Автор работы: Пользователь скрыл имя, 20 Декабря 2013 в 14:55, дипломная работа
Оқсил табиатига эга бўлаган гормонлар ичида инсулинни алоҳида ўрни бор. У гормон қатор метоболик жараёнларда қатнашади ва организмда асосий физиологик холатларда иштирок этади. Инсулинни метоболизми ўзгариши хилма – хил патологик холатларга сабабчи бўлади. Шуларни ичида энг кўп ўрганилган ва кенг тарқалган қандли диабетдир. Қандли диабет бир умрлик касаллик, уни бутун хаёт давомида даволаш зарур. Мободо бемор даволанмаса, органзмда чуқур ўзлаштириш юз бериб, бу унинг асоратлари ривожланиб кетишга олиб келади.
КИРИШ.......................................................................................................... 4
I БОБ. АДАБИЁТЛАР ШАРҲИ ................................................................ 6
1.1 Ўзбекистон Республикасида рўйхатга олинган қандли диабетнинг
асосий кўрсатгич тахлили…………………………………………………. 6
Қандли диабет касаллигида инсулиннинг боғлиқлиги…………………..9
Инсулиннинг тузилиши ва хусусиятлари………………………………… 11
1.4 Инсулин секрецияси ва таъсири………………………………………….18
1.5 Организмда инсулиннинг биологик роли. Инсулиннинг физиологик самараси ва уни глюкоза метоболизмида иштироки……………………….21
1.6. Эритроцитлардаги инсулиназа ферментини ажратиб олиш ва
хусусиятларини ўрганиш…………………………………………….……29
I боб бўйича хулосалар............................................................................... 36
II БОБ. ТАДҚИҚОТЛАРДА ҚЎЛЛАНИЛГАН УСЛУБ ВА АШЁЛАР
2.1 Лизат олиш усули...................................................................................37
2.2 Оқсил миқдорини Лоури усулида аниқлаш..........................................38
2.3 Инсулин асосида биоспецифик сорбент тайёрлаш................................40
2.4 Инсулиназа ферменти десорбцияси.......................................................41
2.5 Протеолитик фаолликни аниқлаш. Ансон усули..................................43
II боб бўйича хулосалар..............................................................................44
III БОБ. ОЛИНГАН НАТИЖАЛАР ВА ХУЛОСАЛАР ТАҲЛИЛИ..45
3.1 Инсулиндаги оқсил миқдорини аниқлаш.................................................. 47
3.2 Лизатдаги оқсил миқдорини аниқлаш........................................................ 49
3.3 Ажратиб олинган фермент фаоллигини аниклаш. Ансон усули............ 50
III боб бўйича хулосалар....................................................................................52
ХУЛОСА ……………….........................………………………………..52
Қисқартма сўзлар................................................................................................53
Илова ...................................................................................................................54
Фойдаланилган адабиётлар………..........................…………………………..55
29. Kabn C.R., White M.F., Shoelson S.E. The insulin receptor and its substrate: molecular determinants of earlu evenys in insulin action // Recent Prog.Horm.Res., 1993, № 48, 291-339.
30. Duckworth W.C.,
Kitabchi A.E. Insulin metabolism and degradation/l Endocr. Rev.- i981
Spring.-Vol.2.-J\s2.-P.210-
31. Jochen A., Berhanu P. Insulin-stimulated glucose trasporl and insulin intemalization share a common postbinding step in adipocytes //Diabetes.-
1987*.-Vol. 36.-P. 542-545.
32.
Backer J.M., Kahn
CR., Cahill D.A.,
Ullrich A., White
M.F. Receptormediatedinternalizatio
1990.- Vol. 265.- P. 16450-16454.
33. Smith R.M., Jarett L. Difference in adenosine triphsphate dependency of receptor-mediated endocytosis of 2-macroglobulin and insulin correlate with separate routes of ligand-receptor complex intemalization /Endocrinology.-1990.-Vol. 126.-P. 1551-1560.
