Шпаргалка по "Микробиологии"

В фагоцитах из первичного очага  поражения могут попадать в другие органы и длительно персистировать в организм. Токсинов не выделяют, повреждающее действие реализуется через продукты обмена (NН₄ и Н₂О₂), оказывающих неблагоприятное действие на мембраны пораженных клеток. Часто приобретает хроническое или латентное течение. Этому же способствует антигенная мимикрия.

В патогенезе определенную роль играет способность стимулировать пролиферацию окружающих их клеток, что способствует непрямому повреждению тканей, вызывая  усиление клеточных иммунных реакций (ГЗТ) и увеличивает чувствительность клеток к вирусам (т.к. они интенсивно размножаются именно в делящихся клетках). Могут быть бессимптомные формы микоплазмоза; часто сочетается с ОРЗ. Условно-патогенные микоплазмы могут вызывать заболевания у лиц с иммунодефицитами в ассоциации с другими микроорганизмами.

Особенно тяжёлые заболевания  в детском возрасте. У детей  микоплазмоз сопровождается поражением органов дыхания и НС. Часто  происходит генерализация с развитием  патологических очагов в других внутренних органах. Наиболее тяжелое течение болезни у новорожденных и недоношенных.

Иммунитет. Наиболее ранняя ответная иммунная реакция носит клеточный характер, гуморальный иммунитет развивается позднее. Продолжительность приобретенного иммунитета зависит от интенсивности и формы инфекционного процесса. Например, микоплазменные пневмонии вызывают выраженный клеточный и гуморальный иммунитет на 5-10 лет.

Диагностика. Серологическое исследование с использованием РСК, ИФА, РНГА и др. В последнее время – регистрация клеточной иммунной реакции при микоплазмозе. Для ранней диагностики – ИФА мазков из бронхиальных и носоглоточных смывов и из другого материала.

Профилактика и лечение. Вакцинная профилактика к настоящему времени не разработана. Для лечения – АБ тетрациклинового ряда, эритромицин.

34. Возбудитель холеры. Лабораторная  диагностика холеры. НАГ-вибрионы.

Vibrio cholerae – холерный вибрион.

Морфология.

Прямые или изогнутые подвижные  палочки размерами 1,4-2,6х0,5-0,8 мкм; подвижность  обусловлена одним или несколькими жгутиками. В их основании расположена базальная гранула (тело), погруженная в цитоплазму. Снаружи они покрыты оболочкой, образованной выростом наружного слоя клеточной стенки.

Хемоорганотрофы; метаболизм окислительный и бродильный. Температурный оптимум вариабелен; некоторые виды растут при температуре 20°С, большинство - при 30°С. Оксидаза-положительны. Восстанавливают нитраты. D-глюкозу и некоторые углеводы ферментируют с образованием кислоты, но не газа. Большинство видов сбраживает мальтозу, маннозу и трегалозу. Вибрионы распространены не только в пресных, но и солёных водоёмах, особенно в эстуариях рек. Покрывают дно, растительность и колонизируют организмы водных животных. Некоторые виды патогенны для водных беспозвоночных и позвоночных животных; часть вибрионов также патогенна для человека. Наибольшее медицинское значение имеют V. cholerae, V. parahaemolyticus и V. vulnificus (табл. 13-2). Типовой вид рода - V. cholerae.

