Шпаргалка по "Микробиологии"

АТ обнаруживаются в сыворотке  через 3–4 сут. после начала заболевания, достигают максимума через 2–3 нед. Продолжительность специфического иммунитета – несколько десятилетий, т.е. напряженный, строго специфический к тому подтипу вируса (по Н- и N-АГ), который вызвал его образование.

У новорожденных – пассивный, обусловлен IgG к соответствующему подтипу вируса А, сохраняется в течение 6–8 мес.

Эпидемиология. Источник – больные и вирусоносители. Передача воздушно-капельным путем. Грипп относится к эпидемическим инфекциям, возникают в зимние и зимне-весенние месяцы. Примерно через каждые 10 лет эпидемии гриппа принимают характер пандемий, охватывающих население разных континентов. Объясняется сменой у гриппа А типа Н- и N-АГ вируса типа А (АГ дрейф и шифт). Например, вирус гриппа А с гемагглютинином HSW1 вызвал в 1918 г. пандемию «испанки» (20 млн. погибло). В 1968 г. появился новый вариант – вирус гриппа A (H3N2) «гонконгский», он продолжает циркулировать до настоящего времени. В 1977 г. к нему присоединился вирус типа А (H1N1).

Прекращение циркуляции вируса объясняется  коллективным иммунитетом населения  к данному варианту Þ селекция вариантов, иммунитет к которым еще не сформировался.

Возможно, что резервуаром вирусов  являются дикие и домашние животные, особенно птицы. При этом в организме  птиц происходят рекомбинации между  птичьими и человеческими вирусами, вследствие чего возникают новые АГ варианты.

По другой гипотезе вирусы постоянно  циркулируют среди населения, но становятся эпидемически актуальными  лишь при снижении коллективного  иммунитета.

Вирусы типов В и С более  стабильны, вызывают менее интенсивные  эпидемии и локальные вспышки.

Вирусы быстро разрушается под  действием высокой температуры, УФ, дезинфектантов, детергентов, но сохраняются  при низких температурах.

Специфическая профилактика. Для профилактики используют ремантадин, который подавляет репродукцию вируса гриппа типа А. Для пассивной профилактики – противогриппозный Ig из сыворотки доноров, иммунизированных гриппозной вакциной. Используют также человеческий лейкоцитарный интерферон.

Для вакцинопрофилактики – живые  и инактивированные вакцины. При  введении живых вакцин формируется как общий, так и местный иммунитет.

Получены инактивированные вакцины  различных типов:

Вирионные – получают путем высококачественной очистки вирусов, выращенных в куриных эмбрионах.

Субъединичные – очищенные поверхностные АГ (Н и N) – снижена реактогенность и увеличена иммуногенность.

Расщепленные или дезинтегрированные – получают из очищенной суспензии вирионов путем обработки детергентами.

Инактивированные вакцины индуцируют иммунный ответ в системе общего и местного гуморального иммунитета, но в меньшей степени по сравнению с живыми вакцинами индуцируют синтез интерферона.

Вакцины неэффективны, т.к. вакцинные  штаммы не соответствуют эпидемическим 

Диагностика. ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ – выявление вирусных АГ в цитоплазме эпителиальных клеток слизистой носа и носоглотки в мазках-отпечатках с помощью ИФА и иммуноферментного анализа.

Выделение путем заражения вируссодержащим  материалом (смывы из носоглотки в  первые дни заболевания) куриных  эмбрионов или культур клеток.

Типовую принадлежность определяют РСК. Подтип гемагглютинина – РТГА, подтип нейраминидазы – в реакции ингибирования нейраминидазной активности.

Для серодиагностики используют парные сыворотки, взятые с интервалом в 8-14 дней: в начале заболевания и в  период выздоровления. Нарастание титра вирусспецифических антител устанавливают в РСК и РТГА и др. методами.

21. Вирус кори. Лабораторная диагностика  кори.

Сем. PARAMYXOVIRIDAE (лат. para – около, myxa – слизь) включает три патогенных: Paramyxavirus (парагриппа и эпидемического паротита), Morbillivirus (корь) и Pneumovirus (респираторно–синтициальный).

Структура и химический состав. Вирионы сферической формы. В центре – нуклеокапсид со спиральным типом симметрии, окружен внешней оболочкой с шиловидными отростками. Односпиральная «–» РНК. В составе нуклеокапсида есть несколько вирусспецифических ферментов, в том числе РНК-полимераза. Имеет суперкапсид и 3 вирусспецифических белка: 2 – гликопротеины NH (обладают гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью), 3 – белок F (участвует в слиянии клеточных мембран с вирусной оболочкой).

АГ. 2 видоспецифических АГ: внутренний S- (нуклеопротеин) и наружный Y-АГ (гликопротеины шиповидных отростков). Общий АГ для всего семейства отсутствует. У ряда парамиксовирусов Y-АГ содержит 2 самостоятельных компонента –гемагглютинин (Н-АГ), др – нейраминидаза (N-АГ).