34. Pell M.8., Duckworth W.C, Peavy D.E. Localization of insulin
degradation products to an intracellular site in isolated rat hepatocytes//Biochem.
Biophys. Res. Commun.- 1986.- Vol. 137.- p. 1034-1040.
35. Hamel E.G., Posner B.I., Bergeron J.JM., Frank 8.H., Duckworth w.c.
Isolation of insulin degrеdation products from endosomes derived from intact
rat liverl/J. BioL Chem.- 1988.- yol. 263.- p. 6703-6709.
36' Backer J.M., Kahn CR., Cahill D.A., Ullrich A., White M.F. Receptormediated
intetnalization of insulin requires a 12-amino acid sequence in the juxtamembrane
gegion of the insulin receptor beta-subunit //J. Biol. chem.-
1990.- VoI. 265.- P. 16450-164s4.
37. Carpentier J.L., Gorden p., Lew D.p. Calcium ions are required for the
intracellular routing of insulin and its receptor //Exp. Cell. Res.- 1992 Jan.-Vol.
198.-№1.-P.144-149.
38' Manner G', Movsas В., Yalow R.S. Characterization of insulinase from
mammalian and non-mammalian livers //Life Sci.- 1984 Apr 2.-Vo1.34.-№ 14.-
P.1341-1345.
39. Sonne O. Increased inhibitory potency of free fatty acid-poor albumin on
the releasea and aStwdty of insulin-degrading enzymes from isolated ratadipocytes and hepatocytes //Anal. Biochem.- 1985 Nov 15.-Vol 151.- №l.-p. 109-117.
40. Rafecias T., Femandez-Lopez J.A., Salinas I, Formiguera X., Remesar X., Foz M., Alemany M . Insulin degradation by adipose tissue is increated in human obesity //J. Clin. Endocrinol. Metab.- 1995 Feb.- vol. 80.- №2.- p.693-695.
41. Jochen A., Berhanu P. Effects of metalloendoprotease inhibitors on insulin binding, internalization and processing in adipocytes //,Biochem. Biophys. Res. Commun..- 1987.- Vol. 142.- p 205-212.
42. Моренкова С.А., Карелин А.А. Роль АТФ в специфическом связывании 125 [1] инсулина с цитоплазматическими рецепторами мембран печени и мышц контрольных животных и крыс с диабетом // Бюлл. экспер. биол.и мед., 1980, № 11, с. 557 – 559
43. Duckworth W.C., Bennet R.G., Hamel F.G. The significance of intracellular insulin to inculin action // J. Investig Med. – 1997 Feb. – Vol. 45 - №2. Р. 20 – 27.
44. Gambir K.K, Nerurkar S.G. Characterization of an interacellular insulin – degrading enzyme in human erythrocytes // Biochem. Med. Metab. Biol - 1988. – Jun. – Vol. 39. №3. Р.284-289.
45. George A., Burghen A., Abbas E. Kitabchi, James S. Brush. Characterization of Rat Liver Protease with Specificity for Insulin // Endocrinology. – 1972. – Vol. 91. - №3. – Р. 633 – 642.
46. Roth R.A., Jhang B., Chin J.E., Kovacina K. Substrates and signaling complexes: the lortured path to insulin action //J. Cell. Biochem. – 1992. – Vol. 48 – P. 12 – 18.
47. Ebrahim A., Hamel F.G., Bennet R.G., Ducrworth W.C. Identifiacation of the metal associated with the insulin degrading enzyme // Biochem. Biophys. Res. Commun. – 1991 Dec 31. – Vol. 181 - №3. Р. 1398 – 1406.
48. Ansorge S., Bohly P.L., Kirschke J., Langner J., Wiederanders B. The insulin and glucfgon degradation protease of rat liver: a metal dependent enzyme //Biomed. Biochem. Acta. – 1984. – Vol. 43. – P. 39 -46.
49. Rawlings N.D., Barrett A.J., Homologues of insulinase, a new superfamily of metalloendopeptidases // Biochem. J., 1991 Apr., Vol .275- № 2. – Р. 389 – 391.
