Шпаргалка по "Микробиологии"

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ. У большинства инфицированных лиц заболевание протекает бессимптомно либо возможна лёгкая диарея. По имеющимся данным, соотношение тяжёлых поражений к количеству стёртых проявлений для классической холеры составляет 1:5-10, для холеры Эль-Тор - 1:25-100.

Для клинически выраженных случаев инкубационный период варьирует от нескольких часов до 5 сут. (в среднем 2-3 дня); заболевание характеризуется общим недомоганием, болями в животе, рвотой и развитием выраженного диарейного синдрома. Для последнего характерно выделение значительного количества (до 10 л/сут) водянистых бесцветных испражнений («рисовый отвар»). Другая характерная черта - сладковатый «рыбный» (но не фекальный) запах у испражнений. В зависимости от степени интоксикации,симптоматика может иметь характер гастроэнтерита или энтерита.

В тяжёлых случаях у больных  резко снижается объём мочи с  развитием почечной недостаточности. Характерна охриплость голоса или афония. Ведущие патогенетические факторы - гиповолемия и выраженные нарушения электролитного баланса, вследствие чего развиваются артериальная гипотензия, сердечная недостаточность, нарушение сознания и гипотермия. Подобное состояние определяют как холерный алгид. Отмечают характерное проявление fades hippocrafica (запавшие глаза, заострённые черты лицас резко выступающими скулами). Продолжительность проявлений зависит от своевременного, адекватно проводимого лечения и варьирует от нескольких часов до нескольких дней. При отсутствии лечения летальность больных в алгидной стадии достигает 60%.в. Выздоровление сопровождается выработкой непродолжительной невосприимчивости, нередко отмечают случаи повторного заражения.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. Основу составляют выделение и идентификация возбудителя. Цели исследований: выявление больных и бактерионосителей; установление окончательного диагноза при исследовании погибших; контроль за эффективностью лечения больных и санации носителей; контроль над объектами внешней среды и эффективностью дезинфекционных мероприятий. Материалы для исследований - испражнения, рвотные массы, жёлчь, секционный материал (фрагменты тонкой кишки и жёлчного пузыря), постельное и нательное бельё, вода, ил, сточные воды, гидробионты, смывы с объектов окружающей среды, пищевые продукты, мухи и др.

Наилучшие результаты даёт исследование проб, взятых до начала антибактериальной терапии. Испражнения лучше всего отбирать резиновыми катетерами. Можно использовать стеклянные трубочки с оплавленными краями (также вводят в анальное отверстие) или ректальные тампоны. При исследовании жёлчи отбирают порции В и С (доставляют нативный материал). Секционный материал помещают в стерильную тару раздельно. Все образцы помещают в герметически закрываемую транспортную тару. Материал следует доставлять в лабораторию не позже 2 ч после забора. При невозможности образцы помещают в транспортные среды.

Основным в лабораторной диагностике  холеры является:

1) обнаружение в мазках из  испражнений изогнутых тонких  грамотрицательных палочек, располагающихся  в виде «стайки рыб»;

2) активная подвижность вибрионов  в раздавленной капле; 

3) мгновенная их иммобилизация при добавлении 0–холерной сыворотки;

4) образование голубоватой пленки–паутинки  на пептонной воде через 5–6  ч и характерных колоний–росинок  на щелочном МПА (12 ч);

5) агглютинабельность вибрионов  в противохолерных сыворотках  и их лизабельность типовыми холерными фагами С и Эль–Тор.

Схема бактериологического  исследования. Так как окончательные результаты должны быть выданы через 30–36 ч, то исследование проводится круглосуточно.

I этап. Из испражнений и рвотных масс готовят мазки, высушивают на воздухе, фиксируют смесью Никифорова и окрашивают водным фуксином или по Граму. Параллельно с этим изучается подвижность вибриона в раздавленной капле. Одновременно испражнения высевают на 1% щелочную пептонную воду, щелочной мясопептонный агар и TCBS. Все посевы помещают в термостат при температуре 37°С. Дают первое заключение о наличии в материале вибрионов.

II этап. Через 5–6 ч инкубации в термостате на пептонной воде вырастает едва видимая пленка, из которой делают мазки, препараты раздавленной капли. Пленку агглютинируют в капле О–холерной сыворотки и выдают второе заключение о природе выделенного вибриона. Пленки пересевают на вторую пептонную воду и щелочной МПА.

III этап. Спустя 12–16 ч от момента посева на среды испражнений больного представляется возможность повторно изучить морфологию, подвижность и агглютинабельность вибрионов пленки, выросшей на второй пептонной воде, а также провести те же исследования, отобрав с плотных сред подозрительные колонии.

Определив, что колонии состоят  из вибрионов, агглютинирующихся в О–холерной сыворотке, разведенной 1:100, и в одной из типовых сывороток Инаба и Огава, разведенных 1:50, дают третье заключение о результатах исследования. Подозрительные колонии пересевают на скошенный агар для накопления культуры и определения ферментативных свойств.

