Формирование вывода и заключения специалиста и эксперта по днк анализу

1. СУДЕБНАЯ ЭКСПЕРТИЗА  КАК ОСНОВНАЯ ФОРМА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ  СПЕЦИАЛЬНЫХ НАУЧНЫХ ЗНАНИЙ В  УГОЛОВНОМ СУДОПРОИЗВОДСТВЕ.

1.1. Роль, значение  и история развития молекулярно-генетических  исследований.

Еще в середине 19-века Людвиг Тейхман-Ставларски впервые открыл доказательный метод установления наличия крови в следах с помощью химической реакции (раствора поваренной соли и ледяной уксусной кислоты), а в конце 19-века немецкие ученые Бунзен и Киргоф разработали надежный метод установления наличия крови с помощью спектроскопии.

Очень важно было решить вопрос о происхождении крови (от человека или животного). Первые опыты проводились на жидкой крови, видовую принадлежность которой устанавливали по наличию, размеру и форме ядер в клетках. Однако эти методы не были пригодны для исследования следов крови. Решить проблему удалось только в 1899 году, когда русский исследователь-патологоанатом Ф.Я. Чистович открыл реакцию преципитации, а П. Уленгут использовал это открытие для установления видовой принадлежности крови. Этот метод начал широко применяться и стал неотъемлемой частью любого исследования при проведении экспертиз следов крови, но и его со временем оказалось недостаточно для доказывания факта принадлежности следов конкретному лицу.

Открытие Ландштейнером трех групп крови системы АВ0, а позднее Дунгерном еще одной группы этой системы легло в основу практических экспериментов М. Рихтера в области установления групп крови в следах. Внедрение в практику методики установления групповой принадлежности крови в следах на вещественных доказательствах позволило делать вывод о возможности (или невозможности) происхождения пятен крови от определенного лица. Особенно важным являлось то, что стало возможным исключать происхождение крови от конкретного человека. Совпадение групповой принадлежности имело значение лишь в сумме доказательств, так как нельзя категорично утверждать о происхождении крови именно от данного человека, а не от других лиц с такой же группой крови. Вскоре стало очевидным, что в большинстве случаев четыре группы крови системы АВ0 не дают возможность исключить (или подтвердить) происхождение следов от конкретного человека, поэтому судебные медики искали другие системы групп крови. Так, в 1927 г. в эритроцитах человека были открыты антигены M и N, а позднее в данной системе MN – антигены S и s.

Принципиально решить задачу идентификации личности позволил революционный молекулярно-генетический метод, основанный на исследовании ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) клетки. ДНК - сложное химическое соединение, была открыта давно в ядре клетки, но ее функция как хранителя наследственной информации оставалась неизвестной. Френсис Крик в 1953 году вместе с Джеймсом Уотсоном открыли структуру ДНК - как вещества, которое содержит всю наследственную информацию во всех живых организмах. Через несколько месяцев после исторического заявления вышла осторожная публикация работы двух исследователей в журнале «Nature», где делалось предположение о том, что открытие структуры ДНК может объяснить механизмы копирования генетического материала. За это открытие Уотсон и Крик в 1962 году получили Нобелевскую премию по физиологии и медицине.

Раскрывая понятие ДНК можно сказать следующее, что дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) является носителем генетической информации обо всех признаках организма и представляет собой сложное высокомолекулярное соединение, состоящее из последовательности химически связанных между собой нуклеотидов. Каждый нуклеотид включает в себя азотистое основание, состоящее из атомов углерода и азота, пятиуглеродное сахарное кольцо (дезоксирибозу) и остаток фосфорной кислоты или фосфатную группу (рис. 1).

Как показано на рис. 1, азотистые основания делятся на два типа: пуриновые и пиримидиновые. Пурины имеют по два конденсированных кольца: одно – пятичленное, другое – шестичленное. Пиримидины состоят из одного шестичленного кольца. В состав ДНК входят основания четырех типов – аденин, гуанин, тимин и цитозин. Эти основания обычно обозначаются их начальными буквами – A, G, T и C.

Азотистые основания соединены с дезоксирибозой гликозидной связью, которая в случае пиримидинового основания образуется между первым атомом пентозного кольца и третьим атомом основания, а в случае пуринового основания – между первым атомом пентозного кольца и девятым атомом основания. Данное соединение (т.е. соединение, состоящее из азотистого основания и сахара) называется нуклеозидом. Чтобы отличить атомы дезоксирибозы от атомов азотистых оснований, их положение принято обозначать номером со штрихом (…').