50, Rawlings N. D., Barret A.J. Potential metal ligands in the insulinase superfamily of endopeptidases // Biochem. Soc, Trans. – 1991* Aug. – Vol.19.-
№3.-P.289.
51. Bellomo G., Bellazzi R., Nicotera p.L., Francesconi R., Fratino p. Binding and degradation of [125-J]-insulin in human erythrocytes. Comparative studies with hemolisate and membranes //J.Endocrinol.Invest.-1982.- Sep.-Oct.- Vol. 5.-№5.-p.287-291.
52. Hildebrandt w., Kohnert K.D., Blech w. Glucagon and insulin degradation by hemolysate of human erytrocytes // Biomed. Biochem. Acta.-1987.- Vol. 46.- № 7.- P. 557-563.
53. Kirschner R.J., Goldberg A.L. // Methods in Enzymology, 1981, 80, 702-711.
54. Bennett R.G., Hamel F.G., Duckworth W.C. Characterization of the insulin inhibition of the peptidolytic activities of the insulin-degrading enzyme-proteasome complex//Diabetes.- 1997 Feb.-Vo1.46.-№2.-p. 197-203.
55. Bansal D.D., Jhamb A. [125-J]-insulin degradation by normal rabbit erythrocyte membranes solubilized in different detergents lllndian. J. Exp.Biol.- 1987 Dec.-Vol. 25.-№12.-P.869-870.
56' Misbin R.I', Almira E.G. Degradation of insulin-like growth factors byenzyme purified from human erythrocytes. Comparison of degradation products observed with A 14- and B 26-[125] monoiodoinsulin //Diabetes 1989 Feb., Vo1.38. -№2.-p. 152-I58.
57. Варейкис Э. Й., Матулявичюс В.А., Лашас Л.В. и др.// В сб.: Теоретические и практические аспекты познания биохимических процессов, 1983.
58. Матулявичюс В.А., Варейкис Э.Й., Лашас Л.В. Инсулиноподобное вещество и инсулиндеградирующий комплекс гемолизата эритроцитов
человека // Биохимия, 1986.- Т.5.- вып. 2.-С. 278- 284.
59. Kuo W.L., Gehm B.D., Rosner M.R. Regulation of insulin degradation: expression of an evolutionarily conserved insulin-degrading erizyme increases degradation via an intracellular pathway //Mol. Endocrinol- 1991 Oct.-Vo1.5.-№10.-P.1467-1476
6l. Perlman R.K., Gehm 8.D., Kuo W.L., Rosner M.R. Functional analysis of conserved residues in the active site.-of insulin-degrading enzyme //J. Biol.Chem.-I993 Oct I5.-VoI.268.-№29.-P.2 1538-25144.
60. Shii K., Yokono K., Baba S., Roth R.A. Purification and characterization
of insulin-degrading enzyme from human erythrocytes //Diabetes.- 1986.- Jun.-Vol 35.-№6.-P. 675-683.
62. Йонушас Б.С. Инсулиназная активность крови у здоровых лиц и больных сахарным диабетом // Автореф.дис.канд.мед.наук, М., 1989.-23 с.
63. Баева Е.В., Чумак Д.А., Сандуляк Л.И. Связывание инсулина эритроцитами при облучении крови //В кн.: Облучение крови вне opraнизмa. M., 1980.- C. 15-17'
64. Lowry O., Rosenbryl N., Farr A. Protein measurement with the folin phenol reagent //J.Biol. Chem. 1954.-V. |93.-P.262-275.
ТАШКЕНТ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ИНСТИТУТ
Факультет Промышленной фармации Магистр Н.Н. Исматуллаева
Кафедра Биотехнология
Учебный год 2011 – 2013й Специальность Технология препаратов
иммонобиологическая и микробиологическая
АННОТАЦИЯ НА МАГИСТРСКУЮ ДИССЕРТАЦИИ
Актуальность исследований. Сахарный диабет является одной из важных медико-социальных проблем здравоохранения практически всех стран мира.
