки, окрашивают по граму или метиленовой синькой. Обнаружение при микроскопировании бобовидных Гр– диплококков внутри лейкоцитов, дает основание ставить диагноз «гонорея». Если обследуемый больной уже лечился антибиотиками, сульфаниламидными препаратами, то возможны измененные формы возбудителя, что следует учитывать при микроскопии мазков.

При отсутствии гонококков в мазках проводится бактериологическое исследование – выделение и идентификация культуры возбудителя. Гнойный уретрит могут вызывать и другие микроорганизмы: стафилококки, кишечная палочка, хламидии, микоплазмы и др. Одновременно с гонореей могут возникать урогенитальный хламидиоз, гарднереллезная инфекция, трихомоноз и даже сифилис. Это делает сложной диагностику урогенитальных инфекций.

Гонорея может переходить в хроническую  форму. В этих случаях используют серодиагностику – РСК или РНГА.

Профилактика и лечение. Вакцинопрофилактика гонореи разрабатывается. Для предупреждения бленнореи всем только что родившимся детям на конъюнктиву глаза закапывают раствор пенициллина или другой АБ, к которому чувствительны гонококки. Лечение гонореи проводят антибиотиками.

14. Боррелии. Лабораторная диагностика  иксодовых клещевых боррелиозов.

нет

15. Иерсинии. Лабораторная диагностика  псевдотуберкулёза и кишечного  иерсиниоза, чумы.

Род Yersinia.

Род включает 11 видов. Y.pestis вызывает чуму, Y.pseudotuberculesis - псевдотуберкулез, Y.enterocolitica - (кишечный) иерсиниоз, ряд видов не патогенны или условно-патогенны для человека.

Морфология.

Чаще имеют овоидную (кокко-бациллярную) форму, окрашиваются биполярно, склонны к полиморфизму. Большинство видов подвижны при температуре ниже +30 градусов Цельсия (имеют перитрихиальные жгутики), грамотрицательны, имеют капсульное вещество. Y.pestis неподвижны, имеют капсулу.

Культуральные и биохимические  свойства.

Факультативные анаэробы. Температурный оптимум от +25 до + 28 градусов Цельсия, pH - близкая к нейтральной. Хорошо культивируются на простых питательных средах. Ферментируют большинство углеводов без образования газа. Иерсинии способны менять свой метаболизм в зависимости от температуры и размножаться при низких температурах (психрофильные свойства). Вирулентные штаммы образуют шероховатые (R) колонии, переходные (RS) и сероватые слизистые гладкие (S) формы.

При изучении колоний чумного микроба  выделяют два типа колоний - молодые и зрелые. Молодые микроколонии с неровными краями (стадия “битого стекла”) в дальнейшем сливаются, образуя нежные плоские образования с фестончатыми краями (стадия “кружевных платочков”). Зрелые колонии крупные, с бурым зернистым центром и неровными краями (“ромашки”). Многие штаммы способны восстанавливать красители с обесцвечиванием сред (метиленовый синий, индиго и др.). На скошенном агаре черед двое суток при +28 С образуют серовато - белый налет, врастающий в среду, на бульоне - нежную поверхностную пленку и хлопклвидный осадок. Температура +37С - селективная для образования капсулы у Y.pestis.

Культуры Y.pseudotuberculosis и Y.enterocolitica не имеют стадии “битого стекла”, вначале мелкие блестящие, выпуклые, затем может отмечаться сливной рост с образованием выпуклых бугристых колоний, схожих с колониями Y.pestis. Растут на универсальных питательных средах (среда Эндо, агар Мак Конки, среда Серова и др.) в сочетании с методами накопления в холодовых условиях.

Антигенная структура.

Все виды иерсиний имеют О - антиген (эндотоксин), схожий с О - антигенами других грамотрицательных бактерий и токсичный для человека и животных. Липополисахаридно- белковые комплексы О - антигенов иерсиний разделяют на S (гладкие) и R (шероховатые), последние - общие для Y.pestis и Y.pseudotuberculosis. Y.enterocolitica имеет поверхностный антиген, общий с другими энтеробактериями.

Возбудитель псевдотуберкулеза по О - и Н- антигенам подразделены на 13 сероваров, чаще встречаются серовар I, а также III и IV, иерсиниоза - на 34 серовара по О - антигену, чаще от человека выделяют серовары О3 и О9. При температуре от +22 до +25С Y.pseudotuberculosis и Y.enterocolitica имеют жгутиковый антиген и подвижны, при +37C теряют Н - антиген и подвижность.

Y.pestis более однородна в антигенном отношении, имея капсульный антиген (фракция I), антигены T, V - W, белки плазмокоагулазы, фибринолизина, наружной мембраны и др. Чумной микроб выделяет бактериоцины (пестицины), оказывающие бактерицидное действие на псевдотуберкулезный микроб и штаммы кишечной палочки.

Патогенные свойства.

Возбудитель чумы обладает наибольшим патогенным потенциалом среди бактерий. Он подавляет функции фагоцитарной системы, поскольку подавляет окислительный  взрыв в фагоцитах и беспрепятственно в них размножается. Факторы патогенности контролируются плазмидами трех классов. В патогенезе выделяют три основных стадии - лимфогенного заноса, бактеремии, генерализованной септицемии.

Возбудители псевдотуберкулеза и  иерсиниоза имеют адгезины и инвазины, низкомолекулярные протеины (ингибируют бактерицидные факторы), энтеротоксин. Часть факторов контролируется плазмидами вирулентности.

Клинические особенности.

Чума чаще протекает в бубонной, легочной и кишечной формах. Наиболее опасны больные легочной чумой, которые  выделяют с мокротой огромное количество возбудителя).

Иерсиниоз и псевдотуберкулез - кишечные инфекции. Клиника многообразна - региональная лимфоаденопатия (имитирует аппендицит), энтероколиты, реактивные артриты, анкилозирующий спондилит, скарлатиноподобная лихорадка.

Эпидемиологические особенности.

Чума - классический природноочаговый зооноз диких животных. Основные носители в природе - сурки, суслики, песчанки, пищухи, в антропургических (городских) условиях - крысы (чума портовых городов). В передаче возбудителя, особенно в очагах, где преобладают незимноспящие животные, имеют блохи животных, способные нападать и заражать человека. В песчаночных очагах могут заражаться верблюды и представлять эпидемическую опасность.

Псевдотуберкулез и кишечный иерсиниоз  в природе передаются грызунами. Способны длительно сохраняться и даже накапливаться при низких температурах, например, в овощехранилищах. Способны вызывать заболевания у сельскохозяйственных животных. Человеку передаются преимущественно с пищевыми продуктами от животных, а также растительного происхождения.

Лабораторная диагностика.

Бактериологической диагностикой чумы могут заниматься только специализированные лаборатории противочумных станций и институтов (1 группа патогенности). Методами экспресс - выявления антигена являются МФА, РПГА с эритроцитарным дагностикумом, сенсибилизированным моноклональными антителами к капсульному антигену, ИФА, РНАТ. Для серологической диагностики может использоваться ИФА, РНАГ, ИФА.

При бактериологической диагностике  кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза в связи с накоплением возбудителя при низких температурах (в отличии от большинства других микроорганизмов) материал предварительно забирают в забуференный физиологический раствор и сохраняют в холодильнике с периодическими высевами на среды Эндо, Плоскирева, Серова. Подозрительные колонии пересевают для получения чистых культур, изучают их по биохимическим свойствам и идентифицируют в РА с диагностическими сыворотками.