Vibrio cholerae. Возбудитель холеры - тяжёлой инфекции с высокой летальностью.Европейская медицина столкнулась с холерой лишь в первой половине XIX века; до этоговремени холера вызывала эпидемии в ограниченном регионе полуострова Индостан. Закономерной особенностью эпидемиологии холеры были вспышки в период военных действий. Широкое распространение заболевания связано, в первую очередь, с колониальной экспансией Великобритании в Индии и на Среднем Востоке. В Западную Европу и Россию холера проникла вовремя польского восстания 1830-1831 гг. Основными воротами для прорыва возбудителя в Европу были некоторые регионы Ближнего Востока (Левант, Анатолия), Египет и порты Среди-земноморья. Для изучения холеры в Египет были направлены 2 экспедиции - французская (Ру, Нокар, Штраусс и Тюйе) и немецкая (Кох, Гаффки, Фишер и Тресков). Работа исследователей проходила в сложной и нервной обстановке, подогреваемой кампанией франко-прусскогошовинизма. Во время исследований Луи Тюйе заразился и погиб. К чести Коха, он сам нёс телоколлеги на кладбище и возложил на его могилу венок со словами: «Это скромный венок излавров, но им венчают героев». Работа немецкой экспедиции привела к открытию холерноговибриона («запятая Коха») в 1883 г., чему немало способствовал метод культивированиябактерий на твёрдых средах (желатина на стеклах), разработанный Кохом. После открытияхолерного вибриона было выделено большое количество гемолитических вибрионов и было предложено считать гемолитические виды непатогенными. Данный критерий считали вполне обоснованным до выделения супругами Готшлих гемолитических вибрионов из трупов мусульман-паломников на карантинной станции Эль-Тор в Египте (1906). Поскольку в то время эпидемии не было, то и роль вибриона Эль-Тор осталась недоказанной. Но в 1939 г. возбудительвызвал эпидемическую вспышку на острове Сулавеси (Индонезия), а позднее был признан этиологическим агентом седьмой пандемии холеры. В начале 1993 г. появились сообщения о вспышках холеры в юго-восточной Азии, вызванных вибрионами ранее неизвестной серогруппы, обозначенных как серовар 0139 (Бенгал).

МОРФОЛОГИЯ. Клетки холерного вибриона размерами 1,5-4,0х0,2-0,4 мкм имеют одинполярный жгутик, снабженный чехликом и продольным выростом, напоминающим ундул.

Типичные формы обычно наблюдают  в образцах клинического материала; в мазках из колоний, выросших на плотных  средах, доминируют палочковидные формы. Наибольшую вариабельность дают при выращивании на средах с крахмалом. Подвижность бактерий весьма выражена, и её определение (методом висячей или раздавленной капли) - важный диагностический признак. Деление клеток происходит очень быстро, на щелочной пептонной воде возбудитель даёт видимый невооружённым глазом рост уже через 6 ч. В старых культурах S-образно изогнутые, кокковидные или булавовидные инволюционные формы. Способны образовывать фильтрующиеся, а под действием пенициллина и L-формы. Тинкториальные свойства аналогичны таковым у энтеробактерий, вибрионы хорошо окрашиваются многими анилиновыми красителями. Наибольшее распространение получила окраска водным фуксином Пфайффераили .карболовым фуксином Циля. Для окраски органоидов, в частности жгутиков, предпочтительнапротрава с последующим импрегнированием солями тяжёлых металлов.

На твёрдых средах возбудитель образует небольшие круглые дисковидные прозрачные S-колонии с ровными краями, голубоватые в проходящем свете (что сразу их отличает отболее грубых и мутно-белых колоний энтеробактерий). Колонии маслянистые, легко снимаются со среды и эмульгируются, давая феномен «тяжа». Старые культуры несколько грубеют и приобретают желтовато-коричневый оттенок. На скошенном агаре через 24 чхолерный вибрион образует блестящий желтоватый налёт. На агаре с тиосульфатомцитратом, солями жёлчных кислот и сахарозой (TCBS-arap) Vibrio cholerae ферментирует последнюю и образует жёлтые колонии. На пластинках желатины через 48 ч вырастают беловатые зернистые колонии, окруженные зоной разжижения. При посеве уколом через 48-72 ч вызывает воронкообразное разжижение, его верхняя часть при просматривании сбоку представляется пузырьком воздуха; позднее разжижение увеличивается, и полость заполняется белёсой массой вибрионов. Также образуются неровные, мутные R-колониибактерии из них утрачивают чувствительность к бактериофагам, антибиотикам и не агглютинируются О-антисыворотками.

На жидких средах вызывает помутнение и образование нежной голубоватой плёнки на поверхности, её края приподняты вдоль стенок пробирки; при встряхивании она легко разрушается и оседает на дно. На 1% пептонной воде (рН 8,8-9,0) растут, опережая бактерии кишечной группы, и образуют нежную голубоватую плёнку и муть.

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА. Факультативный анаэроб с более выраженными аэробнымисвойствами; быстро погибает в анаэробных условиях. Не образует спор и хорошо растет напростых питательных средах. Температурные пределы для роста 16-40°С; оптимум - 37°С.Может расти при высоком рН среды (7,6-8,0); подобные галофильные свойства используют в подборе элективных средств, а также применяя дезинфектанты с кислым рН.

БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА. Холерные вибрионы сбраживают с образованием кислоты (безгаза) глюкозу, сахарозу, мальтозу, маннозу, маннит, лактозу (сравнительно медленно), ле-вулёзу, гликоген и крахмал. Инертны к арабинозе, дульциту, инулину, инозиту и рамнозе.Ферментация маннозы, сахарозы и арабинозы (триада Хёйберга) имеет диагностическое значение; холерные вибрионы разлагают только маннозу и сахарозу и принадлежат к 1 группе Хейберга (по отношению к этим трём углеводам все вибрионы разделяют на 6 групп). Проявляют протеолитическую активность - разжижают желатину с образованием «воронки» с пузырьком воздуха вверху, также гидролизуют казеин. Обладают плазмокоагулирующим (свёртывают плазму кролика) и фибринолитическим (разжижают свёрнутую сыворотку по Лёффлеру) действиями. Свёртывают молоко и разлагают другие белки и их дериваты до аммиака и индола. H₂S не образуют. Восстанавливают нитраты и образуют индол; эту способность учитывают в нитрозоиндоловой реакции, также известной как Пеля-Буйдвида, или холеpa-рот реакция. На основании биохимических и биологических различий холерные вибрионы разделяют на 2 биовара (биотипа): классический (V. cholerae asiaticae) *Эль-Тор (V. cholerae eltor). В настоящее время значительная часть изолятов Эль-Тор утеряла свои гемолитические свойства и дифференцируется только по способности агглютинировать эритроциты, резистентности к полимиксину и фагу IV. Бактерии группы 0139 устойчивы к полимиксину и не проявляют гемолитическую активность

Гемолитическая активность (реакция Грейга) может варьировать; классические вибрионы способны приобретать гемолитические свойства при хранении, а вибрионы Эль-Тор могут их терять при пассировании.

АНТИГЕННАЯ СТРУКТУРА. У холерных вибрионов выделяют термостабильные О- и термолабильные Н-Аг.

Н-Аг - общие для большой группы бактерий, разделённой на А и В группы; в группу А входят холерные вибрионы; в группу В - вибрионы, биохимически отличные от холерных.

По структуре О-Аг выделяют 139 серогрупп; возбудители классической холеры и холеры Эль-Тор объединяют в 01 (изолированную от холероподобных и парахолерных вибрионов) и, несмотря на существующие биохимические различия, при исследовании на холеру обязательно проводят типирование 01-антисывороткой. Кабешима и Такано (1913) установили, что О-Аг 01 группы холерных вибрионов неоднороден и включает А-, В- и С- компоненты, разные сочетания которых присущи сероварам Огава (АВ), Инаба (АС)и Хикоджйма (АВС, промежуточный серовар). Эти свойства используют в качестве эпидемиологического маркёра для дифференцирования очагов по возбудителям, хотя иногда от одного больного можно выделить бактерии разных сероваров. У шероховатых R-форм отмечают утрату О-Аг и они, а также слизистые М-формы (с измененной структурой 0-Аг), не агглютинируются О-антисыворотками (для идентификации OR- и R-диссоциатов используют OR-антисыворотки). Бактерии серовара 0139 не агглютинируются видоспецифической 01 и типоспецифическими Огава-, Инаба- и RO-антисыворотки.

Поскольку холероподобные вибрионы также  не агглютинируются 01-антисывороткой, их обозначают как неагглютинирующиеся, или НАГ, вибрионы. Гарднер и Венкатрамен установили, что вибрионы группы В имеют неоднородную структуру О-Аг и разделяются на 6серологических подгрупп, состав которых совпадает с биохимической схемой Хайберга.

БАКТЕРИОФАГИ. Холерные бактериофаги были впервые выделены д'Эреллем (1920); они специфичны (лишь изредка могут давать перекрёстные реакции с родственными видами).Все Vibrio cholerae лизируются бактериофагом группы IV (по Мукерджи, 1963), а вибрионы биовара Эль-Тор - фагами группы V; тем не менее, создать схему типирования вибрионов Эль-Тор не удалось. Многочисленные исследования показали, что холерные бактериофаги практически не имеют терапевтического эффекта.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ. Холера - типичная кишечная инфекция, и многое в её эпидемиологиианалогично поражениям, вызываемым энтеропатогенными бактериями

Выделяют 2 типа эпидемий холеры - эпидемии-вспышки с едиными источником инфекции и путями распространения, характеризующиеся одномоментным появлением большого количества больных, и вялотекущие эпидемии с перманентной заболеваемостью небольшого контингента и трудно выявляемыми путями передачи возбудителя

Единственный природный резервуар - больные и бактерионосители; основной механизм передачи - фекально-оральный, реже - контактный. Факторы передачи - пищевые продукты, вода, объекты  окружающей среды. Определённую роль играют мухи, способные переносить возбудитель с испражнений на пищевые продукты. Несмотря на то, что выделение возбудителя в окружающую среду происходит в течение короткого времени, большое количество скрытых форм поддерживает циркуляцию возбудителя.