Нуклеотиды образуют цепь, остов которой состоит из чередующихся остатков дезоксирибозы и фосфорной кислоты, соединенных фосфодиэфирной связью. Атом в 5'-положении одного пентозного кольца соединен через остаток фосфорной кислоты с атомом в 3'-положении следующего пентозного кольца. Азотистые основания не участвуют в формировании остова цепи. Нуклеотид на одном конце цепи имеет свободную 5'-группу (5'-конец), а на другом – 3'-группу (3'-конец). Последовательность нуклеотидов (азотистых оснований) принято обозначать в направлении от 5'-конца к 3'-концу. В этой последовательности закодирована генетическая информация, носителем которой является ДНК.

Согласно первой модели ДНК, предложенной в 1953 г. Уотсоном и Криком, ДНК состоит из двух полинуклеотидных цепей, скрученных в спираль. Эти цепи не связаны ковалентно, а соединяются водородными связями, возникающими между азотистыми основаниями. При этом A может образовывать водородную связь только с T, тогда как G специфически соединяется только с C. Эти реакции называют спариванием оснований, а об основаниях, способных спариваться (A с T и G с C), говорят, что они комплементарны (рис. 2). При специфическом спаривании оснований между A и T образуются две водородные связи, а между G и C – три.

Азотистые основания имеют плоскую форму и располагаются парами перпендикулярно оси спирали. Если рассматривать спираль вдоль оси, то видно, что одна цепь идет в направлении 5'–3', а другая 3'–5', т.е. полинуклеотидные цепи в ДНК антипараллельны. Фосфатные группы располагаются с внешней стороны спирали, имеют отрицательный заряд и требуют нейтрализации ионами металлов или положительно заряженными белками.

Таким образом, по своему строению ДНК является сложным полимерным соединением. Размер молекул ДНК, как и любых других полимерных соединений, может сильно варьировать. Так как мономерные соединения в ДНК – это нуклеотиды, а ДНК – двухцепочечная структура, то размер молекул ДНК принято измерять в парах нуклеотидов (п.н.) или парах оснований (п.о.).

Теоретической основой внедрения молекулярно-генетических исследований, явилось открытие в 1985-1997 годах XX века, английским ученым А. Джефрейсом, особых семейств гипервариабельных участков - минисателлитную ДНК, располагающуюся сразу в нескольких локусах хромосом [3]. Общая структурная организация минисателлитной ДНК оказалась индивидуальной для каждого человека, что и было использовано для идентификации личности.

Данное открытие и послужило началом развития ДНК-анализа в судебной медицине. «Отпечатки» ДНК генетически детерминированы, обладают достаточной устойчивостью и индивидуальной специфичностью, идентичны в любой ядросодержащей ткани одного человека и неизменны на протяжении жизни человека. Совпадают они только у однояйцевых близнецов.

Однако изучение специальной литературы показывает, что основами генетических исследований, послужили труды в 1866 году чешского священника Г. Менделя посвященным наследованию окраски цветков садового гороха, где им была высказана мысль, что за наследование физических свойств организма отвечают некие «элементы», которые в настоящий момент называются генами [4].

Несмотря на то, что это открытие в то время не могло иметь к молекулам ДНК какое-либо отношение, так как понятие ген не было известно, оно заложило определенные основы для последующего изучения наследственности и, соответственно, генов. Три года спустя, в 1869 году швейцарским врачом Ф. Мишером в ядрах лейкоцитов человека была впервые обнаружена названная им «нуклеином» особая субстанция, позже переименованная Р. Альтманом в нуклеиновую и еще позже в дезоксирибонуклеиновую кислоту, функция которой была неизвестной [4 с.6]. В этой связи нельзя не упомянуть американского ученого Т. Моргана, который опубликовал в 1909 году результаты своих первых экспериментов в области генетики, что было отмечено присуждением ему Нобелевской премии 1933 году за открытие функций хромосом, как носителей наследственности.

На протяжении следующих лет осуществлялись многочисленные попытки выделить вещество клетки, те самые «элементы», в которых заложена генетическая информация. И только в 1943 году благодаря экспериментам О. Эвери и его коллег, удалось доказать, что именно ДНК – этот сравнительно просто организованный биополимер – и есть вещество наследственности. В опытах с бактериофагами, будущими Нобелевскими лауреатами 1969 года М. Дельбрюком, А. Херши и С. Лурия в середине 40-х гг. еще более убедительно было показано участие ДНК в передаче наследственной информации [5].