IV этап. Установив, какие ферменты продуцирует культура вибриона на ряде Гисса, определяют ее чувствительность к холерным фагам и дают окончательное заключение.

35. Риккетсии. Возбудитель сыпного  тифа. Лабораторная диагностика.

Риккетсии – это многочисленная группа бактерий–паразитов, названная именем их первооткрывателя, американского ученого Г. Риккетса, который, установив риккетсиозную природу пятнистой лихорадки Скалистых гор Северной Америки, в 1910 г. погиб в результате внутрилабораторного заражения. Большая часть риккетсий является безвредными бактериями–симбионтами членистоногих. Некоторые виды вызывают заболевания у человека. Рикеттсии являются естественными симбионтами членистоногих насекомых: клещей, вшей, блох. Обитая в организме насекомых, рикеттсии могут передаваться человеку и животным при укусе. Рикеттсии являются возбудителями сыпного тифа.

МОРФОЛОГИЯ. Риккетсии – плеоморфные и разнообразные по размерам микроорганизмы. Чаще всего имеют форму коккобактерий длиной 0,8–2 мкм и шириной 0,3–0,6 мкм, но в мазке вместе с этим встречаются бактериальные, бациллярные и нитевидной формы риккетсий длиной от 3 до 20–30 мкм. В организме больного обнаруживаются в цитоплазме и в ядре клеток.

По Граму риккетсий окрашиваются отрицательно. Для их дифференциации чаще применяется предложенная П.Ф. Здродовским облегченная модификация способа Циля–Нильсена: окраска водным фуксином (5 мин) с последующей обработкой мазка 0,01 % раствором соляной кислоты (1–3 с) и докрашиванием 0,5 % метиленовым синим (10 с). Обладая относительной кислотоустойчивостью, риккетсий при этом окрашиваются в рубиново–красный цвет и легко обнаруживаются на фоне голубой цитоплазмы или синего ядра клеток.

По Романовскому–Гимзе риккетсии окрашиваются в сиреневый цвет; при внеклеточном расположении часто имеют вид биполярных палочек или гантелек. Спор, капсул и жгутиков не образуют.

Облигатные внутриклеточные паразиты, могут размножаться только в живой клетке. Во внешней среде сохраняются некоторое время. У рикеттсий выделяют 2 морфоформы, которые образуются в клетке хозяина:

1) Вегетативная форма, которая  размножается внутри клетки.

2) Покоящаяся форма, сохраняется  в клетке, но не размножается. Имеет меньшие размеры. Вызывают хронический сыпной тиф.

Рикеттсии обладают минимальным собственным обменом веществ из-за особого строения ЦПМ. Они практически не способны выделять продукты метаболизма, это метаболически зависимые от клетки- хозяина микроорганизмы.

АГ. Риккетсии Провачека содержат два АГ:

1) растворимый АГ: термостабильный, липидополисахаридобелковый комплекс, видонеспецифический (такие же – у R. typhi и у протея ОХ₁₉)

2) нерастворимый АГ: термолабильный, видоспецифический, белково-полисахаридный комплекс.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. Культивируются на куриных эмбрионах, культурах клеток, в живом организме (организме членистоногих). Затем из них делается препарат-мазок, окрашивается по Цилю-Нильсену (Здродовскому) и микроскопируется.

36. Лептоспиры. Лабораторная диагностика  лептоспирозов.

Семейство Spirochaetaceae – патогенны 3 рода:

Treponema (возбудитель сифилиса – Т. pallidum, фрамбезии – Т. pallidum subsp. tenue, пинты – Т.carateum);

Borrelia (возбудитель эпидемического возвратного тифа – В. recurrentis, клещевого возвратного тифа – В. persica, В. hispanisa и др.)

Leptospira семейства Leptospiraceae (возбудитель лептоспироза – L. interrogans).

Спирохеты имеют штопорообразную  извитую форму. Они отличаются друг от друга характером и числом завитков, длиной клеток, а также другими  морфологическими и физиологическими признаками.

Все спирохеты Гр–. Большая их часть – свободно живущие микроорганизмы, в организме человека обитают как сапрофиты, патогенны немногие.

Лептоспиры имеют сигмообразную  или С–образную форму, нередко с  крючками на концах, около двух десятков мелких завитков. Длина их 6–20 мкм, а поперечник часто меньше разрешающей силы оптического микроскопа (0,2 мкм), поэтому лептоспиры предпочтительнее изучать в темнопольном микроскопе. По Романовскому – Гимзе окрашиваются в розовый цвет.

АГ. Лептоспиры делятся на серогруппы и серовары. Каждая серогруппа имеет свое название (!). Серогрупп 18, сероваров более 160. Аг-структуру лептосип изучают в реакции агглютинации с адсорбированными сывворотками, реакция агглютинации сопровождается лизисом.

РЕЗИСТЕНТНОСТЬ. В нестерильной воде и в гниющем орг. материале остаются жизнеспособными в течение нескольких дней. При высыхании, кипячении и воздействии обычных концентраций дез. средств очень быстро гибнут.