Индивидуальная восприимчивость  к холере чрезвычайно вариабельна. Достаточно вспомнить неудачные опыты с самозаражениями И.И. Мечникова, З.В. Ермольевой и Петтенкофера. Наиболее предрасположены к холере лица, проживающие в неблагоприятных условиях и не соблюдающие правил личной гигиены. При эпидемических вспышках большую часть больных составляют взрослые, чаще мужчины; при вялотекущих эпидемиях в эндемичных районах основную группу заболевших составляют дети.

В большинстве случаев подъём заболеваемости наблюдают в тёплый сезон, но в  эндемичном регионе сезонные колебания имеют серьёзные различия. В Дакке (Бангладеш) холера появляется после муссонных дождей и исчезает в сухой период; в Калькутте (Индия), по другую сторону дельты Ганга и Брамапутры, болезнь распространяется в сухой периоди исчезает во время дождей.

Холерный вибрион плохо переносит  неблагоприятные воздействия внешней  среды - солнечное облучение, высушивание  и конкуренцию со стороны другой микрофлоры. Циркуляция возбудителя  в воде прямо связана с наличием больных и бактерионосителей; после  их изоляции он спонтанно исчезает через несколько суток (в стоячих водоёмах может сохраняться до 2-3 нед.). В выгребных ямах может существовать до 3-4 мес. Он может длительно сохраняться в продуктах с щелочным рН и высокой влажностью, а также одежде и постельном белье, испачканных испражнениями больных. Вибрионы биотипа Эль-Тор более устойчивы во внешней среде, что позволяет легко выделять их изводы и испражнений; все описанные в литературе бактерионосители холеры были инфицированы этим биотипом. Все вибрионы высоко чувствительны к действию дезинфектантов, особенно с кислым рН.

ПАТОГЕНЕЗ ПОРАЖЕНИЙ. Попав в организм человека, большая часть вибрионов погибает под действием кислой среды желудка. Лишь их небольшая часть достигает тонкой кишки. Факторы патогенности, обеспечивающие колонизацию, - жгутики (обеспечивают подвижность), муциназа (разжижает слизь и облегчает достижение поверхности эпителия) инейраминидаза (обеспечивает взаимодействие с микроворсинками). В ответ на проникновение бактерий эпителиальные клетки выделяют щелочной секрет, насыщенный жёлчью, идеальная среда для размножения возбудителя. Клинические проявления холеры обусловливает способность к токсинообразованию; холерные вибрионы образуют эндо- и экзотоксины. Эндотоксин - термостабильный ЛПС, сходный по структуре и активности с эндотоксинами прочих грамотрицательных бактерий. Проявляет иммуногенные свойства, индуцируя синтез вибриоцидных AT. Не играет существенной роли в развитии характерных проявлений.). Экзотоксин (холероген) - термолабильный белок; разрушается фенолом и формалином, но резистентен к действию протеолитических ферментов. Молекула токсина включает 2 компонента: компонент Б (образован пятью кольцевидно соединёнными субъединицами) взаимодействует с моносиаловым ганглиозидным рецептором что обусловливает проникновение в клетку компонента А. Компонент А составляют А1 субъединица (активный центр) и субъединица А2 связывающая оба компонента. Субъединица А1 катализирует рибозилирование гуанилзависимого компонента аденилатциклазы, приводит к повышению внутриклеточного содержания цАМФ и выходу жидкости и электролитов из клеток либеркюновых желёз в просвет кишечника.Токсин не способен реализовать своё действие на любых других клетках. Бактерии серовара 0139 также продуцируют экзотоксин с аналогичными свойствами, но в меньших количествах; токсинообразование кодируют как хромосомные, так и плазмидные гены. Возможно, что определённую роль в поражениях, вызываемых биотипом Эль-Тор, играют гемолизины.