C сфере борьбы с преступностью, внедрение результатов молекулярно-генетических исследований, началось с 1988 года, и только в 1990 году была проведена первая экспертиза с использованием данного метода. Применялся метод полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ), который заключался в том, что выделенное ДНК «разрезали» с помощью специальных ферментов - рестриктаз на фрагменты, а фрагменты разделяли электрофорезом в геле и выявляли полиморфные фрагменты из всего набора фрагментированного ДНК с помощью гибридизационного анализа. При этом использовались зонды, комплиментарные тем или иным участкам ДНК, как импортные на основе участка фага М13, запатентованного Г. Вассартом, так и российские, разработанные Е. Рогаевым, А. Шленским [3].

В постсоветском пространстве, а именно в криминалистике развитие методов ДНК-анализа (генотипоскопии) началось с 1988 г., когда Государственным комитетом СССР по науке и технике было принято решение об организации лаборатории генотипоскопии на базе Всесоюзного научно-криминалистического центра МВД СССР. Методы анализа ДНК оказались чрезвычайно интересны для криминалистики, так как ДНК обладает индивидуальной специфичностью (совпадает только у однояйцовых близнецов), идентична в любой ядросодержащей клетке организма одного человека и неизменна на протяжении всей его жизни [6]. Одним из главных положительных моментов следует отметить то, что при проведении одного исследования можно установить множество признаков, которые позволяют с большой долей вероятности устанавливать происхождение следа от конкретного лица, а также биологическое родство. Кроме того, использование методов анализа ДНК позволяет устанавливать половую принадлежность исследуемых объектов.

Особенно ценна возможность создания криминалистических учетов, когда необходимо накопление и сохранение данных исследования следов для последующего поиска подозреваемых лиц путем сравнения их данных с уже имеющимися в базе. В нашей стране еще в 1994 г. было принято решение о создании «генно-дактило-скопических учетов», но в связи со сложной экономической ситуацией работа в этом направлении практически приостановлена.

Опыт применения ДНК-анализа в практике ЦСЭ МЮ Республики Казахстан и ГУ ЭКЦ МВД России, а также зарубежных лабораторий показал его высокую эффективность, поэтому в настоящее время ДНК-идентификация имеет существенный приоритет в практике экспертно-криминалистических служб ряда индустриально развитых стран мира (Великобритания, Германия, США, России и др.) и около 5-6  биологических лабораторий МЮ и ОВД Республики Казахстан.

Все это способствуют раскрытию и расследованию преступлений. Так как на сегодняшний день особую тревогу вызывает рост насильственных преступлений в особенности тяжких, особо опасных преступлений, связанных с человеческими жертвами, сексуальными и другими видами насилия.

Эта ситуация усугубляется снижением уровня выявления, раскрытия и качества расследования преступлений, что провоцирует перед правоприменительными органами поиск путей позволяющих значительно повысить эффективность своей деятельности.

В связи с этим, в Концепции правовой политики Республики Казахстан на период с 2010 до 2020 года, в качестве приоритетных направлений деятельности правоохранительных органов государство определило: борьбу с преступностью, обеспечение законности и общественной безопасности, защиту прав и свобод граждан, обеспечение неотвратимости реакции государства на любые правонарушения, быстрое и полное раскрытие преступлений, изобличение и привлечение к уголовной ответственности лиц, их совершивших, профилактика правонарушений, взаимодействие с гражданами в борьбе с преступностью [7].

Указанные задачи являются приоритетными и для криминалистической науки. Преступление, а именно событие преступления как одно из материальных явлений действительности, исходя из основополагающих положений теории познания, обладает свойством отражения своих характерных черт в окружающей среде в виде различного рода следов-последствий. Поскольку окружающая преступление среда структурно весьма разнообразна из-за наличия в ней различных объектов неживой природы и людей, то данное криминальное событие оставляет изменения (отражается) в ней в виде материальных или нематериальных (идеальных) следов-последствий. В результате чего возникает информация о всех обстоятельствах и особенностях данного деяния. Эти следы, связанные причинно-следственными связями, являются источниками доказательственной информации об обстоятельствах его совершения и лицах его совершивших. С целью получения такой информации, с последующим использованием его в процессе раскрытия и расследования преступления, необходимо обнаружить следы преступления, зафиксировать их, изъять и в последующем исследовать. Данная задача часто решается при проведении следственных действий и оперативно-розыскных мероприятий, как правило, с помощью различных научно-технических средств и методов, т.е. криминалистической техники.