Репродукция. Парамиксовирусы с помощью рецепторов адсорбируются на клетках. Проникновение – путем рецепторного эндоцитоза или при слиянии вирусной оболочки с цитоплазматической мембраной. Репликация вирусной РНК происходит в цитоплазме. При формировании вирионов происходит модификация отдельных участков мембраны клетки-хозяина (снаружи встраиваются гликопротеины, изнутри – мембранный белок). К этим участкам мембраны по актиновым нитям цитоскелета транспортируются вирусные нуклеокапсиды. Выход вирусных частиц происходит путем почкованием. В цитоплазме инфицированных ## образуются ацидофильные включения.

Экология и распространение. Высокочувствительны к действию детергентов, дезинфектантов, к высокой температуре. Источник заражения – больные и вирусоносители. Передаются аэрозольным, иногда контактным путем. Наиболее тяжело протекает у детей раннего возраста. При паротите, кори больной опасен для окружающих начиная с инкубационного периода.

Диагностика. Вирус выделяют из материала (слюна, моча, кровь, смывы из зева и др.) в культуре клеток. Идентификацию вирусов производят по характеру ЦПД и в серологических реакциях (РСК, РВН, РТГА). Для обнаружения вирусных АГ в материале используют иммунофлюоресцентный метод.

Серодиагностика проводится в РСК, РВН, РТГА – с парными сыворотками  больных.

ВИРУС КОРИ – обладает признаками, которые присущи другим представителям семейства парамиксовирусов. Но агглютинирует только эритроциты обезьян (макака резус), т.к. они имеют специфические рецепторы, отсутствующие у эритроцитов других видов животных. Не имеет нейраминидазы.

Вирус кори содержит стабильные АГ. Серотипы не обнаружены. Для культивирования  используются первичные культуры клеток почек обезьян и эмбриона человека, перевиваемые линии клеток Hela и др. ЦПД проявляется в образовании симпластов.

Патогенез и иммунитет. Первичная репродукция вируса – в эпителиальных клетках слизистой носоглотки и верхних дыхательных путей, откуда вирус проникает в кровь, поражает эндотелий капилляров. Вследствие некротизации этих клеток появляется сыпь. Вместе с тем, подавляет активность Т-лимфоцитов из-за чего возникает вторичный иммунодефицит. В редких случаях проникает в ЦНС, что приводит к энцефаломиелиту. В случае персистирования вируса в лимфоидных тканях и нейронах ЦНС через несколько лет после перенесения заболевания может развиться подострый склерозирующий панэнцефалит – медленная инфекция с летальным исходом.

После перенесения кори формируется  гуморальный пожизненный иммунитет. В сыворотке присутствуют комплементсвязывающие АТ и антигемагглютинины. Противокоревые IgG проникают через плаценту и защищают новорожденных на протяжении первых 6 мес жизни.

Специфическая профилактика. Для активной иммунизации детей применяется живая вакцина. Для пассивной – вводят противокоревой Ig, полученный из донорской или плацентарной крови. Продолжительность пассивного иммунитета до 1 мес.

22. Энтеровирусы. Лабораторная диагностика  полиомиелита и других энтеровирусных  инфекций.

Полиовирусы, вирусы Коксаки и ECHO объединены в род энтеровирусов по патогенетическому признаку - первичной локализации в лимфатических узлах тонкой кишки или носоглотки.

Структура и химический состав. Энтеровирусы представляют собой мелкие вирионы размером 25-40 нм. Их капсид достроен из четырех типов молекул полипептида, уложенных по икосаэдрическому типу симметрии. Внутри капсида содержится однонитчатая линейная молекула РНК. Она входит в нуклеопротеид вириона, состоящий на 20-30% из РНК и на 70-80% из белка. Углеводы и липиды не обнаружены. Внешней оболочки нет.

Резистентность. Энтеровирусы хорошо переносят низкие температуры (-20 -70°С), в замороженном состоянии сохраняются в течение нескольких лет. В составе вирионов нет липидов, в связи с чем они устойчивы к эфиру, хлороформу, дезоксихолату, устойчивы также к рН в диапазоне 3,8-8,5. Чувствительны к нагреванию и окислителям (йод, перманганат калия, хлор и др.). Энтеровирусы не утрачивают своих инфекционных свойств в воде открытых водоемов, что имеет эпидемиологическое значение.

Антигены. Энтеровирусы имеют группоспецифические комплементсвязываюшие антигены, общие для каждого рода, и индивидуальныe типоспецифические, которые выявляются в реакции нейтрализации. Антигенные свойства энтеровирусов связаны с нуклеопротеидом и белками капсида.

Культивирование и репродукция. Энтеровирусы репродуцируются в культуре клеток человека и обезьян, которые обладают специфическими рецепторами липопротеидной природы, адсорбирующими данные вирусы.