Цель и задачи работы. Представленное исследование проведено с целью изучения инсулин деградирующего комплекса. Исследование молекулярных механизмов метаболизма инсулина проведено для оценки вклада компонентов инсулин деградирующего комплекса эритроцитов в этот процесс. Кроме того, целью данного исследования являлось обнаружение изменений параметров связывания инсулина эритроцитами при диабете. В связи с этим, необходимо было решить следующие задачи:
Теоретическое и практическое значение.
В результате выполнения работы оптимизированы методы выделения и очистки компонентов инсулин деградирующего комплекса эритроцитов. Это позволило получить инсулиназу лизата эритроцитов и инсулиназный ингибитор из лизата эритроцитов с достаточно высокой степенью очистки. Полученные результаты показывают зависимость инсулин деградирующей активности эритроцитов от содержания инсулина в крови. В результате исследований связывания инсулина рецепторами мембраны эритроцитов установлено наличие двух типов инсулиновых рецепторов. Установлено, что количество и сродство этих рецепторов на мембране эритроцитов зависит от концентрации инсулина в крови. Изучение инсулиназного ингибитора из лизата эритроцитов позволило установить зависимость его активности от инсулинопении. Исследование обмена инсулиназы в гепатоцнтах и зависимость ее активности от стадий экспериментального диабета показали, что активность этого фермента формируется на уровне его синтеза. Изменения активности компонентов инсулин деградирующего комплекса эритроцитов могут служить критериями диагностики инсулин зависимого диабета у человека.
Объем работы.
Текст диссертации изложен на 57 странице и иллюстрирован 7 таблицами и 4 рисунками. Диссертация включает в себя "введение", "обзор литературы", "материалы и методы исследования", "результаты исследований" и их обсуждение, "выводы", "список литературы", содержащий 64 наименований работ отечественных и зарубежных авторов.
Tashkent Pharmaceutical Institute
Department of Industrial Pharmacy Master of N.N. Ismatullaeva
Department of Biotechnology
Academic year 2011 - the 2013th
immonobiological and microbiological
SUMMARY FOR Master's THESIS
The relevance of research. Diabetes mellitus is one of the important medical and social problems of health of almost all countries of the world.
Purpose and objectives. This study conducted to investigate the insulin degrading complex. The study of the molecular mechanisms of insulin metabolism conducted to evaluate the contribution of components of insulin-degrading complex of red blood cells in the process. Furthermore, the aim of this study was to detect changes in the parameters of binding erythrocytes insulin in diabetes. In this regard, it was necessary to solve the following tasks:
• Develop a insulinase isolation and purification, as well as an inhibitor of insulinazе lysate of erythrocytes.
• Develop biospetcial Chromatography.
• Preparation of the sorbent.
• Getting ekstarkta from the lysate
The theoretical and practical importance.
As a result of optimized methods of isolation and purification of insulin degrading complex components erythrocytes. It is possible to obtain a lysate of erythrocytes and insulinase inhibitor insulinazny lysate of erythrocytes with a sufficiently high degree of purification. The results show the dependence of insulin degrading activity of the erythrocyte content of insulin in the blood. As a result, insulin receptor binding studies erythrocyte membrane set having two types of insulin receptors. Found that the number and affinity of receptors on the erythrocyte membrane depends on the concentration of insulin in the blood. Study insulinazе inhibitor of erythrocyte lysate possible to establish the dependence of its activity from insulinopenii. Study exchange insulinase in gepatotsntah activity and its dependence on the pilot stage diabetes showed that the activity of this enzyme is formed at its synthesis. Changes in insulin-degrading activity of the components of the complex of red blood cells may serve as criteria for diagnosis of insulin-dependent diabetes in humans.
The amount of work.
The text of the dissertation is set out on page 57 and illustrated with 7 tables and 4 figures. Thesis includes "Introduction", "literature review", "Materials and Methods", "findings" and their discussion, "findings", "reading list" containing the names of 64 works by national and foreign authors.
Информация о работе Иммунобиологик ва микробиологик препаратлар технологияси мутахассислиги