ПАТОГЕНЕЗ. В организм проникают через слизистые оболочки и поврежденную кожу, первичного аффекта при этом не образуется. Через лимф. пути возбудитель проникает в кровь, а затем в паренхиматозные органы. Пораджение печени – характерно для лептоспироза (от легких, выявляемых только биологическими пробами, до тяжелых, с развитием гепатита). Могут поражаться почки, в моче длительное время обнаруживаются лептоспиры. Болезнь протекает волнообразно.

ИММУНИТЕТ. После перенесенного заболевания возникает стойкий иммунитет, связанный с образованием антител.

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. Используют микроскопический, бактериологический, серологический и биологический методы.

Микроскопию клин. материала проводят в темном поле. Обнаружить лептоспиры с помощью микроскопии не всегда возможно. Бактериологический метод: засев крови больного в несколько пробирок с питательной средой.  Рост отмечается на 5-7 день и позже. С 7-8 дня возможно выделение культуры из мочи больного. Одновременно с посевом на питательные среды заражают чувствительное животное.

На 2 неделе заболевания  кровь больного  исследуют на наличие в ней антител, для чего применяют реакцию агглютинации-лизиса. Диагностический титр антител 1:100-1:200. В сомнительных случаях повторное определение титра АТ с целью выявления его нарастания. У больных титры агглютининов достигают больших величин и могут сохраняться несколько лет.

ЛЕЧЕНИЕ. Антибиотики. Специфический поливалентный иммуноглобулин, содержащий АТ к наиболее распространенным сероварам лептоспир.

37. Вирус краснухи. Лабораторная  диагностика краснухи.

Относится к сем. Togaviridae. Им. сферическую форму диаметр 60-70 нм.

Однонитчатая РНК, связанная с  внутренним С-белком, имеющая фермент  нейраминидаза.

Имеет суперкапсид с гликопротеиновыми  выростами. Активно агглютинирует  эритроциты цыплят и голубей.

Культивирование. Используют культуру клеток. Размножается в цитоплазме.

Цитопатическое действие: дегенеративное округление клетки, образование многоядерных гигантских клеток и цитоплазменных эозинофильных включений.

Также чувствительны макаки.

Патогенность. В клетку проникает пиноцитозом, выходит отпочковыванием.

АГ. Сероваров нет. Есть 2 Аг: нуклеопротеин капсида, гликопротеиновые выросты суперкапсида.

ПАТОГЕНЕЗ. Передача воздушно-капельным путем и путем контакта с биологическими жидкостями больного (слюной, мочой, иногда испражнениями). В организме в первуую очередь идет в лимфатические узлы, где активно размножается, затем возникает вирусемия, появление сыпи на коже и слизистых. Проникает в ликвор.

КЛИНИКА. Протекает относительно легко. Многие переболевают в детстве. Опасен для беременных серонегативных женщин (таких около 20%), особенно при заражении в начале беременности – поражается плод (сердце, органы слуха, органы зрения). Если родится, то может быть слабоумие, миастения. У таких детей вирус персистирует в организме и выделяется с биологическими жидкостями, особенно с мочой.

ДИАГНОСТИКА. У новорожденных берут пупочную кровь и определяют АТ. Если обнаруживается IgM – внутриутробная болезнь.

У взрослых – отделяемое носоглотки, моча, испражнения, кровь.

1) вироусологич. метод – на культуре клеток, опр  по цитопатич. действию (+РИФ, РТГА)

2) Серодиагностика АТ в сыворотке  (РТГА, РГГ)

38. Возбудители оппортунистических  микозов.

1. Дрожжеподобные грибки рода  Candida.

Род включает ряд видов: C. albicans, C. trabecalis, C. pseudotrabecalis, C. krusei.

МОРФОЛОГИЯ. Грам "+". Многоклеточные. Овальной, слегка вытянутой формы. В  ткани принимает филаментозный  вид (нити). В клетках располагаются  одиночно или образуют скопления. Часто  образуют т.н. псевдомицелий, который  распадается на одиночные клетки. Является эукариотом.

Размножается почкованием. Наиболее часто образует бластоспоры. C.albicans отличается тем, что помимо бластоспор может образовывать хламидиоспоры в местах сочленения отдельных клеток.

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА. Хорошо растут на плотных и жидких питательных средах, часто используется среда Сабуро. На ней гриб образует беловатые колонии, иногда поверхность колоний "пушистая" (воздушный мицелий), также может врастать в агар.

На жидкой среде – равномерное  помутнение всей среды или плавающие колонии.

Аэробы.

БХ. Ферментируют углеводы, некоторые при этом выделяют кислоту и газ, некоторые только кислоту. Не ферментируют лактозу (кроме C. pseudotrabecalis). C.albicans активно адгезирует, т.к. на поверхности его имеются особые белки – маннаны (маннапротеиды), которые способны прочно связываться с секреторным IgA слизистых.