Вирион проникает в клетку хозяина  прямым путем, не образуя пиноцитарной вакуоли. Дезинтеграция вириона начинается во время адсорбции и проникновения в клетку. Биосинтез вирусной нуклеиновой кислоты и белков осуществляется в цитоплазме. При этом вирусная РНК сама связывается с рибосомами, выполняя функции иРНК, и целиком транслируется с образованием гигантской молекулы полипептида. Затем происходит расщепление полипептида на отдельные фрагменты при помощи протеолитических ферментов. Один из фрагментов является вирусспецифической РНК-зависимой РНК-полимеразой (РНК-репликаза), участвующей в репликации вирусной нуклеиновой кислоты. После образования фонда РНК и фонда капсидных полипептидов начинается сборка вирионов. В одной клетке синтезируется около 150 вирионов полиовируса, которые могут образовывать кристаллические скопления в цитоплазме. На ранних стадиях репродукции энтеровирусов происходят подавление синтеза клеточных белков, РНК и ДНК и освобождение рибосом для синтеза вирионных белков.

Вирусы полиомиелита

По антигенным и иммуногенным свойствам  вирусы полиомиелита подразделяются на три серотипа - I, II и III, которые не вызывают перекрестного иммунитета. Вирус полиомиелита типа 1 вызывает эпидемии в 60-90% случаев, II и III типов - в 5-35%.

Полиовирусы не обладают гемагглютинирующими  свойствами.

Патогенез. Входными воротами инфекции является носоглотка, куда вирус попадает из воды, пищи, загрязненных предметов и воздушно-капельным путем. Из носоглотки вирус проникает в лимфатические узлы глоточного кольца или, чаше, в лимфатические узлы тонкой кишки. В клетках лимфатических узлов происходит первичная репродукция вируса. Затем он попадает в просвет кишки и выделяется с испражнениями в окружающую среду. При этом в 1 г фекалий содержится до 1 млн. доз вируса. Кишечная стадия продолжается 3-8 нед. Из кишечника или носоглотки полиовирус проникает через лимфу в кровь и вызывает состояние вирусемии, продолжающееся от нескольких часов до нескольких дней. Наличие антител в крови может блокировать вирус и препятствовать его проникновению в ЦНС. Если вирус все-таки попал в спинной мозг, он локализуется и репродуцируется в двигательных нейронах. Поражение последних приводит к развитию тяжелых паралитических форм заболевания, встречающихся относительно редко (до 1% случаев). Чаще полиомиелит протекает с менингеальными симптомами или катаральным состоянием зева. Наиболее опасно в эпидемическом отношении выделение вируса из носоглотки и с фекалиями в первые дни болезни.

Иммунитет. Полиомиелитом болеют преимущественно дети в возрасте от 4-5 мес. до 5-6 лет. Наследственный пассивный иммунитет при полиомиелите, который ребенок получает с материнскими антителами, сохраняется недолго. Широкое распространение вирусоносительства у здоровых людей и большое число сравнительно легко протекающих катаральных форм заболевания свидетельствуют о наличии естественного иммунитета. Это подтверждается обнаружением у здоровых людей разного возраста антител к вирусу полиомиелита. В формировании иммунитета основное значение имеют вируснейтрализующие антитела, а также неспецифические ингибиторы липопротеидной природы. Они содержатся в сыворотке крови, ликворе, моче и связывают полиовирус. После перенесенного заболевания иммунитет сохраняется на протяжении всей жизни.

Специфическая профилактика. Первая вакцина против полиомиелита, которая появилась во время широко распространенных в 50-х годах в Европе и Северной Америке эпидемий данного заболевания, была предложена Солком. Она состояла из полиовирусов типов I, II и III, инактивированных формалином. Болезненное внутримышечное введение вакцины, невысокая напряженность иммунитета и необходимость частых ревакцинаций ограничили ее применение.

Вскоре была разработана другая вакцина. Она была приготовлена из аттенуированных  штаммов трех типов вируса полиомиелита. Данные штаммы представляют собой мутанты  полиовируса, лишенные инфекционных свойств, но сохранившие свою иммуногенность. Немаловажное преимущество живой вакцины состоит еще и в том, что она выпускается в виде драже и вводится через рот. Механизм защитного действия живой вакцины заключается в способности аттенуированных вирусов размножаться в кишечнике, индуцировать образование гуморальных антител и секреторных IgA-антител, а также, возможно, вытеснять вследствие интерференции дикие штаммы полиовируса. Массовая вакцинация против полиомиелита позволила ликвидировать эпидемии данного заболевания. Для пассивной профилактики и лечения применяют иммуноглобулин.

Вирусы Коксаки

Антигены. По антигенной структуре, а также патогенетическим особенностям вирусы Коксаки разделены на две группы - А и В. В группу А включено 24 серотипа вирусов, имеющих общий комплементсвязывающий антиген и различающихся в реакции нейтрализации. В группу В входит 6 серотипов, которые также идентифицируются в реакций нейтрализации. Вирусы Коксаки обладают гемагглютинирующими свойствами.

Патогенез и иммунитет. Вирусы Коксаки А характеризуются сравнительно высокой миотропностью, так как у мышей-сосунков они вызывают вялые параличи со смертельным исходом, а у выживших животных наблюдается мышечная дегенерация. У людей они вызывают различные клинические синдромы, сопровождающиеся лихорадкой и менингеальными явлениями. Вирусы Коксаки А были выделены при герпангине, перикардите, асептическом серозном менингите и других заболеваниях.